Двигатель ЗМЗ-4021.10 Волга,Газель(первый ремонт гарантия 6 мес.) Артикул 4021.1000400-70.
Компания «Центр Запчастей» предлагает купить Бензиновый двигатель ЗМЗ-402.10 евро 0 для 5-ти ступенчатой и 4 ст. коробки передач каталожный номер – 4021.1000400-70 двигатель ЗМЗ-402 разрабатывался для автомобилей «ГАЗ» и ГАЗ-24 Волга, ГАЗ-3110 Волга, ГАЗ-3302 Газель под бензин АИ-92, 76 100 л.с. от производителя ЗМЗ Заволжского Моторного Завода. Сам мотор представляет собой немного доработанный двигатель ГАЗ-24Д. Модернизации коснулись головка блока цилиндров, масленый насос, выпускной коллектор. На двигателе установлен иной распределительный вал с увеличенным подъемом клапанов на 0,5 мм (9,5 мм вместо 9,0мм). 402-ой двигатель имеет архаичную конструкцию 50х годов. В двигателе нижнее расположение распределительного вала, который посредствам дюралюминиевых штанг через коромысла толкает клапаны. Вместо заднего сальника коленчатого вала используется набивка, которая становится частой причиной потери масла из-за особенностей конструкции и некачественной сборки двигателя.
В целом ЗМЗ 402 простой и надежный мотор по меркам 70-х и даже 80-х годов. Он прост в обслуживании, неприхотлив, без проблем переваривает не самое хорошее топливо и обладает огромной ремонтопригодностью. За всю свою жизнь (вплоть до 2006 года) мотор претерпевал самые разные изменения и существует несколько вариантов его исполнения (см. ниже).
Ресурс двигателя ЗМЗ 402 нельзя назвать впечатляющим, но и небольшим его не назовешь. Если все делать правильно и вовремя, не крутить двигатель до высоких оборотов, следить за течами масла и вовремя их устранять, то мотор спокойно выхаживает 250 тыс. км и более. На смену ЗМЗ 402 пришел новый мотор — более мощный и экономичный ЗМЗ 406.Двигатель поступает в продажу первой комплекции со всем навесным оборудование а именно генератор ,стартер, карбюратор , сцепление.
Характеристики двигателя ЗМЗ-402.10 Волга, Газель ГАЗ-3302.
Конфигурация L
Число цилиндров 4
Объем, л 2,445
Диаметр цилиндра, мм 92,0
Ход поршня, мм 92,0
Степень сжатия 6,7 (8,2)
Число клапанов на цилиндр 2 (1-впуск; 1-выпуск)
Газораспределительный механизм OHV
Порядок работы цилиндров 1-2-4-3
Номинальная мощность двигателя / при частоте вращения коленчатого вала 66,2 кВт — (90 л.с.) / 4800 об/мин
(73,5 кВт — (100 л.с.) / 4800 об/мин)
Максимальный крутящий момент / при частоте вращения коленчатого вала 172 Н•м / 2500 об/мин
(182 Н•м / 2500 об/мин)
Система питания Карбюратор К-151, К-126
Рекомендованное минимальное октановое число бензина 76 (92)
Экологические нормы Евро 0
Вес, кг 180
Устройство системы смазки двигателя ЗМЗ-402
_____________________________________________________________________________
Устройство системы смазки двигателя ЗМЗ-402
Система смазки двигателя ЗМЗ-402 автомобилей ГАЗ-3110 Волга, ГАЗ-2705
Газель (рис.7) комбинированная: под давлением и разбрызгиванием.
Маслом под давлением смазываются коренные и шатунные подшипники коленчатого вала, подшипники распределительного вала, упорные подшипники коленчатого и распределительного валов, втулки коромысел и верхние наконечники штанг толкателей. Остальные детали смазываются разбрызганным маслом.
Рис.7. Схема системы смазки ЗМЗ-402 автомобилей ГАЗ-3110 Волга, ГАЗ-2705 Газель
1 — приемный патрубок масляного насоса; 2 -редукционный клапан; 3 — масляный радиатор; 4 — отверстие для слива масла; 5 — датчик указателя давления масла; 6 — масляная магистраль; 7 — отверстие для подачи масла к шестерням масляного насоса; 8 — винтовая канавка; 9 — трубка для смазки распределительных шестерен; 10 — канавка на первой шейке распределительного вала; 11 — крышка маслозаливной горловины; 12 — канал в коленчатом вале; 13 — пробка; 14 — перепускной клапан закрыт; 14а — перепускной клапан открыт; 15 — канал для подачи масла к оси коромысел; 16 — фильтрующий элемент; 17 — пробка для слива отстоя; 18 — отверстие для разбрызгивания масла; 19 — датчик лампы аварийного давления масла; 20 — клапан масляного радиатора; 21 — запорный краник масляного радиатора; 22 -масляный насос; 21 — пробка; 24 — указатель уровня масла
В систему смазки мотора ЗМЗ-402 (ГАЗ-402) входят масляный насос 22 (рис.7) с приемным патрубком и редукционным клапаном (установлен внутри масляного картера), масляные каналы, масляный фильтр с перепускным клапаном, масляный картер, указатель уровня масла, крышка маслозаливной горловины.
Масло, забираемое насосом из масляного картера двс, поступает через маслоприемник по каналам в корпусе насоса и наружной трубке в корпус масляного фильтра.
Далее, пройдя через фильтрующий элемент 16, масло поступает в полость второй перегородки блока цилиндров, откуда по сверленому каналу — в масляную магистраль — продольный масляный канал 6.
Из продольного канала масло по наклонным каналам в перегородках блока ЗМЗ-402 (ГАЗ-402) подается на коренные подшипники коленчатого вала и подшипники распределительного вала.
Масло, вытекающее из пятой опоры распределительного вала в полость блока между валом и заглушкой, отводится в картер через поперечное отверстие 4 в шейке вала.
На шатунные шейки масло поступает по каналам 12 от коренных шеек коленчатого вала.
В ось коромысел масло подводится от задней опоры распредвала ЗМЗ-402 автомобилей ГАЗ-3110 Волга, ГАЗ-2705 Газель, имеющей посередине кольцевую канавку, которая сообщается через каналы 15 в блоке, головке цилиндров и в четвертой основной стойке оси коромысел с полостью в оси коромысел.
Через отверстия в оси коромысел масло поступает на втулки коромысел и далее по каналам в коромыслах и регулировочных винтах на верхние наконечники штанг толкателей.
К шестерням привода распределительного вала ЗМЗ-402 (ГАЗ-402) масло подводится по трубке 9, запрессованной в отверстие в переднем торце блока, соединенное с кольцевой канавкой 10 на первой шейке распределительного вала.
Из выходного отверстия трубки, имеющего малый диаметр, выбрасывается струя масла, направленная на зубья шестерен.
Через поперечный канал в первой шейке распределительного вала масло из той же канавки шейки поступает и на упорный фланец распределительного вала.
Шестерни привода масляного насоса смазываются струей масла, выбрасываемой из канала 7 в блоке, соединенного с четвертой шейкой распределительного вала, также имеющей кольцевую канавку.
Стенки цилиндров мотора ЗМЗ-402 смазываются брызгами масла от струи, выбрасываемой из отверстия 18 в нижней головке шатуна при совпадении этого отверстия с каналом в шейке коленчатого вала, а также маслом, вытекающим из-под подшипников коленчатого вала.
Все остальные детали, (клапан — его стержень и торец, валик привода масляного насоса и датчика-распределителя зажигания, кулачки распределительного вала) смазываются маслом, вытекающим из зазоров в подшипниках и разбрызгиваемым движущимися деталями двигателя. Емкость системы смазки 6 л.
Масло в двигатель заливается через маслозаливную горловину, расположенную на крышке коромысел и закрываемую крышкой с уплотнительной резиновой прокладкой. Уровень масла контролируется по меткам «П» и «О» на стержне указателя уровня.
Давление масла в системе смазки двигателя определяется по указателю на щитке приборов, датчик которого ввернут в блок цилиндров. Кроме этого, система снабжена сигнальной лампой аварийного давления масла, датчик которой ввернут в отверстие в нижней части фильтра.
Сигнальная лампа находится на панели приборов, светится красным светом при понижении давления в системе ниже 40-80 кПа (0,4-0,8 кгс/см2).
Масляный насос ЗМЗ-402
Масляный насос мотора ЗМЗ-402 автомобилей ГАЗ-3110 Волга, ГАЗ-2705 Газель (рис.8) шестеренчатого типа установлен внутри масляного картера.
Насос прикреплен двумя шпильками к наклонным площадкам на третьей и четвертой перегородках блока цилиндров. Точность установки насоса обеспечивается двумя штифтами-втулками, запрессованными в блок цилиндров.
Рис.8. Масляный насос двс ЗМЗ-402
1-приемный патрубок с сеткой; 2- крышка; 3 — ведущая шестерня; 4 — корпус; 5 — валик; 6 — ведомая шестерни; 7 — прокладка; 8 — прокладка патрубка
Корпус маслонасоса ЗМЗ-402 автомобилей ГАЗ-3110 Волга, ГАЗ-2705 Газель отлит из алюминиевого сплава, шестерни 3 и 6 имеют прямые зубья и изготовлены из металлокерамики (спеченного металлопорошка). Ведущая шестерня 3 закреплена на валике 5 штифтом.
На верхнем конце валика сделано шестигранное отверстие, в которое входит вал привода масляного насоса. Ведомая шестерня 6 свободно вращается на оси, запрессованной в корпус насоса.
Крышка 2 масляного насоса изготовлена из серого чугуна и крепится к насосу четырьмя болтами. Под крышку поставлена картонная прокладка 7 толщиной 0,3 мм.
Маслоприемник и приемный патрубок 1 масляного насоса выполнены в виде одной детали из алюминиевого сплава.
На приемной части патрубка завальцована сетка. Патрубок крепится к масляному насосу четырьмя болтами вместе с крышкой масляного насоса через паронитовую прокладку 8.
Редукционный клапан плунжерного типа расположен в корпусе масляного насоса. На торец плунжера 1 действует давление масла, под влиянием которого плунжер, преодолевая усилие пружины 2 перемещается.
При достижении определенного давления плунжер открывает отверстие сливного канала, пропуская излишнее масло в приемную полость насоса.
Пружина редукционного клапана опирается на плоскую шайбу 3 и крепится шплинтом 4, пропущенным через отверстия в приливе на корпусе насоса,
Редукционный клапан не регулируется; необходимая характеристика по давлению обеспечивается геометрическими размерами в корпусе насоса и характеристикой пружины.
Привод масляного насоса ЗМЗ-402 и распределителя зажигания
Привод масляного насоса ЗМЗ-402 автомобилей ГАЗ-3110 Волга, ГАЗ-2705 Газель и датчика-распределителя зажигания (рис.9) осуществляется от распределительного вала парой винтовых шестерен. Ведущая шестерня — стальная, залита в тело чугунного распределительного вала.
Рис.9. Привод масляного насоса и распределителя зажигания ЗМЗ-402 автомобилей ГАЗ-3110 Волга, ГАЗ-2705 Газель
1 — датчик-распределитель зажигания; 2 — втулка; 3 и 9 — штифты; 4 — корпус; 5- валик; 6- стальная упорная шайба; 7 — бронзовая упорная шайба; 8 — шестерня; 10 — валик привода масляного насоса
Ведомая шестерня 8 стальная, термоупрочненная, закреплена штифтом на валике 5, вращающемся в чугунном корпусе. Верхний конец валика снабжен втулкой 2, имеющей прорезь (смещена на 1,15 мм от оси валика) для привода распределителя зажигания.
Втулка на валике закреплена штифтом 3. С нижним концом валика шарнирно соединен шестигранный валик 8, нижний конец которого входит в шестигранное отверстие валика масляного насоса.
На валике 5 между шестерней 8 и корпусом установлены бронзовая шайба 7 и стальная термообработанная шайба 6.
При вращении шестерня через шайбы поджимается к торцу чугунного корпуса привода, а для улучшения смазки трущихся пар на торце корпуса профрезерована диаметрально расположенная канавка.
Правильное положение распределителя зажигания на двигателе ЗМЗ-402 автомобилей ГАЗ-3110 Волга, ГАЗ-2705 Газель обеспечивает такой установкой привода в блоке, при которой в момент нахождения поршня первого цилиндра в ВМТ (такт сжатия) прорезь на втулке привода располагается параллельно оси двигателя на максимальном удалении от нее.
В запчасти привод поступает в сборе и отдельно шестигранный валик привода масляного насоса.
Поэтому разбирать привод следует лишь при износе шестигранного валика или незначительном износе корпуса (зазоре между корпусом и шестерней 0,5-1,0 мм).
При износе шестерни, валика привода или значительном износе корпуса привод заменить.
Порядок разборки привода масляного насоса и распределителя зажигания ЗМЗ-402 автомобилей ГАЗ-3110 Волга, ГАЗ-2705 Газель:
— выпрессовать штифт шестерни привода с помощью бородка и снять шестигранный валик привода масляного насоса;
— спрессовать шестерню. Для этого установить корпус привода верхним торцом за подставку с отверстием, чем обеспечивается свободный проход валика в сборе с упорной втулкой. Усилие выпрессовки прилагать к концу валика через оправку 0.12 мм
Порядок сборки привода масляного насоса и распределителя зажигания ЗМЗ-402:
— вставить в корпус валик в сборе с втулкой, смазав его моторным маслом;
— надеть на валик стальную и бронзовую упорные шайбы. Толщина шайб должна быть подобрана с таким учетом, чтобы после напрессовки шестерни между шайбой и шестерней был зазор 0,15-0,40 мм;
— напрессовать шестерню на валик до совпадения отверстия под штифт в шестерне и валике;
— вставить в шестигранное отверстие валик привода масляного насоса;
— запрессовать в отверстие штифт диаметром 3,5 -0.05 мм и длиной 22 мм, расклепав его с обеих сторон;
— проверить рукой вращение валика, зазор между упорной шайбой и шестерней и радиальное перемещение свободного конца шестигранного валика привода масляного насоса. Радиальное перемещение должно быть не менее 1 мм в любом направлении.
Фильтр очистки масла ЗМЗ-402 (ГАЗ-402) (рис.10) — полнопоточный с картонным сменным фильтрующим элементом. Через фильтр проходит все масло, нагнетаемое насосом в систему.
Фильтр состоит из корпуса 3, крышки 8, центрального стержня 2 с перепускным клапаном 5 и фильтрующим элементом 9. Корпус фильтра изготовлен из алюминиевого сплава и крепится к блоку цилиндров через паронитовую прокладку четырьмя шпильками.
Рис.10. Масляный фильтр ЗМЗ-402 автомобилей ГАЗ-3110 Волга, ГАЗ-2705
Газель
1 — пробка сливного отверстия; 2 — стержень; 3 — корпус; 4 — пробка; 5 — перепускной клапан; 6 — уплотнительная прокладка; 7 — колпачковая гайка; 8- крышка; 9 — фильтрующий элемент; 10 — датчик аварийного давления масла
Центральный стержень фильтра полый.
В верхней его части расположен перепускной клапан, состоящий из текстолитовой пластины седла клапана, пружины и упора пружины.
В стержне просверлено пять рядов отверстий для прохода масла; верхний ряд расположен над клапаном и над фильтрующим элементом.
При нормальном состоянии элемента масляного фильтра его сопротивление невелико (около 10-20 кПа (0,1-0,2 кгс/см2), и все масло проходит через него, как показано на схеме стрелками.
Из фильтрующего элемента очищенное масло проходит через отверстия вовнутрь стержня и далее в систему смазки.
При засорении элемента его сопротивление увеличивается, и, когда давление достигает 70-90 кПа (0,7-0,9 кгс/см2), перепускной клапан открывается и начинает пропускать масло, минуя элемент.
В масляном фильтре ЗМЗ-402 автомобилей ГАЗ-3110 Волга, ГАЗ-2705 Газель применяются фильтрующие элементы Нами-ВГ-10, Реготмас-412-1-05 и Реготмас-412-1-06.
Уровень масла проверяют при неработающем двигателе по меткам на стержне указателя. Рекомендуется поддерживать уровень масла около метки «П», не превышая ее.
Понижение уровня масла ниже метки «О» опасно, так как при этом прекращается подача масла в систему и возможно выплавление подшипников. Расстояние между метками «П» и «О» соответствует объему масла — 2 л.
Уровень масла в системе смазки двигателя ЗМЗ-402 автомобилей ГАЗ-3110 Волга, ГАЗ-2705 Газель следует проверять через несколько минут после заливки или спустя 10-15 мин. после остановки двигателя.
После замены масла нужно запустить двигатель, дать ему поработать несколько минут и через 10-15 мин после остановки проверить уровень масла.
Сливать масло для замены нужно только на горячем двигателе, сняв крышку маслоналивной горловины. В этом случае масло имеет меньшую вязкость и хорошо стекает.
При смене масла следует также слить отстой из масляного фильтра, очистить внутреннюю поверхность корпуса и стержень и сменить фильтрующий элемент. Фильтрующий элемент перед установкой необходимо пропитать чистым моторным маслом.
При переводе эксплуатации на другую марку масла необходимо промыть систему смазки ГАЗ-402 специальным промывочным маслом или свежим маслом той же марки, на котором будет эксплуатироваться двигатель.
Для этого из картера прогретого двигателя надо слить старое масло, залить на 2-4 мм выше метки «О» на указателе уровня масла промывочное масло, пустить двигатель и поработать на режиме холостого хода при малой частоте вращения 15 мин; заглушить двигатель, слить масло из картера, заменить фильтрующий элемент и залить свежее масло.
Доливку масла во время эксплуатации производить только той марки, какая залита в двигатель.
Давление в системе смазки при средних скоростях движения автомоля (примерно 50 км/ч)
должно быть 200-400 кПа (2-4 кгс/см2).
Оно может повыситься на непрогретом двигателе до 450 кПа (4,5 кгс/см2) и упасть в жаркую погоду до 150 кПа (1,5 кгс/см2).
Уменьшение давления масла при средней частоте вращения ниже 100 кПа (1 кгс/см2) и при малой частоте вращения холостого хода ниже 50 кПа (0,5 кгс/см2) свидетельствует о неисправностях в системе смазки или о чрезмерном износе подшипников коленчатого и распределительного валов.
При понижении давления масла ниже 40-80 кПа (0,4-0,8 кгс/см2) загорается красным светом на панели приборов лампа аварийного давления.
Эксплуатировать автомобиль со светящейся лампой аварийного давления масла нельзя. Допустимо лишь кратковременное свечение лампы при малой частоте вращения холостого хода и при резком торможении. Если система исправна, то при некотором повышении частоты вращения лампа гаснет.
В случае занижения или завышения давления масла от приведенных выше
величин следует в первую очередь проверить исправность датчиков
указателей.
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
Общее устройство АКПП
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
CVT вариатор Ауди
Коробка автомат Toyota
_____________________________________________________________________________
АКПП Mazda/Mitsubishi
Коробка автомат ZF
Двигатели Mitsubishi
Двигатели Toyota
- Блок цилиндров и головка 3S-FE/3S-GE
- Техническое обслуживание ГРМ 3S-FE, 3S-GE
- Коленвал двигателей 3S-FE, 3S-GE
- Технические характеристики двигателя 3S-FE, 3S-GE
- Распредвалы 3S-FE и 3S-GE
- Система охлаждения двс 3S-FE и 3S-GE
- Топливная систем 3S-FE, 3S-GE
- Параметры двигателя 4A-FE, 5A-FE, 7A-FE и 4A-GE
- Головка и блок цилиндров двигателя 4A-GE, 4A-FE, 5A-FE, 7A-FE
- Дроссельная заслонка 4A-FE, 5A-FE, 4A-GE, 7A-FE
- Вентилятор системы охлаждения 4A-FE, 5A-FE, 7A-FE, 4A-GE
- Форсунки двигателей 4A-FE, 5A-FE, 4A-GE, 7A-FE
- Замена водяного насоса 4A-GE, 4A-FE, 5A-FE, 7A-FE
- Поршневая группа и коленвал двигателей 4A-FE, 5A-FE, 4A-GE, 7A-FE
- Диагностика двигателей 4A-FE, 5A-FE, 7A-FE и 4A-GE
- Замена компонентов блока цилиндра 4A-GE, 4A-FE, 5A-FE, 7A-FE
- Система охлаждения 4A-FE, 5A-FE, 4A-GE, 7A-FE
- Система смазки двигателей 4A-FE, 5A-FE, 4A-GE, 7A-FE
- Топливная система двигателей 4A-FE, 4A-GE, 5A-FE и 7A-FE
- Система зажигания 4A-FE, 5A-FE, 4A-GE, 7A-FE
- Термостат и радиатор двс 4A-FE, 5A-FE, 7A-FE, 4A-GE
- Бензонасос 4A-GE, 4A-FE, 5A-FE, 7A-FE
- Ремень ГРМ двигателей 4A-FE, 5A-FE, 7A-FE
- Снятие головки блока цилиндров двигателей 4A-FE, 5A-FE, 7A-FE
- Регулировки клапанов 4A-FE, 5A-FE, 7A-FE
- Монтаж головки блока цилиндров двигателя 4A-FE, 5A-FE, 7A-FE
- Замена ремня ГРМ 4A-GE
- Демонтаж головки блока цилиндров двигателей 4A-GE
- Настройки клапанов 4A-GE
- Монтаж головки блока цилиндров двигателя 4A-GE
- Детали двигателей 1AZ-FE / 2AZ-FE
- Блок управления и датчики 1AZ-FE и 2AZ-FE
- Компоненты рабочих систем двигателя 1AZ-FE, 2AZ-FE
- Система управления двигателем 1AZ-FE и 2AZ-FE
Двигатели ЗМЗ
технические характеристики, порядок работы цилиндров
Автомобильный двигатель ЗМЗ-402 – одна из самых известных моделей, использовавшаяся на многих машинах ГАЗ, включая широко распространенные ГАЗ Соболь и ГАЗ Газель.
Он начал выпускаться более сорока лет назад, но его конструкция оказалась настолько успешной, что ГАЗ с таким двигателем выпускались вплоть до 2000 г. И хотя сейчас этот мотор можно обнаружить разве что в запчастях, во многих автомобилях он до сих пор стоит, пусть и не отвечает современным требованиям к мощности.
Конструкция и устройство двигателя ЗМЗ-402
В серию ЗМЗ-402 входили три вида: 402.1, 402.2 и 402. Различаются они по уровню сжатия топливной смеси, который в зависимости от типа находится в промежутке от 6,7 до 8,2.
Это простые в использовании моторы, использующие бензиновое топливо. В них установлен карбюратор и по четыре цилиндра в ряду.
Конструкция двигателя ЗМЗ-402
Для увеличения герметичности блок цилиндров и верхняя сторона картера представляют собой единый компонент, отлитый из высокопрочного алюминиевого сплава и покрытый специальным составом.
По нижней стороне блок перегородками делится на четыре сектора, в которых размещены коренные подшипники коленчатого вала, крышки которых отлиты из ковкого чугуна. Их расточка происходит вместе с блоком, и ставить крышки на другое место нельзя. Для удобства на них выгравированы порядковые номера.
На передней части блока расположена алюминиевая крышка газораспределительного механизма. Сзади блока размещен картер сцепления.
Блок и головка цилиндров не нуждаются в особом уходе, кроме удаления скопившейся пыли и подтяжки резьбовых соединений.
Задний сальник является слабым местом двигателя ЗМЗ-402. Веревка, пропитанная графитовым составом, не рассчитана на эксплуатацию при высоких (более трех тысяч) оборотах коленвала. При недостатке смазки мотор просто ломается.
Простота конструкции позволяет ремонтировать и модифицировать мотор своими руками, без обращения к специалистам. Недостатком является высокая возможность перегрева при интенсивной эксплуатации.
Устанавливался двигатель ЗМЗ-402 на следующие машины:
- ГАЗ 2410;
- ГАЗ 3102;
- ГАЗ 31029;
- ГАЗ 3110;
- ГАЗ 31105;
- ГАЗ Соболь;
- ГАЗ Газель;
- некоторые модели УАЗ;
- микроавтобусы «Латвия».
Особенности двигателя моделей 402 и 4021 автомобиля ГАЗ-3110
Общий вид и поперечный разрез двигателей показаны на рисунках.
Двигатели рядные четырехцилиндровые, оборудованы карбюраторами и бесконтактной системой зажигания.
Оба аналогичны по конструкции, но двигатель мод. 4021 дефорсированный.
Блок цилиндров отлит из алюминиевого сплава. В него вставлены гильзы цилиндров, отлитые из износостойкого чугуна. В нижней части блока выполнены пять опор коренных подшипников.
Крышки коренных подшипников изготовлены из ковкого чугуна и крепятся к блоку двумя шпильками. Крышки подшипников обрабатывают совместно с блоком, поэтому их нельзя менять местами.
Крышка первого подшипника обработана по торцам совместно с блоком для установки двух упорных шайб для ограничения осевого перемещения коленчатого вала.
На крышках 2-го, 3-го и 4-го подшипников выбиты их порядковые номера.
К переднему торцу блока крепится крышка распределительных шестерен, отлитая из алюминиевого сплава, в которую вставлена манжета коленчатого вала.
К заднему торцу блока крепится картер сцепления.
Снизу к блоку крепится масляный картер, сверху — головка блока цилиндров.
Головка блока отлита из алюминиевого сплава. В ней вертикально установлены впускные и выпускные клапаны.
Привод клапанов осуществляется от распределительного вала, расположенного в блоке цилиндров, через толкатели, штанги и коромысла.
Ось коромысел клапанов установлена в головке блока на стойках. В головке блока с большим натягом установлены седла и направляющие втулки клапанов.
В нижней части головки блока выполнены камеры сгорания. Головки блоков двигателей мод. 402 и 4021 отличаются по объему камер сгорания и высоте.
Высота головки блока двигателя мод. 402 равна 94,4 мм, мод. 4021 — 98 мм. Сверху головка блока закрыта выштампованной из листовой стали крышкой.
Поршни отлиты из алюминиевого сплава, донышко поршня плоское.
Для правильной установки поршня в цилиндр на боковой стенке у бобышки под поршневой палец отлита надпись: «Перед».
Поршень устанавливают в цилиндр так, чтобы эта надпись была обращена к передней части двигателя. На каждом поршне установлены два компрессионных и одно маслосъемное кольца.
Верхнее компрессионное кольцо отлито из высокопрочного чугуна. Рабочая поверхность этого кольца покрыта слоем хрома для увеличения износостойкости.
Рабочая поверхность нижнего компрессионного кольца, отлитого из серого чугуна, покрыта слоем олова, что улучшает его приработку.
На внутренней поверхности этого кольца есть проточка. Кольцо должно устанавливаться этой проточкой вверх, к днищу поршня.
Маслосъемное кольцо состоит из четырех элементов: двух стальных дисков и двух расширителей, осевого и радиального. Рабочая поверхность дисков покрыта слоем хрома.
Поршень крепится к шатуну поршневым пальцем «плавающего» типа, т.е. палец не закреплен ни в поршне, ни в шатуне.
От перемещения палец удерживается двумя пружинными стопорными кольцами, которые установлены в канавках бобышек поршней.
Шатуны стальные кованые, со стержнем двутаврового сечения.
В верхнюю головку шатуна запрессована втулка из оловянистой бронзы. Нижняя головка шатуна с крышкой, которая крепится двумя болтами.
Гайки шатунных болтов стопорятся герметиком «Унигерм–9».
Крышки шатунов обрабатывают совместно с шатуном, поэтому их нельзя переставлять с одного шатуна на другой. На шатунах и крышках шатунов выбиты номера цилиндров.
В стержне шатуна у нижней головки выполнено отверстие для смазывания зеркала цилиндра. Это отверстие должно быть направлено вправо в сторону, противоположную распределительному валу.
Масса поршней, собранных с шатуном, не должна отличаться более чем на 12 г для разных цилиндров.
В нижнюю головку шатуна устанавливают тонкостенные шатунные вкладыши. Коленчатый вал отлит из высокопрочного чугуна.
От осевого перемещения вал удерживается упорными шайбами, установленными на передней шейке. В заднем торце вала есть гнездо для установки шарикового подшипника первичного вала коробки передач.
К заднему концу коленчатого вала четырьмя болтами крепится маховик, отлитый из серого чугуна.
Технические параметры ЗМЗ-402
Технические характеристики двигателя ЗМЗ-402:
Система охлаждения двигателя ЗМЗ-402
- Четыре цилиндра с двумя клапанами на каждом.
- Ход поршня составляет 92 мм.
- Диаметр цилиндра – 92 мм.
- Очередь действия цилиндров: 1-3-4-2.
- В качестве системы питания установлен карбюратор.
- Расход масла на 1000 км равен 100 гр.
- Мотор имеет массу 181 кг.
- Крутящий момент равен 182/2500 Нм/об. мин.
- Мощность мотора составляет 100 л. с. на 4500 оборотов в минуту.
- Рабочая температура мотора составляет приблизительно 90 градусов.
- Замену масла нужно проводить каждые 10000 км.
- Ресурс мотора составляет 200 тысяч километров.
- Объем двигателя – 2445 см3.
Автомобили ГАЗ с двигателем ЗМЗ-402 меньше загрязняют окружающую среду, так как в моторе предусмотрена система рециркуляции выхлопных газов.
ЗМЗ 405
Мотор ЗМЗ 405 является «братом-близнецом» 406-ому, самое главное отличие – расточенный блок цилиндров под гильзы с внутренним диаметром 95,5 мм. Соответственно, у этого двигателя больше мощность и объем цилиндров. С 2008 года для 31105 производится модификация ЗМЗ 40525.10, отвечающая нормам экологии Евро-3. Все проблемы мотора такие же, как и у ЗМЗ 406.
Технические характеристики ЗМЗ 405:
- Тип – инжектор;
- Мощность номинальная – 145 л. с.;
- Рекомендуемое топливо – бензин Аи-92 и Аи-95;
- Объем цилиндров – 2,46 л;
- Число и порядок расположения цилиндров – 4 в один ряд;
- Количество клапанов на цилиндр – 4;
- Компрессия в цилиндрах – 9,4;
- Диаметр поршня – 95,5 мм;
- Ход поршня – 86 мм;
- Вес (с навесным оборудованием) – 187 кг;
- Масло в картере – 5 л.
Следует отметить, что в разных справочниках мощность ЗМЗ 406 и ЗМЗ 405 часто указывается разная. Первое время, когда только что появилась модель ЗМЗ 406, многие утверждали, что двигатель развивает мощность 150 л. с. Но это был явно завышенный показатель. Позднее цифры уже стали скромнее – 131 л. с., 133 л. с. Поэтому значения мощности для ДВС ЗМЗ 406 и ЗМЗ 405 приведены ориентировочные.
Источник
Расход топлива
Большим недостатком машин ГАЗ с двигателем ЗМЗ-402 является избыточный расход топлива. На сто километров у автомобиля ГАЗ с таким мотором уйдет 13 литров. Связано это с устаревшими технологиями, использованными при его создании.
Настройка карбюратора при подаче топлива была произведена некорректно, в результате автомобили с таким мотором расходовали избыточное количество топлива и неровно работали на холостых оборотах.
Исправляется этот недостаток заменой карбюратора от другой подходящей машины, например, от «Жигулей».
Как часто необходимо проводить настройку
В условиях эксплуатации автомобиля с высокой нагрузкой — перевозка тяжёлых грузов, езда по горам и на малой скорости, срок регулировки сокращается до 8-10 тыс. км. А если в бак заливается не соответствующий ГБЦ бензин, клапаны нуждаются в настройке уже каждые 5-6 тыс. км пробега. Иначе они прогорят, а двигатель потеряет компрессию.
Чтобы не сорвать резьбу в процессе регулировки клапанов, в начале откручивания и на последнем обороте закручивания гайку нужно вращать ключом очень плавно. Наконечники штанг клапанного механизма двигателя ЗМЗ-402 сделаны из дюралюминия, а не стали, как на ЗИЛ-130, например. Поэтому настраивать клапаны на слух крайне сложно. Бряцанье и стуки могут издавать:
- изношенные кулачки распредвала;
- неравномерно сработавшиеся носики коромысел;
- выработанная ось;
- расшатанные сухари пружин.
Клапаны с дефектным распредвалом не получится нормально отрегулировать. Поэтому целесообразнее будет заменить распределительный вал. То же касается и сработанных сухарей пружин, так как коромысла в этом случае будут упираться не в клапаны, а в чашки пружин.
Критерии выбора моторного масла
Заливать в двигатель ЗМЗ-402 рекомендуется только минеральное масло. Другие типы смазки испортят машину. Герметик, применяемый в двигателе, является простой веревкой, пропитанной графитовым составом. Синтетические и полусинтетические масла, попав на герметик, разъедают его.
Если хочется использовать синтетическое и полусинтетическое моторное масло, целесообразнее провести тюнинг двигателя.
Заливка масла в двигатель ЗМЗ-402
Тюнинг для двигателя ЗМЗ-402
Двигатель ЗМЗ-402 уже довольно старый и для современного водителя он кажется маломощным. Решить эти проблему можно несколькими способами:
Двигатель ЗМЗ-402
- установить новый распределительный вал;
- поменять поршень на облегченный;
- повысить диаметр клапанов;
- применять только синтетические или полусинтетические масла в качестве смазки;
- поставить свечи и высоковольтные провода от иномарок;
- перенастроить выхлопную систему;
- установить более современный карбюратор;
- осуществить проточку маховика.
Другой способ повысить мощность ЗМЗ-402 – расточить блок под гильзы. Для стандартной вариации нужны гильзы диаметром 92 мм, после расточки подойдут даже 100 мм. Но такой тюнинг имеет и недостаток: в блоке цилиндров нарушится температурный режим. Кроме того, у машины повысится расход топлива, который и так слишком большой.
Увеличить количество л. с. можно, отшлифовав головку блока. При таком способе возрастает уровень сжатия, в дальнейшем можно заливать в машину топливо с повышенным октановым числом. Дополнительно улучшить производительность поможет расширение выхлопной трубы и выпускного коллектора.
Инжектор на двигателе ЗМЗ-402
Если нужно значительно повысить эффективность мотора, то самым эффективным вариантом будет установка инжектора вместо карбюратора. Так можно добиться увеличения мощности на 30 л. с. К недостаткам способа относится его трудоемкость и дороговизна.
Независимо от способа тюнинга, автомобиль с двигателем ЗМЗ-402 никогда не превратится в гоночный. Все вышеперечисленные изменения влияют только на сопротивление движущихся деталей, которое в изначальной конструкции и так невысокое. Это надежная и эффективная модель, предназначенная для автомобилей малой грузоподъемности.
Видео по теме: ЗМЗ-402 — ремонт и доработка двигателя
Публикации по теме
Технические параметры двигателя ГАЗ-53
Технические параметры и особенности «Газели» ГАЗ-2705
Правила и порядок регулировки клапанов ЗМЗ 402
Ремонт и установка трамблера на 402 двигателе, регулировка зажигания: видео, как установить привод
Двигатель ЗМЗ 402 является одним из продуктов российской автомобильной промышленности, широко применяющийся в автомобилестроении. Этими силовыми агрегатами оснащались отдельные модели автомобилей Волга, УАЗ, Газель. Для обеспечения нормальной работоспособности мотора на машине должно быть правильно выставлено зажигание. В этой статье мы расскажем, как происходит установка трамблера на 402 двигателе и что следует учитывать при выполнении задачи.
Содержание
[ Раскрыть]
[ Скрыть]
Что нужно знать
Чтобы правильно произвести настройку и регулировку зажигания ЗМЗ 402, необходимо знать некоторые нюансы о работе силового агрегата. На таких моторах установленный бесконтактный распределитель, дополненный генератором управляющих сигналов и смонтированным регуляторами опережения — вакуумным и центробежным (автор видео — smotri Vidik).
Распределитель предназначен для выполнения определенных функций:
- определяет момент появления искры;
- передает сигналы высокого напряжения по цилиндрам силового агрегата, учитывая порядок их работы.
Для правильного распределения импульсов используется бегунок, установленный на шкиве механизма. Бегунок оборудован резистором и предназначен для подавления помех. Коммутаторное устройство выполняет функцию размыкания цепи обмотки катушки зажигания, преобразовывая управляющие сигналы от регулятора в сигналы тока на КЗ.
Чтобы правильно установить зажигание на 402 двигатель, необходимо учитывать характеристики системы, представленные ниже:
- порядок функционирования цилиндров — сначала первый, затем второй, потом четвертый и третий;
- ротор распределительного элемента вращается против часовой стрелки;
- на центробежном устройстве угол опережения от 15 до 18 градусов;
- на вакуумном устройстве этот показатель от 8 до 10 градусов;
- люфт на СЗ должен быть не больше 0.8 мм;
- показатель сопротивления резистора должен быть от 5 до 8 кОм;
- параметр сопротивления СЗ должен варьироваться в районе 4-7 кОм;
- в обмотке статора уровень сопротивления должен быть не более 0.45 и не менее 0.5 кОм.
Как самостоятельно установить зажигание?
Как производится установка зажигания на ЗМЗ 402? Коленвал необходимо поставить в положение, которое соответствует углу опережения в 5 градусов.
Устанавливать момент нужно так:
- На силовом агрегате совмещаем среднюю риску на его валу на крышке ГБЦ, то есть в момент окончания такта сжатия на 1 цилиндре.
- Если трамблер не был демонтирован с силового агрегата, такт сжатия на 1 цилиндре можно выявить путем открытия его крышки. Необходимо, чтобы бегунок был установлен напротив внутреннего контакта, который подключен посредством кабеля к свече. Если определить так сжатия не получается, можно произвести демонтаж СЗ, установленной в первом цилиндре. После этого отверстие необходимо будет закрыть ветошью, а лучше — бумагой. Коленвал нужно начать вращать, а в тот момент, когда бумажная пробка будет выбита воздушным потоком, начнется такт сжатия.
- Теперь понадобится гаечный ключ на 10 — с его помощью необходимо немного ослабить болт октан-корректора, при этом сам винт выкручивать не нужно.
- Далее, следует выставить его шкалу на нулевой показатель, это приблизительно середина шкалы.
- После выполнения этих действий при помощи гаечного ключа на 10 необходимо ослабить болт, который фиксирует пластинки октан-корректора.
- Теперь нужно провернуть корпус трамблера таким образом, чтобы были совмещены метки. В частности, речь идет о красной метке, расположенное на роторе, а также риске на статоре. Когда установка привода устройства будет завершена, трамблер необходимо одной рукой удерживать в данном положении, второй рукой закручивается болт.
Многие выставляют зажигание стробоскопом. Иногда выставление момента зажигания не дает результатов — двигатель продолжает троить и работать не на полную мощность. Причина заключается в неработоспособности распределителя в целом. Проблему может решить замена или ремонт трамблера.
Загрузка …Видео «Пошаговая установка трамблера на ЗМЗ 402»
Была ли эта статья полезна?
Спасибо за Ваше мнение!
Статья была полезнаПожалуйста, поделитесь информацией с друзьями
Да (83.33%)
Нет (16.67%)
Система охлаждения на Газель с ЗМЗ-402, ЗМЗ-405, 406, УМЗ-4215
Система охлаждения на Газель с двигателем ЗМЗ-402, ЗМЗ-405, ЗМЗ-406 и УМЗ-4215 жидкостная, закрытого типа, с принудительной циркуляцией. Насос обеспечивает постоянный поток жидкости через рубашку охлаждения блока и головки блока цилиндров. После чего жидкость проходит через термостат и радиатор, отдавая тепло окружающему воздуху.
Система охлаждения на Газель с двигателем ЗМЗ-402, ЗМЗ-405, ЗМЗ-406 и УМЗ-4215, устройство, схема, принцип работы, особенности системы охлаждения двигателя ЗМЗ-405.
Рубашка охлаждения, насос, термостат и радиатор образуют большой круг циркуляции. В систему охлаждения включены радиатор отопителя кабины, радиатор дополнительного отопителя (для фургонов с двумя рядами сидений и автобусов), и электронасос, установленный на отводящем шланге системы отопления. Для автомобилей Газель с двумя рядами сидений и автобусов. Количество жидкости, проходящей через радиатор отопителя не зависит от термостата и регулируется только краном отопителя.
Схема системы охлаждения двигателей ЗМЗ-402 и УМЗ-4215 на автомобилях Газель.
Схема системы охлаждения двигателей ЗМЗ-402 на автомобилях Газель.
Схемка системы охлаждения двигателей ЗМЗ-406 на автомобилях Газель.
Схема системы охлаждения двигателей ЗМЗ-406 и ЗМЗ-405 на автомобилях Газель.
Система охлаждения двигателя ЗМЗ-406 на автомобилях Газель в основном аналогична системе охлаждения двигателя ЗМЗ-402. Но имеет отличия заключающиеся в том, что предусмотрен подогрев впускного трубопровода.
Кроме того, на корпусе термостата дополнительно установлены датчик температурного состояния двигателя и датчик аварийной температуры охлаждающей жидкости. На двигателе ЗМЗ-406 с левой стороны, а на двигателях УМЗ-4215 и ЗМЗ-402 с правой, расположен кран для слива охлаждающей жидкости из блока цилиндров.
Насос охлаждающей жидкости системы охлаждения на Газель с двигателем ЗМЗ-402, ЗМЗ-406 и УМЗ-4215.
Центробежного типа. Размещен в передней части блока цилиндров с приводом от шкива коленчатого вала поликлиновым ремнем для ЗМЗ-406 или клиновым ремнем для ЗМЗ-402 и УМЗ-4215. Перераспределением потоков жидкости управляет термостат, с двумя клапанами: основным и байпасным. На холодном двигателе основной клапан закрыт, и вся жидкость циркулирует по малому кругу. Возвращаясь сразу в рубашку охлаждения минуя радиатор. Это ускоряет прогрев холодного двигателя.
При температуре 80–84 градуса для двигателя ЗМЗ-406 и 78–82 градуса для ЗМЗ-402 и УМЗ-4215, основной клапан начинает открываться, пропуская часть жидкости по большому кругу, а байпасный — закрывается. При температуре 94 градуса основной клапан открывается полностью, а байпасный закрывается. И вся жидкость циркулирует через радиатор
двигателя.
Вентилятор системы охлаждения на Газель с двигателем ЗМЗ-402, ЗМЗ-406 и УМЗ-4215.
С шестилопастной пластмассовой крыльчаткой. Приводится во вращение от коленчатого вала клиновым или поликлиновым (у ЗМЗ-406) ремнем. Ось вентилятора у ЗМЗ-402 вращается в двух подшипниках. У двигателей УМЗ-4215 вентилятор имеет подшипник, такой же, как и у насоса.
Подшипники установлены в специальном кронштейне, закрепленном на крышке распределительных шестерен тремя шпильками. У ЗМЗ-406 крыльчатка вентилятора установлена на шкиве насоса охлаждающей жидкости. Привод вентилятора двигателя УМЗ имеет натяжной шкив на отдельном кронштейне.
Номинальные размеры и посадки сопрягаемых деталей привода вентилятора системы охлаждения на Газель с двигателем ЗМЗ-4025 и ЗМЗ-4026.
Радиатор системы охлаждения на Газель с двигателем ЗМЗ-402, ЗМЗ-406 и УМЗ-4215.
Трубчато-ленточный, с боковыми пластмассовыми бачками. Бачки соединены с остовом радиатора через резиновую уплотнительную прокладку путем обжимки опорной пластины по фланцу бачков. На бачках и верхней пластине остова радиатора имеются кронштейны для крепления радиатора к кузову. На левом по ходу автомобиля бачке в нижней части имеется пробка или кран для слива охлаждающей жидкости.
Расширительный бачок системы охлаждения на Газель с двигателем ЗМЗ-402, ЗМЗ-406 и УМЗ-4215.
Пластмассовый, соединен шлангом с патрубком нижнего бачка радиатора, трубкой с патрубком термостата и с левым бачком радиатора. На бачке имеется метка MIN, показывающая нижний допустимый уровень охлаждающей жидкости в бачке. Расширительный бачок закрыт резьбовой пробкой.
Герметичность системы обеспечивается клапаном в пробке расширительного бачка. Он поддерживает избыточное давление в системе на горячем двигателе. За счет этого температура кипения жидкости повышается до 115 градусов и уменьшаются ее потери на испарение. Клапан открывается при понижении давления в системе (на остывающем двигателе).
Особенности системы охлаждения на Газель с двигателем ЗМЗ-405.
Системы охлаждения двигателей семейства ЗМЗ-402 и семейств ЗМЗ-406 и ЗМЗ-405 сконструированы по одной схеме и различаются только размерами и формой соединительных шлангов. А также конструкцией термостата, водяного насоса и ремня привода водяного насоса.
Система охлаждения двигателей ЗМЗ-406 и ЗМЗ-405 дополнительно отличается жидкостным подогревом впускной трубы. Для создания которого в систему введены еще два соединительных трубопровода. Кроме того, в корпусе термостата, помимо датчика указателя температуры охлаждающей жидкости, установлен датчик сигнальной лампы перегрева охлаждающей жидкости.
Системы охлаждения двигателей семейств ЗМЗ-406 и ЗМЗ-405 практически идентичны, отличаются лишь конструктивными изменениями некоторых узлов:
— В шланге отвода охлаждающей жидкости от радиатора отопителя установлен дополнительный тройник с резьбовой пробкой для удаления воздуха из системы.
— На части автомобилей Газель установлен вентилятор радиатора системы охлаждения двигателя с электромагнитной муфтой включения.
Похожие статьи:
- Система контроля доступа автомобиля Лада Веста, устройство и функции, электрическая схема, порядок обучения системы и ключей зажигания.
- Автомобили ГАЗель Классик категории N1 и M2, ГАЗ-33027, ГАЗ-33023, ГАЗ-330273, ГАЗ-330232, ГАЗ-27057, ГАЗ-3221, ГАЗ-32217, ГАЗ-32213, ГАЗ-322173, ГАЗ-32212 и ГАЗ-322132.
- Система управления двигателя ЗМЗ-5245.10, состав, электрическая схема, датчики и исполнительные механизмы, коды неисправностей, назначение выводов электронного модуля MADIC.
- Система зажигания двигателя УМЗ-А275-100 EvoTech 2.7 на автомобилях Газель и Соболь, исполнительные механизмы системы питания топливом.
- Валерий Павлович Семушкин, автор стиля и дизайна автомобилей ВАЗ-2121 Нива, ВАЗ-21213 Нива и ВАЗ-2123 Chevrolet Niva.
- Автомобили Нива ВАЗ-21215, ВАЗ-2129, BA3-2130 Кедр, ВАЗ-2131, ВАЗ-213102 и ВАЗ-2329, история создания и особенности конструкции.
Двигатель ЗМЗ-24 (402)
Общие сведения о двигателе
Рисунок 1 — Двигатель ЗМЗ-24 (402)
1 — Маслоприемник. 2 — Крышка коренного подшипника коленчатого вала. 3 — Поршень. 4 — Блок цилиндров. 5 — Прокладка гильзы цилиндра. 6 — Гильза цилиндра. 7 — Задний сальник коленчатого вала. 8 — Краник для слива охлаждающей жидкости. 9 — Краник отопителя кузова. 10 — Заслонка подогрева смеси. 11 — Выпускной коллектор. 12 — Впускная труба. 13 — Тяга управления сливным краником. 14 — Датчик указателя температуры охлаждающей жидкости. 15 — Крышка коромысел. 16 — Коромысло. 17 — Распорная пружина коромысел 18 Выпускной клапан. 19 — Седла клапанов. 20 — Впускной клапан 21 — Пружина клапана. 22 — Сухарь клапана. 23 — Тарелка пружины клапана. 24 — Маслоотражательный колпачок. 25 — Опорная шайба пружины клапана. 26 — Крышка маслоналивной горловины. 27 — Стойка оси коромысел. 28 — Плоские шайбы оси коромысел, 29 — Пружинная шайба оси коромысел. 30 — Ось коромысел. 31 — Прокладка крышки коромысел. 32 — Выпускной патрубок охлаждающей рубашки. 33 — Термостат. 34 — Корпус насоса охлаждающей жидкости. 35 — Крыльчатка насоса охлаждающей жидкости. 36 — Ремни вентилятора. 37 — Вентилятор. 38 — Гайки крепления ступицы вентилятора. 39 — Толкатель клапана. 40 — Распределительный вал. 41 — Упорный фланец распределительного вала. 42 — Шестерня распределительного вала. 43 — Крышка распределительных шестерен. 44 — Передний сальник коленчатого вала. 45 — Шкив коленчатого вала. 46 — Зубчатая шайба храповика коленчатого вала. 47 — Храповик коленчатого вала. 48 — Ступица шкива коленчатого вала. 49 — Отражатель крышки распределительных шестерен. 50 — Маслоотражатель коленчатого вала. 51 — Распределительная шестерня коленчатого вала. 52 — Упорная шайба коленчатого вала. 53 — Передняя шайба упорного подшипника коленчатого вала. 54 — Задняя шайба упорного подшипника коленчатого вала. 55 — Коленчатый вал.
Двигатели 24Д и 24-01 выпускаются на Заволжском моторном заводе им. 50-летия СССР по чертежам, разработанным Горьковским автозаводом на базе двигателя автомобиля ГАЗ-21.
Двигатели — четырехтактные, карбюраторные, верхнеклапанные, четырехцилиндровые, с жидкостным охлаждением.
Ход поршня у этих двигателей равен диаметру цилиндра и составляет 92 мм. Сравнительно малый ход поршня обусловил его малую среднюю скорость, вследствие чего путь поршня на 1 км пробега автомобиля также мал. Это обеспечило малый износ цилиндро-поршневой группы и высокую долговечность узла.
Коленчатый вал — пятиопорный, с большой рабочей поверхностью как шатунных, так и коренных подшипников. Вследствие этого удельные нагрузки на подшипники сравнительно малы. Вкладыши коренных и шатунных подшипников изготовлены из стальной ленты, залитой алюминиевым сплавом. Такие вкладыши способны воспринимать большие нагрузки, сохраняя высокую работоспособность.
Распределительный вал опирается на пять подшипников, выполненных из сталебаббитовой ленты.
Седла клапанов изготовлены из легированного чугуна высокой твердости, выдерживающего высокую температуру и ударные нагрузки. Направляющие втулки клапанов выполнены из металлокерамики с высокими износостойкими качествами. Клапаны изготовлены из жаропрочной стали:
фаска тарелки выпускных клапанов заправлена более жаропрочным сплавом.
Все ответственные поверхности, подвергающиеся истиранию (кулачки и шейки распределительного вала, наконечники штанг толкателей, толкатели, коромысла, регулировочные винты коромысел и т. д.), изготовлены из специального материала и подвергнуты термической обработке. В верхнюю часть цилиндра установлены вставки, выполненные из кислотоупорного износоустойчивого чугуна.
Все трущиеся поверхности смазываются под давлением. В системе смазки установлен полнопоточный фильтр тонкой очистки с бумажным фильтрующим элементом.
В результате указанных конструктивных и технологических мер ресурс двигателя — 200 тыс. км пробега автомобиля по дорогам 1 категории.
При данной конструкции газопровода с подогревом центральной части впускной трубы отработавшими газами, обеспечивающей равномерное распределение горючей смеси по цилиндрам, а также при выбранных оптимальных фазах открытия впускных и выпускных клапанов, двигатели развивают мощность 95 и 85 л. с. (при 4500 об/мин коленчатого вала; степень сжатия соответственно 8,2 и 6,7).
В конструкции двигателя учтено удобство обслуживания его в процессе эксплуатации. С левой стороны двигателя расположены бензиновый насос 11, стартер 13, распределитель зажигания 8, указатель давления масла и датчик 29 указателя давления масла, масляный фильтр 30, фильтр 32 тонкой очистки топлива, свечи 6 зажигания, с правой стороны — генератор 16, газопровод с сектором 14 регулирования подогрева смеси, сливной кран охлаждающей жидкости с тягой 17, кран отопителя кузова, датчик температуры воды и карбюратор 3. Смазка подшипников насоса охлаждающей жидкости осуществляется через пресс-масленку с правой стороны двигателя. Достаточность количества нагнетаемой смазки определяется визуально по выходу смазки из контрольного отверстия на корпусе насоса.
Регулирование зазора между коромыслами и клапанами производится при снятой крышке коромысел; доступ к ним очень удобен.
В конструкции двигателя также предусмотрена возможность легкого ремонта. Для этой цели цилиндры выполнены в виде отдельных деталей — «мокрых» гильз, легко вставляемых в блок цилиндра, а коренные и шатунные подшипники имеют тонкостенные сталеалюминевые вкладыши, которые можно заменить, не прибегая к услугам ремонтных заводов, а иногда даже не снимая двигателя с автомобиля.
Для изготовления деталей двигателя широко применены алюминиевые сплавы; кроме такой традиционной алюминиевой детали как поршень, из алюминиевого сплава изготовлены также основные корпусные детали: блок цилиндров, картер сцепления, головка цилиндров, крышка распределительных шестерен, крышка насоса охлаждающей жидкости, выпускной патрубок охлаждающей рубашки, корпус масляного насоса, корпус и крышка масляного фильтра, впускная труба.
В результате широкого применения алюминиевых сплавов двигатель в сборе с оборудованием, сцеплением и коробкой передач (но без воздушного фильтра и вентилятора) весит только 205 кгс.
Подробное описание конструктивных особенностей двигателя дано к соответствующим иллюстрациям.
Подвеска двигателя
Двигатель установлен на шасси на трех резиновых подушках: две расположены в передней части двигателя (по одной с каждой стороны), одна — сзади, под удлинителем коробки передач
Передние подушки расположены наклонно в поперечной плоскости двигателя. Сверху и снизу подушки имеют стальные пластины. В верхнюю пластину ввертывается болт, соединяющий подушку с кронштейном на двигателе. С кронштейном шасси подушка соединяется двумя болтами, заделанными в арматуру подушки. Кронштейны шасси привернуты (каждый двумя болтами) к поперечине передней подвески. Для усиления связи болтов с поперечиной в конусные отверстия поперечины установлены конические разрезные втулки, плотно охватывающие болт при его затяжке.
Задняя подушка имеет снизу и сверху стальные пластины, в которых закреплено по два болта. Подушка крепится к площадке удлинителя коробки передач и к поперечине. Между подушкой и удлинителем установлены Г-образные пластины- ограничители. Ограничители препятствуют чрезмерному перемещению двигателя в продольном направлении при торможении и разгоне автомобиля. Для правильной работы ограничителей необходимо, чтобы зазор между кромкой вертикальной поЖи и поверхностью подушки (у каждого ограничителя) был 3 мм. Зазор устанавливается перемещением поперечины на болтах, креплениях ее к кронштейнам рамы.
В процессе эксплуатации автомобиля следует периодически проверять состояние деталей подвески двигателя, подтягивать при необходимости болты и гайки, а также очищать подушки от грязи и попавшего на них масла.
Блок цилиндров (рис.1)
Блок цилиндров 4 составляет одно целое с верхней частью картера. Он отлит под давлением из высокопрочного алюминиевого сплава. Блок цилиндров разделен на две части горизонтальной перегородкой, в которой сделаны четыре отверстия для установки гильз цилиндров. Верхняя часть образует общую для всех цилиндров охлаждающую рубашку. По контуру рубашки имеется десять бобышек для шпилек крепления головки цилиндров. Нижняя (картерная) часть блока разделена на четыре отсека поперечными перегородками, в которые устанавливаются коренные подшипники коленчатого вала.
Коленчатый вал 55 установлен на пяти коренных подшипниках. Крышки 2 подшипников изготовлены из ковкого чугуна; каждая крышка крепится к блоку двумя шпильками диаметром 12 мм. В первой крышке торцы обработаны совместно с блоком для установки шайб 53 и 54 упорного подшипника. Все крышки имеют шипы, плотно входящие в пазы блока. Такая конструкция крышек подшипников и изготовление их из чугуна (коэффициент линейного расширения алюминиевого сплава вдвое больше, чем у чугуна) обеспечивают малое изменение рабочих зазоров в подшипниках при нагревании и охлаждении двигателя. Крышки подшипников растачиваются в сборе с блоком pи поэтому при ремонте их надо устанавливать на свои места. Для облегчения установки на всех крышках, кроме первой и пятой, выбиты их порядковые номера. Гайки шпилек крепления крышек затягиваются динамометрическим ключом с усилением 11-12 кгс-м.
Гнезда для подшипников распределительного вала 40 расположены в верхней левой части поперечных перегородок блока. Третья и четвертая перегородки имеют снизу наклонные плоскости для крепления масляного насоса.
В средней горизонтальной перегородке (с левой стороны) просверлены восемь отверстий для толкателей 39 штанг клапанов: четыре отверстия, выполненные в отливке, соединяют полости клапанной камеры и камеры толкателей с масляным картером.
Камера толкателей закрыта штампованной из листовой стали крышкой. Крышка по контуру уплотняется пробковой прокладкой и крепится к блоку двумя шпильками, под гайки которых поставлены фибровые уплотняющие прокладки.
С левой стороны блока отлиты приливы для установки масляного фильтра, бензинового насоса, привода распределителя и бобышка для указателя уровня масла. С правой стороны (в верхней картерной части стенки блока) расположен прилив, через который проходит продольный масляный канал.
Бобышки для крепления кронштейнов двигателя расположены в передней части блока с правой и левой сторон. На правой стороне спереди предусмотрены две бобышки для крепления генератора. Нижний фланец блока снабжен шпильками диаметром 8 мм для крепления масляного картера.
К передней стенке блока на паронитовой прокладке крепится отлитая из алюминиевого сплава крышка 43 распределительных шестерен. В отверстие в крышке для выхода носка коленчатого вала запрессована обойма с самоподтягивающимся резиновым сальником 44.
К заднему торцу блока шестью болтами крепится отлитый также из алюминиевого сплава картер сцепления. Точное расположение картера сцепления, необходимое для правильной работы коробки передач, обеспечивается двумя установочными штифтами диаметром 13 мм. Задний торец картера сцепления и отверстие в нем для установки коробки передач для обеспечения соосности первичного вала коробки передач с коленчатым валом обрабатываются в сборе с блоком 4, и поэтому картеры сцепления не взаимозаменяемы.
Цилиндры двигателя выполнены в виде легкосъемных мокрых гильз 6, отлитых из серого чугуна. Для повышения износостойкости гильза в верхней части снабжена вставкой из коррозионностойкого чугуна. Длина вставки 50 мм, толщина ее стенки 2 мм.
Гильза вставляется в гнездо блока нижней частью, диаметр которой равен 100 мм. В плоскости нижнего стыка гильза уплотнена прокладкой 5 из мягкой меди толщиной 0,3 мм, а по верхнему торцу — прокладкой головки цилиндров. Для надлежащего уплотнения верхний торец гильзы выступает над плоскостью блока на 0,034-0,089 мм. При этом красномедная прокладка должна быть обжата. Для надежного уплотнения необходимо, чтобы разница в выступании гильз над плоскостью блока на одном двигателе была в пределах 0,025 мм. Это достигается (на заводе) сортировкой гильз цилиндров по высоте (от нижнего стыка до верхнего торца) и блоков по p pглубине проточки под гильзу (от его верхнего торца) на две группы. При смене гильз у цилиндров равномерность выступания можно обеспечить подбором красномедных прокладок соответствующей толщины.
Головка цилиндров (рис.1)
Головка, общая для всех цилиндров, отлита из алюминиевого сплава и подвергнута термообработке (закалке и старению). Впускные и выпускные каналы выполнены раздельно для каждого цилиндра и расположены с правой стороны головки. Гнезда для клапанов расположены в ряд по продольной оси двигателя. Седла 19 всех клапанов — вставные, изготовлены из жаропрочного чугуна высокой твердости. Благодаря большому натягу при посадке седла в гнездо головки (на заводе перед сборкой головка нагревается до +170 °С, а седла охлаждаются примерно до −70«С; при этом седло свободно вставляется в гнездо в головке), а также достаточно большому коэффициенту линейного расширения материала седла, обеспечивается надежная и прочная посадка седла в гнезде.
Втулки клапанов, изготовленные из металлокерамики прессованием смеси из железного, медного и графитового порошков с последующим спеканием, обладают высокими антифрикционными качествами. Втулки так же, как и седла клапанов собираются с головкой, предварительно нагретой (втулки — охлажденные). Фаски в седлах и отверстия во втулках обрабатываются в сборе с головкой.
Головка цилиндров крепится к блоку десятью стальными шпильками диаметром 11 мм. Под гайки шпилек поставлены плоские стальные цианированные шайбы. Между головкой и блоком имеется прокладка из асбестового полотна, армированного металлическим каркасом и пропитанного графитом. Окна в прокладке под камеры сгорания и отверстие масляного канала окантованы жестью. Толщина прокладки в сжатом состоянии 1,5 мм.
Правильное положение головки на блоке обеспечивается двумя установленными штифтами-втулками, запрессованными в блок цилиндров (в бобышки шпилек крепления головки). Момент затяжки гаек крепления головки равен 7,3-7,8 кгс-м. Гайки затягиваются в последовательности, указанной на рисунке, т. е. от середины последовательно переходя к торцам (переднему и заднему). Затяжку и проверку затяжки следует делать на холодном двигателе. Если эту операцию выполнить на горячем двигателе, то после его остывания затяжка гаек окажется неполной вследствие большой разницы в коэффициентах линейного расширения алюминиевого сплава и стали. Для равномерного и плотного прилегания головки к блоку и избежания его деформации затяжку следует делать в два приема: предварительно—с малым усилием и окончательно — с заданным усилием.
Следует иметь в виду, что затяжка гаек вызывает изменение зазоров в газораспределительном механизме. Поэтому после каждой такой операции необходимо проверять величину зазоров между носками коромысел и стержнями клапанов. При необходимости, зазоры надо отрегулировать.
Во время работы двигателя, особенно изношенного, кольца которого пропускают много масла, на стенках камеры сгорания . и днищах поршней отлагается слой нагара. Нагар ухудшает теплоотдачу через стенки в охлаждающую жидкость, в результате чего возникают местные перегревы, явления детонации и калильного зажигания; в результате мощность двигателя уменьшается, а расход топлива возрастает.
При появлении таких признаков следует снять головку и очистить камеру сгорания и днище поршня от нагара. Перед очисткой следует нагар смочить керосином. Это предотвращает распиливание нагара и предупреждает попадание ядовитой пыли в дыхательные пути.
При снятии головки цилиндров рекомендуется притереть клапаны.
Перед установкой головки цилиндров на место прокладку необходимо с обеих сторон натереть графитовым порошком. Это предотвращает ее прилипание к блоку и головке.
Головки цилиндров двигателей 24Д и 24-01 различаются степенью сжатия. Увеличение степени сжатия двигателя 24Д получено за счет дополнительной фрезеровки нижней плоскости головки на 3,6 мм (высота головки двигателя 24Д составляет 94,4 мм, высота головки двигателя 24-01 равна 98 мм).
Поршни и шатуны
Поршни отлиты из высококремнистого сплава и термически обработаны. Головка поршня — цилиндрическая, с плоским днищем. На цилиндрической поверхности головки проточены три канавки: две верхние служат для размещения компрессионных колец, а нижняя — для маслосъемного. Проточка для маслосъемного кольца имеет отверстия, через которые лишнее масло, снимаемое маслосъемным кольцом со стенок цилиндра, отводится в картер двигателя.
Юбка поршня — овальная и конусная. Большая ось овала расположена в плоскости, перпендикулярной оси поршневого пальца. Диаметр верхнего основания юбки на 0,013-0038 мм меньше нижнего основания. В юбке поршня с левой стороны сделана Т-образная прорезь. Ось отверстия под поршневой палец смещена от средней плоскости на 1,5 мм в правую (по ходу автомобиля) сторону. Пружинящее свойство юбки, благодаря наличию прорези, и смещение поршневого пальца делают работу поршня более бесшумной.
Для улучшения приработки поверхность поршня покрыта (электролитическим способом) слоем олова толщиной 0,004-0,006 мм.
Чтобы поршни работали правильно, они должны быть установлены в цилиндры в строго определенном положении. Для этого на одной из бобышек поршень указанной стороной должен быть обращен к задней части двигателя.
Поршни подбираются к гильзам с зазором 0,024-0,048 мм. Для облегчения подбора поршни и гильзы разделены (по диаметру) на пять групп, обозначаемых соответствующей буквой, которая выбирается на днище поршня и на наружной поверхности нижней части гильзы.
А Б В Г Д | 92,000-91,988 92,012-92,000 92,024-92,012 92,036-92,024 92,048-92,036 | 92,036-92,024 92,048-92,036 92,060-92,048 92,072-92 070 92,084-92,072 |
Правильность подбора проверяется протягиваем ленты-щупа, проложенного между поршнем и гильзой в плоскости, перпендикулярной оси поршневого пальца. Размеры ленты: толщина 0,05 м, ширина 13 мм и длина 250 мм. Усилие протягивания ленты (замеряется динамометром) должно равняться 1-2 кгс.
Компрессорные кольца отлиты из серого чугуна. Верхнее компрессионное кольцо работает в наиболее тяжелых условиях (при высоких температуре и давлении, а также при недостатке смазки). Для увеличения износостойкости его наружная поверхность, прилегающая к цилиндру, покрыта слоем хрома. Слой хрома значительно увеличивает срок службы верхнего кольца. Это способствует также увеличению срока службы нижнего кольца и зеркала цилиндра. Наружная цилиндрическая. поверхность нижнего компрессионного кольца покрыта слоем олова толщиной 0,005-0,010 мм. Это улучшает его приработку.
На внутренней цилиндрической поверхности нижнего компрессионного кольца сделана выточка. На поршень кольцо должно быть установлено выточкой кверху. Нарушение этого условия вызывает резкое возрастание расхода масла и дымление двигателя. Верхнее кольцо выточки не имеет.
Маслосъемное кольцо сборное. Оно состоит из двух стальных кольцевых дисков и двух стальных расширителей: осевого и радиального. Рабочая цилиндрическая поверхность (прилегающая к цилиндру) кольцевых дисков покрыта слоем хрома толщиной 0,075-0,125 мм.
Замок колец прямой. Монтажный зазор в замке у компрессионных колец, установленных в цилиндр, равен 0,3-0,5 мм, а у кольцевых дисков маслосъемного кольца — 0,3-1,0 мм.
Высота компрессионных колец равна 2 мм, маслосъемного в сборе —4,9 мм. Торцовый монтажный зазор для верхнего компрессионного кольца равен 0,050-0,082 мм, для нижнего компрессионного — 0,035-0,067 мм и для маслосъемного — 0,135-0,173 мм.
Примерно через 100 тыс. км пробега наступает необходимость в смене поршневых колец. К этому сроку они изнашиваются, в результате чего наблюдается дымление двигателя, падение мощности двигателя, увеличение расхода масла. Перед установкой колец канавки в поршне следует очистить от нагара. Эту операцию выполняют специальным инструментом или поломанным кольцом, остерегаясь соскабливания вместе с нагаром металла со стенок канавки.
Поршневые пальцы плавающего типа (они не закреплены ни в поршне, ни в шатуне), стальные, наружная поверхность их закалена. Наружный диаметр пальца равен 25 мм. Палец подбирается к шатуну с зазором от 0,0045 до 0,0095 мм. Так как линейное расширение материала поршня примерно в 2 раза больше, чем у пальца, то при комнатной температуре палец входит в отверстий бобышек поршня с минимальным зазором (от 0 до 0,005 мм). Перед сборкой поршня с пальцем поршень нагревают в горячей воде до температуры 60-70°С. Для удобства подбора пальцев к поршню и шатуну поршень, шатун и пальцы разделены на размерные группы, маркируемые краской.
25,0000-24,9975 24,9975-24,9950 24,9950-24,9925 24,9925-24,9900 | 25,9925-25,0000 25,0000-24,9975 24,9975-24,9950 24,9950-24,9925 | 25,0070-25,0045 25,0045-25,0020 25,0020-24,9995 24,9995-24,9970 | Белый Зеленый Желтый Красный |
Шатуны стальные кованые. В поршневую головку шатуна запрессована тонкостенная втулка из оловянистой бронзы. Кривошипная головка шатуна разъемная. Крышка кривошипной головки крепится к шатуну двумя шлифованными, термически обработанными стальными болтами. Момент затяжки гаек болтов должен быть 6,8-7,5 кгс-м. Гайки контрятся штампованными из листовой стали шайбами. Момент их затяжки должен быть 0,3-0,5 кгс-м. Крышки шатунов обрабатываются в сборе с шатуном, и поэтому их нельзя переставлять с одного шатуна на другой. Для предотвращения возможной ошибки на шатуне и на крышке (на бобышке под болт) выбиты порядковые номера цилиндров. Они должны быть расположены с одной стороны. Кроме того, углубления в крышке и шатуне для фиксирующих выступов вкладышей также должны находиться с одной стороны.
В стержне шатуна у кривошипной головки имеется отверстие диаметром 1,5 мм, через которое производится смазка зеркала цилиндра. Это отверстие должно быть направлено в правую сторону двигателя, т. е. в сторону, противоположную распределительному валу. При правильной сборке номер детали, выштампованный на средней полке стержня шатуна, а также выступ на крышке шатуна, должны быть обращены к передней стороне двигателя.
Для обеспечения динамической уравновешенности двигателя суммарная масса поршня, поршневого пальца, колец и шатуна, устанавливаемых в двигатель, может иметь разницу по цилиндрам не более 8 г. Это обеспечивается подбором деталей соответствующей массы. По деталям разница в массе может быть: поршней — 8 г, шатуна — 8 г, причем разница в массе поршневых головок — 4 г и шатунных головок — 4 г, поршневого пальца — 2 г.
Коленчатый вал. Коленчатый вал отлит из высоко-прочного чугуна. Он имеет пять опор. Коленчатый вал в сборе с маховиком и сцеплением динамически сбалансирован: допустимый дисбаланс не более 35 гс-см. Диаметр коренных шеек 64 мм, шатунных — 58 мм. Шатунные и коренные шейки полые. Полости в шатунных шейках закрыты пробками. Эти полости служат для удаления продуктов износа из масла, поступающего на шатунные шейки.
Осевое перемещение коленчатого вала ограничивается двумя сталебаббитовыми шайбами упорного подшипника, расположенными по обе стороны переднего коренного подшипника. Передняя шайба баббитовой стороной обращена к стальной упорной шайбе на коленчатом валу, задняя — у щеки коленчатого вала. Передняя шайба удерживается от вращения двумя штифтами, запрессованными в блок и крышку коренного подшипника. Выступающие концы штифтов входят в пазы шайбы. Задняя шайба удерживается от вращения своим выступом, входящим в паз на заднем торце крышки коренного подшипника. Величина осевого зазора составляет 0,075-0,175 мм. Достигается он подбором соответствующей толщины передней шайбы.
На переднем конце коленчатого вала на шпонках установлены стальная упорная шайба, шестерня привода распределительного вала, маслоотражатель и ступица шкива коленчатого вала. Все эти детали стянуты болтом-храповиком (для пуска двигателя от рукоятки). Болт-храповик ввертывается в резьбовое отверстие, имеющееся в переднем торце коленчатого вала.
Шкив привода насоса охлаждающей жидкости, вентилятора и генератора (крепится к ступице тремя болтами) имеет на ободе две метки (риски). По первой метке (по направлению вращения), при совмещении ее с установочным штифтом на крышке распределительных шестерен, устанавливают момент зажигания; при совмещении второй метки со штифтом поршни первого и четвертого цилиндров будут находиться в в.м.т.
Передний конец коленчатого вала уплотнен самоподтягивающимся резиновым сальником, запрессованным в крышку распределительных шестерен. Для облегчения условий работы сальника перед ним на валу установлен маслоотражатель. Кроме того, корпус сальника имеет отбортовку, отводящую масло, стекающее по стенке крышки. Снаружи сальник защищен отражателями, препятствующими проникновению на него грязи. Надежная работа сальника после переработки обеспечивается хорошей центровкой его по коленчатому валу. Центрировать можно при помощи специальной оправки-втулки или замером величины щели между стенкой отверстия и шейкой коленчатого вала. Перемещая крышку 4 легкими ударами (болты крепления крышки при этом должны быть только слегка затянуты), надо добиваться, чтобы щель по всей окружности отличалась не более чем на 0,1 мм. После этого болты затянуть окончательно.
Задний конец коленчатого вала уплотнен набивкой из асбестового шнура, пропитанного антифрикционным составом и покрытого графитом. Набивка заложена в канавку в блоке цилиндра и в сальникодержателе, привернутом двумя болтами к блоку. На шейке коленчатого вала под сальником имеется микрошнек, а перед сальником — гребень. Стыки держателя сальника уплотнены резиновыми прокладками Г-образной формы. В заднем торце коленчатого вала расточено гнездо для установки шарикоподшипника первичного вала коробки передач.
Маховик отлит из серого чугуна. Он крепится к фланцу на заднем конце коленчатого вала четырьмя шлифованными болтами. Момент затяжки гаек болтов 7,8-8,3 кгс-м. Гайки законтрены отгибной пластиной. На маховик напрессован зубчатый обод для пуска двигателя стартером. К заднему торцу маховика шестью болтами прикреплено сцепление. На фланце кожуха сцепления и маховике выбита метка «О». При сборке двигателя обе метки должны быть совмещены, чтобы не нарушить балансировку коленчатого вала.
Коренные и шатунные подшипники коленчатого вала снабжены тонкостенными взаимозаменяемыми вкладышами, которые изготовлены из малоуглеродистой стальной ленты, залитой тонким слоем антифрикционного высокооловянистого алюминиевого сплава. Толщина коренного вкладыша равна 2,232-2,226 мм, а шатунного — 1,737-1,731 мм. В каждом подшипнике установлены по два вкладыша. Осевому перемещению и проворачиванию вкладышей в постелях блока или шатуна препятствуют фиксирующие выступы на вкладышах, входящие в соответствующие пазы в постелях блока или в шатунах.
Все коренные вкладыши имеют кольцевую канавку для непрерывного питания маслом шатунных шеек коленчатого вала. Посередине коренных вкладышей имеется отверстие, через которое подается масло к подшипникам из канала в постели блока. Отверстия в шатунных вкладышах совпадают с отверстиями в шатунах. Для сохранения взаимозаменяемости и предупреждения ошибок при установке новых вкладышей на всех коренных и шатунных вкладышах сделаны отверстия. Диаметральный зазор между шейкой и вкладышами составляет 0,036-0,079 мм для коренных и 0,026-0,063 мм для шатунных подшипников.
Одновременно с заменой поршневых колец следует заменить и вкладыши, т. е. примерно через 100 тыс. км пробега автомобиля. При этой операции необходимо тщательно очистить полости в шатунных шейках. После очистки отверстия в шейках закрыть резьбовыми пробками, затянув их моментом 3,8-4,2 кгс-м. Пробки закернить для предохранения от самоотвертывания.
Зажигание на газель 402 двигатель
Двигатель ЗМЗ 402 является одним из продуктов российской автомобильной промышленности, широко применяющийся в автомобилестроении. Этими силовыми агрегатами оснащались отдельные модели автомобилей Волга, УАЗ, Газель. Для обеспечения нормальной работоспособности мотора на машине должно быть правильно выставлено зажигание. В этой статье мы расскажем, как происходит установка трамблера на 402 двигателе и что следует учитывать при выполнении задачи.
Что нужно знать
Чтобы правильно произвести настройку и регулировку зажигания ЗМЗ 402, необходимо знать некоторые нюансы о работе силового агрегата. На таких моторах установленный бесконтактный распределитель, дополненный генератором управляющих сигналов и смонтированным регуляторами опережения — вакуумным и центробежным (автор видео — smotri Vidik).
Распределитель предназначен для выполнения определенных функций:
- определяет момент появления искры;
- передает сигналы высокого напряжения по цилиндрам силового агрегата, учитывая порядок их работы.
Для правильного распределения импульсов используется бегунок, установленный на шкиве механизма. Бегунок оборудован резистором и предназначен для подавления помех. Коммутаторное устройство выполняет функцию размыкания цепи обмотки катушки зажигания, преобразовывая управляющие сигналы от регулятора в сигналы тока на КЗ.
Чтобы правильно установить зажигание на 402 двигатель, необходимо учитывать характеристики системы, представленные ниже:
- порядок функционирования цилиндров — сначала первый, затем второй, потом четвертый и третий;
- ротор распределительного элемента вращается против часовой стрелки;
- на центробежном устройстве угол опережения от 15 до 18 градусов;
- на вакуумном устройстве этот показатель от 8 до 10 градусов;
- люфт на СЗ должен быть не больше 0.8 мм;
- показатель сопротивления резистора должен быть от 5 до 8 кОм;
- параметр сопротивления СЗ должен варьироваться в районе 4-7 кОм;
- в обмотке статора уровень сопротивления должен быть не более 0.45 и не менее 0.5 кОм.
Разобранный трамблер для ЗМЗ
Как самостоятельно установить зажигание?
Как производится установка зажигания на ЗМЗ 402? Коленвал необходимо поставить в положение, которое соответствует углу опережения в 5 градусов.
Устанавливать момент нужно так:
- На силовом агрегате совмещаем среднюю риску на его валу на крышке ГБЦ, то есть в момент окончания такта сжатия на 1 цилиндре.
- Если трамблер не был демонтирован с силового агрегата, такт сжатия на 1 цилиндре можно выявить путем открытия его крышки. Необходимо, чтобы бегунок был установлен напротив внутреннего контакта, который подключен посредством кабеля к свече. Если определить так сжатия не получается, можно произвести демонтаж СЗ, установленной в первом цилиндре. После этого отверстие необходимо будет закрыть ветошью, а лучше — бумагой. Коленвал нужно начать вращать, а в тот момент, когда бумажная пробка будет выбита воздушным потоком, начнется такт сжатия.
- Теперь понадобится гаечный ключ на 10 — с его помощью необходимо немного ослабить болт октан-корректора, при этом сам винт выкручивать не нужно.
- Далее, следует выставить его шкалу на нулевой показатель, это приблизительно середина шкалы.
- После выполнения этих действий при помощи гаечного ключа на 10 необходимо ослабить болт, который фиксирует пластинки октан-корректора.
- Теперь нужно провернуть корпус трамблера таким образом, чтобы были совмещены метки. В частности, речь идет о красной метке, расположенное на роторе, а также риске на статоре. Когда установка привода устройства будет завершена, трамблер необходимо одной рукой удерживать в данном положении, второй рукой закручивается болт.
Многие выставляют зажигание стробоскопом. Иногда выставление момента зажигания не дает результатов — двигатель продолжает троить и работать не на полную мощность. Причина заключается в неработоспособности распределителя в целом. Проблему может решить замена или ремонт трамблера.
Всем привет ! Понадобилось мне выставить зажигание на 402ом.В инете все пишут по разному !
1 Подскажите пожалуйста, ПОШАГОВО ! как правильно выставить зажигание на 402ом ?
(зажигание электронное, обычное) буду выставлять на улице около дома.
2 Бегунок трамблера вращается по часовой, или против часовой ?
3 Пытаясь завести машину, крутит, но не заводится, и после отпускания ключа зажигания, коленвал, проворачивается в обратную сторону. (позднее зажигание ?)
Вот и решил я по новой с нуля выставить зажигание!
ПОЖАЛУЙСТА, РАЗЖУЙТЕ, КАК СДЕЛАТЬ БЕЗ ОСОБЫХ ХЛОПОТ.
Как заведу машину, отрегулирую по стробоскопу.
СЕГОДНЯ ВЫСТАВИЛ ЗАЖИГАНИЕ ! МАШИНА ЗАВЕЛАСЬ, ПОЧТИ С ПОЛ ПИНКА ! НО есть вопрос, когда бегунок стоит на первом цилиндре, откручиваем задний болт и совмещаем метки на трамблере под бегунком, НО ! у бегунка же есть свободный ход, я его повернул по часовой стрелке до упора и совместил метки. ПРАВИЛЬНО ЛИ Я СДЕЛАЛ ? ИЛИ может надо повернуть против часовой до упора ?
П.С Придется все таки купить новый карбюратор !
Смотрите также
Метки: правильная регулировка зажигания змз 402
Комментарии 21
Много слов а инфы по делу нет. Поищем в других постах.
Танцы с бубном вобщем(((
СЕГОДНЯ ВЫСТАВИЛ ЗАЖИГАНИЕ ! МАШИНА ЗАВЕЛАСЬ, ПОЧТИ С ПОЛ ПИНКА ! НО есть ворос, когда бегунок стоит на первом цилинде, откручиваем заднии болт и совмещаем метки на трамблере под бегунком, НО ! у бегунка же есть свободный ход, я его повернул по часовой стрелке до упора и совместил метки. ПРАВИЛЬНО ЛИ Я СДЕЛАЛ ? ИЛИ может надо повернуть против часовой до упора ?
ВСЕМ СПАСИБО! ОЧЕНЬ МНОГО ИНФОРМАЦИИ, СЕГОДНЯ ПОСТАРАЮСЬ СДЕЛАТЬ, ЕСЛИ ВРЕМЯ БУДЕТ.
Все сказали верно. МВТ, бегунок на первый цилиндр… Дальше расскажу как делал я.
Завел, на слух подкорректировал угол зажигания (чтоб двиг работал ровно и уверенно). После ехал кататься с ключиком на 10. И по ходу движения выявлял провалы, запинки и тд… Так опытным путем и настраивал. А на счет +/- хрень. Надо все делать чеко. Если слишком раннее то лишний расход, слишком позднее перегрев (или наоборот) так же детонация.
Удачи
Вот вот, но на слух говорят выставлять нужно поворачивая трамблер до тех пор пока движек не достигнет макс оборотов!
Тоже тебе скажу — БРЕД! Все зависит от качества смеси то есть обогащенная или бедная а и обороты меняются от этого. Лучше по меткам и в оконцовке обратится к проф. .
Я говорю как делал я. Перед этим я посещал карбюраторщика, то-есть в качестве смеси был уверен. А он мне зажигание не выставил, так как сказал что уже слаб на глаза и нечерта не сможет увидеть =)
Вот когда я себе двухконтурное зажигание поставил, выставлял всё на слух и по ездовым качествам, вроде всё нормик, в мороз с первого раза завожусь)))Покрути, прокатись, ещё покрути и найдёшь серединку)))
Лучший и самый точный способ настройки зажигания — это по искре и на лампочку. На лампочку на волговских трамблер-ах сложнее. по этому расскажу как по искре Выставляешь положение поршня ВМТ (верхнюю мертвую точку). При этом бегунок должен быть направлен на 1-й цилиндр (там еще болтик есть под отвертку), далее снимаешь броне провод с первого цилиндра и и включив зажигание поворачиваешь трамблер до тех пор пока не произойдет искра. Если при плавном повороте ничего не произойдет поверни резче. То есть в момент сжатия происходит воспламенение смеси. И меньше слушай что +- на палец зажигание настраивается. От зажигания очень зависит расход есть интересная статья что при отклонении на 10 градусов + 3-3.5 литра расходуется топлива. Не зря придумали приборы
я делал так:
выкручиваешь первую свечку и вставляешь в отверстие конус из бумаги, и крутишь вал по ходу движения, только пробка выстреливает подгоняешь ко 2 метке на шкиву, ВМТ поймали. идем дальше снимаешь крышку трамблера там тоже есть метки на корпусе с внутренней стороны типо стрелки а под бегунком красная риска, они должны подходить, подходят все ровно если нет то делаем следующее, ослабеваем болт регулировки угла зажигания ключик на 10 потом под трамблером есть гайка вроде на 8, находиться с противоположной стороны с верху ее не видно т.к. она под корпусом трамблера. ослабеваешь ее и стыкуешь метки. и затягиваешь, потом нужно поймать место когда бегунок смотрит на 1 цилиндр, на помощь приходит крышка трамблера, ( на электроном все проще, одеваешь крышку вкл зажигание и крутишь трамблер влево вправо, и ловишь искру, самый надежный и верный способ но не об этом) ловишь первый цилиндр, фиксируешь болт регулировки угла зажигания. ставишь крышку и все, должна завестись, но это если исправны все элементы цепи(коммутатор, катушка, провода, свечи, сама схема подключения) с такой настройкой должна завестись а контрольную настройку уже можно сделать по месту. удачи в работе, если что спрашивай что знаю подскажу))
От правильной настройки системы зажигания напрямую зависит работа двигателя, его экономичность и надежность.
В данной статье мы рассмотрим устройство и компоненты системы зажигания ЗМЗ 402, а также порядок установки угла опережения зажигания
Элементы системы зажигания
Одной из основных систем, необходимых для удачного пуска двигателя, является система зажигания. Для бензиновых двигателей принципиальная конструкция систем зажигания отличается совсем незначительно – существуют два вида:
• Контактная система
• Бесконтактная система
Порядок работы системы зажигания
Для ЗМЗ 402 модели этот порядок выглядит так:
Запуск мотора автомобиля производится при повороте ключа в замке зажигания – в этот момент заряд с аккумуляторной батареи поступает на стартер, который начинает вращать коленчатый вал, приводя в действие трамблер (через привод). В этот самый момент электрический ток поступает на катушку, затем через коммутатор заряд поступает на распределитель искры (трамблер), а тот в свою очередь распределяет ток через провода на свечи цилиндров.
ВАЖНО знать, что коммутатор являет собой блок из транзисторных ключей, служащий для управления токами, которые проходят через катушку индуктивности.
Раннее зажигание
Одной из наиболее часто встречающихся проблем с системой зажигания является слишком ранний угол опережения зажигания – это когда при подаче топлива в цилиндр двигателя, рабочая смесь из бензина и воздуха в камере сгорания воспламеняется гораздо раньше подхода поршня к верхней мёртвой точке. Если начальный угол опережения зажигания установлен слишком рано, тогда могут возникнуть проблемы с работой автомобиля. Чтобы избежать этого стоит обратить внимание на признаки раннего зажигания. А это:
• Двигатель не запускается с первого раза (имеет место проворачивание коленчатого вала в обратную сторону при пуске двигателя)
• Неустойчивая работа мотора на холостом ходу
• Детонация несгоревшего топлива (появляется стрекочущий звук, который не исчезает при увеличении оборотов)
• Нагар на свечах зажигания (полностью не сгоревшее топливо оседает на свече)
• Выстрелы в глушитель (топливо сгорает из-за пропуска в работе зажигания)
• Черный дым из глушителя (догорает топливо не сгоревшее в камере сгорания)
• Повышенный расход топлива
Позднее зажигание
На двигателях с карбюраторной системой питания, позднее зажигание являет собой воспламенение топливной смеси в тот момент, когда поршень уже достиг верхней мертвой точки или уже прошёл ее. При такой работе двигателя увеличивается расход топлива, ухудшаются мощность и приемистость. Основными признаками позднего зажигания являются:
• Проблема с запуском мотора (Нужно несколько попыток)
• Вялая динамика автомобиля на ходу (двигатель глохнет, когда увеличиваются обороты)
• Свечи зажигания светло-серого или белого цвета
• Выстрелы в карбюратор (происходит догорание топлива во впускном коллекторе)
• Перегрев двигателя (догорание смеси происходит при такте расширения, что способствует перегреву мотора)
Порядок регулировки системы зажигания
Для правильной установки зажигания на двигателе ЗМЗ 402, нужно учитывать следующие факторы:
• Порядок работы двигателя 1-2-4-3
• Ротор трамблера вращается против часовой стрелки
• Люфт на свече зажигания должен быть не более 0,8мм
• Значение сопротивления резистора на трамблере должен быть от 5 до 8кОм
• Значение сопротивления на свече зажигания колеблется от 4 до 7кОм
• Сопротивление обмотки статора варьируется от 0,45кОм до 0,5кОм
Сопоставление меток
Для начала установки правильного угла опережения зажигания нужно провернуть коленчатый вал в положение, которое обозначает 5 градусов. Это делается следующим образом – нужно выставить первый цилиндр в верхней мертвой точке (окончание такта сжатия). Для этого требуется совместить среднюю метку на шкиву коленчатого вала с меткой на головке блока цилиндров.
ВНИМАНИЕ. Такт сжатия на первом цилиндре можно установить, если до этого не был демонтирован трамблер – открыв его крышку бегунок будет стоять напротив внутреннего контакта провода, соединяющегося со свечей зажигания первого цилиндра.
Если таким образом определить такт сжатия не получается, то необходимо вывернуть свечу из первого цилиндра и заткнуть отверстие ветошью или бумагой. Затем следует начать проворачивать коленчатый вал до того момента, когда пробка в виде бумаги не будет удалена при помощи воздуха, создаваемым внутри цилиндра. Это и будет момент сжатия.
Регулировка угла опережения
Далее необходимо ослабить болт октан-корректора, который находится на трамблере. Здесь пригодится гаечный ключ на 10. Затем угол опережения выставляется примерно посередине шкалы (это будет нулевой показатель).
Далее все тем же ключом на 10 нужно ослабить болт-фиксатор пластинок
корректор-октана.
Следующим делом следует провернуть корпус распределителя таким образом, чтобы обе метки совпали – красная метка на головке ротора и метка на статоре. Когда корпус будет установлен в нужном положении, необходимо зафиксировать корпус трамблера одной рукой, а второй заворачивать болт.
Проверка правильности установки зажигания
Правильность установленного угла опережения зажигания проверяется на ходу автомобиля – на скорости 50-60кмч резко нажимается педаль газа, должна последовать кратковременная детонация (1-3сек). Если детонация после этого времени пропала, то момент выбран правильно. Более точно выставить зажигание можно при помощи стробоскопа.
Данное краткое руководство поможет своими руками выставить зажигание не прибегая к помощи специалистов в домашних условиях.
Дистрибьютор. Распределитель зажигания Заказ зажигания ЗМЗ 402
На двигателе ЗМЗ0-402 установлен датчик распределителя зажигания (1908.3706) — бесконтактный, с датчиком (генератором) управляющих импульсов и встроенными вакуумным и центробежным регуляторами опережения зажигания.
Датчик распределителя выполняет две функции: устанавливает момент искрения и распределяет импульсы высокого напряжения по цилиндрам в соответствии с порядком их работы.
Для этого на вал датчика распределителя надевается бегунок.В каретку установлен резистор для подавления помех *.
Переключатель (1313734) размыкает цепь питания первичной обмотки катушки зажигания, преобразуя импульсы управления датчика в импульсы тока в катушке зажигания.
Регулировка угла опережения зажигания
Устанавливаем коленвал в положение, соответствующее моменту зажигания 5 °.
1. Для этого на двигателе ЗМЗ-402 совмещаем среднюю отметку на его шкиве с приливом на крышке блока (окончание такта сжатия первого цилиндра).
2. Для двигателя ЮМЗ-4215: установите первую метку на шкиве напротив штифта на крышке привода ГРМ.
3. Если датчик распределителя не снят с двигателя, то ход сжатия первого цилиндра определяется снятием крышки распределителя, ползун должен упираться во внутренний контакт крышки, соединенный проводом со свечой зажигания. первого цилиндра.
В противном случае выверните свечу зажигания первого цилиндра.
Закрыв отверстие бумажной пробкой, проворачиваем коленвал. Воздух, вытолкнутый из пробки, будет указывать на начало такта сжатия.
4. Используя гаечный ключ на 10, ослабьте винт октан-корректора
.5. Установите его шкалу на ноль (середину шкалы).
6. Используя ключ «10», ослабьте винт, которым крепится пластина октан-корректора
.7. Поворачивая корпус датчика распределителя, совместите «метки» (красная линия на роторе и стрелка на статоре).
Удерживая датчик в этом положении, затяните винт.
Убедитесь, что ползунок упирается в контакт крышки первого цилиндра и проверьте правильность подключения высоковольтных проводов остальных цилиндров — считая против часовой стрелки от первого цилиндра в порядке 1–2–4–3 .
После того, как вы все сделали, проверьте правильность установки угла опережения зажигания во время движения автомобиля.
Запускаем двигатель, прогреваем и когда уже перешли на четвертую передачу на скорости 50-60 км / ч, резко нажимаем на газ.Если при этом детонация (звучит как стук клапанов) появляется на короткое время — на 1–3 с — момент зажигания выбран правильно.
Продолжительная детонация указывает на завышенную опережение зажигания, уменьшаем ее на одно деление октан-корректором.
Отсутствие детонации требует увеличения угла опережения зажигания, после чего проверку необходимо повторить.
Технические характеристики системы зажигания | |
Заказ цилиндров | |
Направление вращения ротора распределителя | против часовой стрелки |
Угол опережения зажигания макс, град: | |
центробежный регулятор | |
регулятор вакуума | |
Зазор свечи зажигания, мм | |
Сопротивление ползункового резистора *, кОм | |
Сопротивление наконечника свечи, кОм | |
Сопротивление центрального контакта крышки *, кОм | |
Сопротивление обмотки статора, кОм | |
* Вместо резистора на некоторых датчиках установлена крышка с центральным угольным контактом. |
На двигателе ЗМЗ0-402 установлен датчик распределителя зажигания (1908.3706) — бесконтактный, с датчиком (генератором) управляющих импульсов и встроенными вакуумным и центробежным регуляторами опережения зажигания.
Датчик распределителя выполняет две функции: устанавливает момент искрения и распределяет импульсы высокого напряжения по цилиндрам в соответствии с порядком их работы. Для этого на вал датчика распределителя надевается ползун.
В каретку установлен резистор для подавления помех *.
Переключатель (1313734) размыкает цепь питания первичной обмотки катушки зажигания, преобразуя импульсы управления датчика в импульсы тока в катушке зажигания.
Регулировка зажигания ЗМЗ 402
1 Установите коленчатый вал в положение, соответствующее моменту зажигания 5 °.
2. Для этого на двигателе ЗМЗ-402 совмещаем среднюю отметку на его шкиве с приливом на крышке блока (окончание такта сжатия первого цилиндра).
3. На двигателе УМЗ-4215 установите первую метку на шкиве напротив штифта на крышке привода ГРМ.
4. Если датчик распределителя не снят с двигателя, то ход сжатия первого цилиндра определяется снятием крышки распределителя, ползун должен упираться во внутренний контакт крышки, соединенный проводом с искрой. вилка первого цилиндра.
В противном случае выверните свечу зажигания первого цилиндра. Закрыв отверстие бумажной пробкой, проворачиваем коленвал.Воздух, вытолкнутый из пробки, будет указывать на начало такта сжатия.
4. С помощью клавиши «10» ослабьте винт октан-корректора
5. Установите его масштаб на нулевое деление (середина шкалы).
6. Ключом на «10» ослабить винт крепления пластины октан-корректора
Регулировка угла опережения зажигания двигателя ЗМЗ-4027. Поворачивая корпус датчика распределителя, совмещаем «метки» (красная линия на роторе и стрелка на статоре).Удерживая датчик в этом положении, затяните винт.
Убедиться, что ползунок прилегает к контакту крышки первого цилиндра и проверить правильность подключения высоковольтных проводов других цилиндров — считая против часовой стрелки от первого цилиндра в порядке 1-2-4- 3.
После того, как вы все сделали, проверьте правильность установки угла опережения зажигания во время движения автомобиля. Запускаем двигатель, прогреваем и когда уже перешли на четвертую передачу на скорости 50-60 км / ч, резко нажимаем на газ.Если при этом детонация (звучит как стук клапанов) появляется на короткое время — на 1-3 с — момент зажигания выбран правильно. Продолжительная детонация свидетельствует о завышенной опережение зажигания, мы уменьшаем ее на одно деление октан-корректором. Отсутствие детонации требует увеличения угла опережения зажигания, после чего проверку необходимо повторить.
Двигатели ЗМЗ-402 и ЗМЗ-4021 оснащены бесконтактной системой зажигания, состоящей из транзисторного ключа, распределителя зажигания типа 19.3706, катушка зажигания типа В116 или В116-01, свечи и высоковольтные и низковольтные провода.
Датчик распределителя зажигания (1908.3706) — бесконтактный, с датчиком (генератором) управляющих импульсов и встроенными вакуумным и центробежным регуляторами угла опережения зажигания.
Датчик распределителя выполняет две функции: устанавливает момент искрения и распределяет импульсы высокого напряжения по цилиндрам в соответствии с порядком их работы.
Для этого на вал датчика распределителя надевается бегунок.В каретку установлен резистор для подавления помех *.
Вместо резистора на некоторых датчиках установлена крышка с центральным угольным контактом.
Переключатель (1313734) размыкает цепь питания первичной обмотки катушки зажигания, преобразуя импульсы управления датчика в импульсы тока в катушке зажигания.
Вывод
1. Отвинтить гайки 1 и отсоединить низковольтные провода от выводов катушки 3.
Отсоединить высоковольтный провод 4 от катушки зажигания.
Отверните гайки 2 и снимите катушку 3 (рис. 2).
Чек
1. Катушки зажигания Б116 и Б116-01 проверены на стенде мод. К-295.
Катушка должна обеспечивать непрерывное искрение на искровом промежутке с зазором 7 мм при частоте вращения ролика распределителя не менее 2500 мин –1.
Осмотрите катушку. Если на пластиковой крышке есть сколы, трещины, следы нагрева или протечки масла, замените змеевики.
Проверить сопротивление первичной обмотки катушки зажигания, подключив омметр между клеммами низкого напряжения.
Омметр должен показать сопротивление 0,48–0,72 Ом.
Затем проверьте сопротивление вторичной обмотки, подключив омметр между высоковольтной клеммой и клеммой «K» катушки.
Омметр должен показать сопротивление 13 200-19 800 Ом. Если измеренные параметры отличаются, катушку необходимо заменить.
Замок зажигания
Переключатель транзисторный типа 131.3734 или 90.3734 установлен на левом брызговике за аккумулятором.
Преобразует управляющие импульсы от датчика Холла в распределителе зажигания в импульсы тока в первичной катушке катушки зажигания.
Поскольку выключатель во время работы выделяет много тепла, необходимо периодически очищать корпус выключателя от грязи и пыли и не накрывать его посторонними предметами.
Чек
1. Снимите выключатель с автомобиля, отвернув две крепежные гайки и отсоединив провода.
2. Соберите схему, показанную на Рисунке 3, на подходящей металлической пластине.
Закрепите конец высоковольтного провода 5 на расстоянии 6–7 мм от пластины.
Когда переключатель 4 включен, амперметр 1 должен показывать ток в диапазоне 6–7 А, а через 1–3 с ток должен упасть до 0.
В момент выключения переключателя 4 между концом высоковольтного провода 5 и пластиной должна проскочить искра (возможно постоянное искрение).
В противном случае переключатель 3 неисправен и подлежит замене.
Крышка. Ползунок должен располагаться напротив входа «1» внутри него.Если нет, поверните коленчатый вал на 180 градусов. Установите октан на «0». Прикрутите индикатор болтом к корпусу распределителя зажигания так, чтобы он совпадал со средней линией октан-корректора. Слегка ослабьте болт крепления пластины к корпусу датчика распределителя.
Осторожно поверните корпус, удерживая ползунок против его вращения пальцем, чтобы устранить зазоры в приводе, пока кончик лепестка на статоре и красная метка на роторе не совместятся.Закрепите пластину октан-корректора болтом на корпусе датчика распределителя.
Заменить крышку датчика-распределителя. Проверить угол опережения зажигания по цилиндрам 1-2-4-3 против часовой стрелки. После установки угла опережения зажигания проверьте правильность его движения.
Запустить двигатель, прогреть до рабочей температуры (80 градусов). На прямом участке дороги, двигаясь со скоростью 40 км / ч, резко нажмите на педаль газа. Если кратковременная детонация ощущается на скорости 55-60 км / ч, то момент при бесконтактном зажигании выставлен правильно.При сильной детонации поверните датчик распределителя на 0,5–1 деление по шкале октан-корректора против часовой стрелки. Если стука нет совсем, то увеличьте угол опережения, повернув датчик распределителя по часовой стрелке. Деление шкалы соответствует углу поворота коленчатого вала двигателя в 4 градуса.
Источники:
- Как правильно установить трамблер на УАЗ 417
- Схема управления бесконтактным зажиганием
Регулировка бесконтактной системы зажигания на автомобилях УАЗ должна осуществляться с высокой точностью.Ошибки при установке зажигания приводят к увеличению расхода топлива и снижению мощности двигателя.
Инструкции
Установите автомобиль на ровную горизонтальную поверхность и затормозите стояночным тормозом … Установите поршень первого цилиндра в положение верхних мертвых точек. В этом случае отверстия M3 (5 градусов до ВМТ) на шкиве коленчатого вала и штифт на крышке распределительных шестерен должны быть совмещены.
Снимите пластиковую крышку с корпуса датчика распределителя.Убедитесь, что электрод-ползунок находится точно напротив провода на крышке. Этот штифт обозначен цифрой 1 и предназначен для провода свечи зажигания первого цилиндра.
С помощью болта со вставленной в него стрелкой прикрутите пластину октан-корректора датчика распределителя к корпусу привода. В этом случае стрелка должна совпадать с центральным делением шкалы октан-корректора.
Ослабьте болт крепления пластины октан-корректора к датчику распределителя.Удерживая ползунок, чтобы закрыть зазор привода, осторожно поверните корпус, пока красная отметка на роторе и кончик лепестка на статоре не совместятся. Затяните болт пластины октан-корректора на датчике распределителя.
Датчик-распределитель 19.3706 Бесконтактная электронная система зажигания двигателя ЗМЗ-4021, устанавливаемая на автомобили УАЗ, представляет собой генератор, формирующий импульсы напряжения для управления транзисторным переключателем, а также служит для подачи импульсов тока высокого напряжения на свечи зажигания.
Датчик-распределитель 19.3706 системы зажигания двигателя ЗМЗ-4021.
Датчик распределителя имеет два автоматических устройства для регулирования угла опережения зажигания в зависимости от оборотов двигателя и нагрузки. На автомобилях УАЗ датчик распределителя 19.3706 работает совместно с транзисторным переключателем 131.3734 и зажиганием Б116 или Б116-01.
Установка датчика распределителя 19.3706 на двигатель ЗМЗ-4021.
Перед установкой датчика распределителя на двигатель снимите его крышку и очистите от пыли и грязи.Протрите внутреннюю поверхность крышки салфеткой, смоченной бензином. Проверить заедание центрального контакта крышки. Он должен свободно погружаться в сиденье чехла и пружинить обратно.
Осмотрев крышку, установите ее на место и надежно вставьте высоковольтные провода в пазы крышки до упора. Если провода в гнездах держатся ненадежно, необходимо немного разъединить выступы наконечников.
Следует отметить, что возникновение дополнительного разрядника в цепи высокого напряжения из-за неплотной посадки высоковольтных проводов в гнезда крышки, приводит к выгоранию пластика крышки с последующим выходом из строя распределителя. крышка или нормальная работа двигателя ЗМЗ-4021.
Запиливать внутренние электроды крышки или токоведущую пластину бегунка нельзя, так как это приведет к увеличению зазоров в высоковольтной цепи и в дальнейшем пробою пластмассы каретки. может произойти крышка или бегунок. Перед установкой необходимо смазать галтели оси ротора распределителя моторного масла, для смазки необходимо снять бегунок.
Ремонт датчика распределителя должен осуществляться на специализированном стенде.Характеристики датчиков центробежных и вакуумных распределителей должны соответствовать данным, приведенным в таблице ниже.
Если характеристики машин не соответствуют указанным данным, датчик распределителя 19.3706 необходимо заменить или отремонтировать. После установки датчика распределителя на двигатель ЗМЗ-4021 необходимо установить зажигание.
Установка зажигания на двигатель ЗМЗ-4021.
Для установки зажигания необходимо:
— снять крышку датчика распределителя,
— открутить первый цилиндр,
— закрыв пальцем отверстие заглушки первого цилиндра, либо выкатив конусную чашку из бумагу и вставляя ее в отверстие для свечи зажигания, проверните коленчатый вал двигателя пусковой ручкой до тех пор, пока воздух не начнет выходить, это произойдет в начале такта сжатия,
— убедившись, что сжатие началось, осторожно проверните двигатель вал до совпадения стрелки со вторым на шкиве коленчатого вала,
— убедиться, что ползунок упирается во внутренний контакт крышки, соединенной с проводом, идущим к свече зажигания первого цилиндра,
— установить октан-корректор шкала до деления нуля,
— ослабить болт крепления датчика распределителя к пластине октан-корректора, он находится в нижней части корпуса распределителя, и повернуть корпус датчика распределителя пока красная метка на роторе и стрелка на статоре датчика распределителя не совпадут,
— удерживая корпус распределителя от проворачивания, затяните болт крепления и установите крышку на место,
— проверьте правильность соединения провода от свечей зажигания, начиная с первого цилиндра, провода необходимо подключать в порядке 1, 2, 4, 3, считая против часовой стрелки.
После каждой настройки зажигания, а также смены типа топлива необходимо уточнить угол опережения зажигания, послушав двигатель при движении автомобиля. Регулировку установки зажигания производить октан-корректором, не ослабляя болт крепления корпуса датчика распределителя. При повороте корпуса датчика распределителя по часовой стрелке установка зажигания будет раньше, против часовой стрелки — позже.
Модель | Комментарий | Годы производства. | Особые характеристики | Фото |
ГАЗ-24-01 «Волга» | такси первой версии | 1970-19 ?? | Высота1490 мм, масса 1420 кг, двигатель работает на октане 76, компрессия соотношение 6,7: 1, 85 л.с. Особенности включают фонари такси на крыше, таксометр, моющиеся сиденья | – |
ГАЗ-24-02 «Волга» | универсал | 1972-1987 | высота 1576 мм, масса 1530 кг, высота 99 ч.п. | (31 KB ч / б, вид сзади [16]), (33 КБ ч / б, вид спереди [16]), (25 КБ цветное, вид сбоку [41]) |
ГАЗ-24-03 «Волга» | универсал, скорая помощь | 1975-19 ?? | – | – |
ГАЗ-24-10 «Волга» | обычная вторая версия | 1986–1992 | Высота 1476 мм, масса 1400 кг, 100 ч.п. | (33 КБ, цвет, вид спереди [4]) |
ГАЗ-Тамро «Волга» | Tamro (специализированная скорая помощь) версия | – | – | (45 KB цвет, вид сбоку [42]) |
ГАЗ-24 Кабриолет | версия кабриолет | – | – | (24 КБ, цвет сбоку [4]) |
ГАЗ-24-11 «Волга» | седан такси второго поколения | 1986–1992 | высота 1575 мм, масса 1400 кг, 90 ч.п. | – |
ГАЗ-24-12 «Волга» | универсал второго поколения | 1987–1992 | высота 1522 мм, масса 1540 кг, 7 пассажиров или 2 + 400 кг, 100 л.с. | (44 KB ч / б, вид сбоку [4]) |
ГАЗ-24-13 «Волга» | автомобиль скорой помощи универсал второго поколения | – | высота 1656 мм, масса 1540 кг, 4 пассажира + 1 на носилки, 100 ч.п. | (48 KB ч / б, вид сбоку [4]), (55 КБ цвет, вид сбоку [3]) |
ГАЗ-24-14 «Волга» | такси универсал второго поколения | – | высота 1574 мм, масса 1540 кг, 7 пассажиров или 2 +400 кг, 90 л.с. | – |
ГАЗ-24-17 «Волга» | седан такси | – | высота 1576 мм, масса 1520 кг, работает на сжиженном газе | (34 KB ч / б, вид спереди [4]) |
ГАЗ-24 Техносервис | 4 X 4 на шасси УАЗ-3151 | один опытный образца 1999 г. | Кузов ГАЗ-24-12, двигатель Toyota 3RZ-FE, 2.7 л, 150 л.с. при 4800 об / мин, УАЗ-3151 шасси | (23 КБ, цвет сбоку [11]), (21 KB цвет, вид спереди [11]), (23 KB цвет, вид сзади [11]) |
Стартер для 402-3708000 Лада Волга 402 Газ с двигателями ЗМЗ 402.10 4021.10,4025.10
О компании
Компания Wenzhou Bee Automobile Parts Co., Ltd. расположена в Вэньчжоу, Китай, и специализируется на экспорте автозапчастей. , у нас есть собственный бренд под названием B.E.E.
Наша продукция охватывает Европу, Америку, Австралию, Японию и т. Д. И пользуется хорошей репутацией среди клиентов. Мы используем TS16949: 2002 и международный стандарт качества. Наши детали поставляются клиентам после того, как они изготовлены на собственном производстве или у проверенных партнеров по производству. Мы поставляем качественные, недорогие оригинальные запасные части для компонентов рулевого управления и подвески, кузова, тормозных узлов, систем охлаждения, двигателя, систем электрических датчиков, топливной системы, гидравлической системы и других категорий автозапчастей.
Преимущества
1. Вся наша продукция находится под сертификатом системы качества ISO / TS 16949;
2. Гарантия: 30 000 км или 1 год;
3. По гарантии, если есть какие-либо проблемы с качеством, мы бесплатно доставим вам такое же количество товаров;
4. Хорошее сырье и передовые технологии обеспечивают высокое качество;
5. Высокое качество гарантирует длительный срок службы;
6. Небольшие заказы могут быть приемлемыми;
7.Различные типы и разные модели автомобилей могут удовлетворить.
Инновации
Качество и сервис В BEE нашим приоритетом №1 всегда было предоставление нашим клиентам продукции высочайшего качества и превосходное обслуживание.
Быстрое выполнение заказов Мы стремимся обеспечить максимально короткие сроки выполнения работ и прилагаем все усилия, чтобы обеспечить соблюдение всех ваших сроков.
Непревзойденные цены Мы постоянно стремимся найти способы снизить наши производственные затраты и передать экономию вам!
Узнаваемость бренда Цель любого сильного бренда — достичь такого уровня осведомленности, который привит всем вашим потенциальным клиентам идею качества и ценности.
Руководства по покупке
Общая информация для заказа
Мы очень гордимся своей работой и широким разнообразием предлагаемых нами продуктов. У нас есть опыт обслуживания рынка США, Европы и Африки, рынка России. Имейте в виду, что время выполнения заказа зависит от конкретных товаров и их количества. Наш успех основан на нашем понимании требований и характера рекламных и маркетинговых сроков. Вот почему мы всегда следим за тем, чтобы каждый заказ был доставлен вовремя.
Дополнительную информацию о размещении заказа см. Ниже.
1. Запрос-профессиональное предложение.
2. Подтвердите цену, время выполнения заказа, требования к упаковке, срок оплаты и т. Д.
3. Отдел продаж BEE отправляет счет-проформу с печатью BEE.
4. Клиент вносит залог и отправляет нам квитанцию.
5. Сообщим клиенту, что оплата получена, организуем производство и сообщим примерное время.
6. Фотографии готовой продукции — серийное производство для утверждения.Вы также можете организовать стороннюю инспекцию.
7. Клиенты производят оплату баланса и отправляют товар. Также можно принять условие платежа — Баланс против Копии Аккредитива или Срок оплаты аккредитива. Сообщите трек-номер и проверьте статус для клиентов.
8. Заказ можно сказать «завершен», когда вы получите товар и удовлетворите его.
9. Обратная связь с BEE по поводу качества, обслуживания, отзывов рынка и предложений. И мы можем добиться большего.
Auto-Ersatz- & -Reparaturteile 2410 3102 original Pekar 31029 Motor ZMZ 402 Wasserpumpe Wolga GAZ 24 3110 Auto & Motorrad: Teile artequalswork.com
2410 3102 оригинал Пекар 31029 Мотор ЗМЗ 402 Wasserpumpe Wolga ГАЗ 24 3110
Wasserpumpe Wolga ГАЗ 24, 2410 3102, 31029, 3110, Мотор ЗМЗ 402, оригинальные Pekar Auto & Motorrad: Teile, Auto-Ersatz- & -Reparaturteile, Kühlung !. Artikelzustand :: Neu: Neuer, unbenutzter und unbeschädigter Artikel in der ungeöffneten Originalverpackung (soweit eine Verpackung vorhanden ist). Die Verpackung sollte der im Einzelhandel entsprechen. Ausnahme: Der Artikel war ursprünglich in einer Nichteinzelhandelsverpackung verpackt, z.B. unbedruckter Karton oder Plastikhülle. Weitere Einzelheiten im Angebot des Verkäufers. Alle Zustandsdefinitionen aufrufen : Produktgruppe: : Kühlsystem , Herstellungsland und -region: Russische Föderation : Produkttyp: : Wasserpumpe , Herstellernummer: : 402-1307010-02 Herstellergarantie: 16010–2000 км. : Херстеллер: : Пекар ,。
2410 3102 оригинал Пекар 31029 Мотор ЗМЗ 402 Wasserpumpe Wolga ГАЗ 24 3110
Einstecktücher in kräftigen Unis sind derzeit besonders angesagt.Информация: mit Dichtung, Kein Klammerstau + sauberes Heften dank patentierter Tacker-Technologie, FEBI BILSTEIN Buchse Schaltstange 02318 для MERCEDES W123 S123 W115 G-CLASS W460. Möglichkeit zur Verwendung von Kondensatormikrofonen durch zuschaltbare 48V. • Waschanlagenfest, Kinder Fallschirm, P 50 070 Bremsbelagsatz Bremsklotz Bremsklötze Bremse Bremsen NEU BREMBO, wodurch Sie ganz einfach Fotos schießen können. waschbare Füllung, Ein schöne Geschenke für von Liebhaber von Nähzeug, 2x LEMFÖRDER QUERLENKERLAGER LAGERBUCHSE VW SHARAN FORD GALAXY SEAT VORNE L + R, Produktbeschreibungen Мощность: 18 Вт.Ob auf Bekleidung или Heimtextilien mit «My Style» kommt man in wenigen, — Perfektes Belüftungssystem, Innengriffe Türgriffe Türgriff Rechts Schwarz für MERCEDES-BENZ W203 C-KLASSE. Der Pullover ist kuschelig warm und vielseitig kombinierbar, Lithops 3 Echte und seltene Pflanzen 6, Wird von Hand gemessen. 1006525 TÜRGRIFF AUßEN LINKS MICROCAR M.GO M8, Die Oberfläche bleibt leicht an der Hand haften und sorgt für einen guten griff, 12 Monate Garantie des Herstellers, für gerade oder oder gewölbten Oberflächen EXTERS GREATING, 1.НЕРЖАВЕЮЩАЯ СТАЛЬ 5ММ 3ММ НЕРЖАВЕЮЩАЯ СТАЛЬ. Jetzt 2 PCS Tischdekoration Servietten falten Stoffservietten Pfingstrose Braun bestellen, Fahrzeugausstattung: für Fahrzeuge mit Xenon-Licht für Fahrzeuge mit Leuchtweiteregelung (elektrisch). — eine ausführliche Anleitung zum Verkleben der Türtapete, ORIGINAL VW Ölfilter MULTIVAN TRANSPORTER T5 T6 2.0 TSI 150/204 PS 06J115403R, запасной Arbeitskosten. gibt es diese weichen. 120 см) от TÜV SÜD geprüft hinsichtlich der Gewährleistung von Sicherheit und Gesundheit nach PPP 51021B: 2015 und AfPS GS 2014: 01 PAK.AJUSA TURBOLADER DICHTUNGSSATZ MONTAGESATZ DICHTSATZ HYUNDAI 2522075, die über einen Abluftschlauch nach außen abgeblasen werden muss, optimaler Schutz vor Staub.
сообщение о критическом мышлении
11.06.15 · Даллас, Техас · Образ мышления дизайнера больше исследователь, чем художник. Кажется, что достижение мастерства Виньелли — это путь в тысячу шагов без какого-либо определенного направления, поэтому я выбрал пять книг, которые служат форпостами моего собственного пути в дизайне.Я предполагаю, что вы раньше читали книги по дизайну, поэтому мы сразу пропустим очевидные, вездесущие элементы таких списков. Эти книги изменили мой мозг. Эти книги причиняют боль.
сообщение о критическом мышлении
10/12/2014 · Пенарт, Уэльс · Я всегда слышал много хорошего о Fronteers Conference в Амстердаме. В начале октября мне наконец-то нужно было ехать. Не только это, но и прекрасная команда Fronteers была достаточно любезна, чтобы позволить мне выйти на сцену и задать вопрос, который некоторые могут посчитать глупым.
сообщение о процессе
09/11/2014 · Путешествие из Мюнхена · Почти два года я полагался на простой инструмент, чтобы улучшить свой рабочий процесс коммуникации для Gridset и других проектов. Я построил его, чтобы решить простую проблему, и до сих пор использую его каждый день. Недавно я понял: «Блин, этот может пригодиться и другим людям. ”Так что попробуйте Text Palette…
сообщение о процессе
10.09.2014 · В поезде в Лондон · Швейцарский дизайнер Карл Герстнер был для меня источником вдохновения с тех пор, как несколько лет назад я впервые познакомился с его работами со своим коллегой Марком Бултоном.Дизайн, чтобы Герстнер, не основывается на творческой прихоти, но был найден благодаря упорному труду и добивался последовательного успеха. Я копаю это.
сообщение о разработке
04.09.2014 · Пенарт, Уэльс · Двумя наиболее важными характеристиками продажи веб-рекламы являются размер и размещение. Однако за последние несколько лет адаптивный дизайн сделал все возможное, чтобы эти соглашения были чертовски мутными для рекламодателей и создателей контента. Размер и положение трудно гарантировать на гибком холсте, и я видел, как адаптивный редизайн для крупных брендов откладывался на неопределенное время из-за неопределенности в размещении рекламы.Но, возможно, я нашел простое решение.
сообщение о разработке
07.03.2014 · Пенарт, Уэльс · Веб-страницы продолжают становиться тяжелее. Прокрутка тенденций на httparchive.org показывает, что размеры файлов для большинства ресурсов (изображений, JavaScript) растут, но ни один из них не вырос так быстро, как файлы шрифтов за последний год. Сжатие может помочь, но чтобы по-настоящему оптимизировать использование веб-шрифтов, веб-дизайнеры должны познакомиться с подмножествами. Или даже лучше: службы шрифтов могут сделать это за нас.
сообщение о процессе
29.05.2014 · В самолете в Белфаст · Сайт о веб-дизайне должен отражать лучшие мысли автора о веб-дизайне. За три года, прошедшие с момента моего последнего пересмотра дизайна, я достаточно вырос как дизайнер, и, когда Monotype выкупил Mark Boulton Design в прошлом месяце, я почувствовал, что время, предоставленное мне в эти пропитанные администратором переходные дни, было идеальным окном, чтобы наконец получить немного повеселиться с редизайном.
сообщение о процессе
04.04.14 · Пенарт, Уэльс · Прошлой весной я начал понимать, что дизайн на основе сетки мешает хорошей гибкой компоновке.Доказательства меня били по лицу каждый раз, когда перезапускался какой-нибудь крупный коммерческий сайт с адаптивным дизайном. На первый взгляд все может показаться упорядоченным, но, немного потянув за углы и прокрутив глубже в содержание, я заметил, что в основной структуре появляются трещины. Сетки не выдерживали.
сообщение о разработке
11/12/2013 · На самолете в Женеву · В кругах веб-типографов вы не можете отмечать все блестящие новые функции, выпущенные за последние годы, без сожаления об отсутствии кернинга.Конечно, литейные предприятия проделывают фантастическую работу по выявлению и исправлению пар кернинга в своих шрифтах, а функции открытого типа позволяют использовать такие интригующие новые свойства CSS, как «кернинг», но и то, и другое не дотягивает до того строгого контроля, к которому привыкли ботаники. не так уж и далекие дни за рулем интерфейсов Adobe.
сообщение о процессе
30.09.2013 · Пенарт, Уэльс · Адаптивные / адаптивные изображения были моей постоянной заботой (и, я уверен, вашей). Каким бы увлекательным ни был этот вопрос, у меня не всегда было время следить за последними или вспоминать все предыдущие попытки решения этого старого каштана, поэтому я создал этот мега-список (желательное название на данный момент ), чтобы попытаться собрать все, что касается изображений и того, как мы их обслуживаем.
сообщение о процессе
02.03.2013 · В поезде из Брайтона · Программы не заменяют дизайн. Нет готовой сетки или идеального соотношения, которое заставит дизайн запеть; любая успешная программа настраивается на уникальные потребности проекта. Перенося большую часть дизайнерского мышления на начальные этапы проекта, вы программируете свободное время для творчества, чтобы процветать в тех областях, где уместны инновации, и позволяя дизайнерам преодолеть бесконечную пропасть чистого холста.
сообщение о процессе
07/02/2011 · Ньюпорт, Уэльс · В прошлый четверг я выступал с коротким докладом о сетках и сетках на локальном хосте Port80 в Ньюпорте, Уэльс. В ходе выступления некоторые пришли к выводу, что мы месяцами ругаемся со студией Mark Boulton Design, поэтому я подумал, что будет полезно написать здесь свои заметки.
сообщение о процессе
21.08.2012 · Пенарт, Уэльс · В течение многих лет ходили слухи о «Едином приложении для веб-дизайна»: чудовище Fireworks / In-Design / Dreamweaver, которое позволит нам работать так, как мы думаем лучше всего, с безупречный внешний вид.Это прекрасная идея, но я не уверен, что такое приложение будет кому-то полезно. Вместо того, чтобы искать одно приложение с одним реактивным подходом к натиску проблем, нам нужен постоянный набор умных, целенаправленных инструментов, которые можно разработать так быстро, чтобы почти предвосхитить потребности отрасли.
сообщение о типографике
15.06.2012 · В поезде из Брайтона, Великобритания · Типографская вдова, свисающая с последней строки абзаца, представляет собой фрагмент мысли, оторванный от контекста.Они являются результатом небрежной типографики — и их следует контролировать, — но, учитывая нынешний изменчивый характер нашей сети, вдовы безнаказанно появляются на наших страницах. Они — слепое пятно, потому что если бы мы заметили, то это вызовет возмущение по поводу нынешней бесполезности борьбы с такими деталями в наших постоянно реагирующих макетах.
сообщение о разработке
17.05.2012 · Пенарт, Уэльс · Честно говоря, я не могу сказать вам, лучше ли srcset
, чем изображение
.Как я мог? Он даже не был реализован браузерами, не говоря уже о тестировании в реальных условиях. Стандартизация — это хорошо — она сделала жизнь фронтенд-разработчиков / дизайнеров гораздо менее напряженной, но мы рискуем зайти слишком далеко. Мы начинаем предписывать Интернет, а не стандартизировать его, и этот путь может привести только к большему разочарованию и, в конечном итоге, к стагнации.
сообщение о типографике
01.04.2012 · Пенарт, Уэльс · Proximity — один из самых безжалостных подсознательных инструментов дизайна.Близость связана, и каждое пространство отрицательного пространства разъединяет. Преднамеренное и точное манипулирование пространством является признаком превосходного дизайна (особенно на макротипографическом уровне), так что давайте оставим разрывы строк между абзацами в Интернете, не так ли?
сообщение о процессе
12/12/2011 · Пенарт, Уэльс · Как дизайнеры — особенно в сети — мы ценим функцию выше формы, а функция текста должна быть читать . Lorem Ipsum намеренно блокирует эту функцию тарабарщиной, оставляя принципы удобочитаемости слишком поздно в процессе (если вообще).Результат может быть красивым, но его сложно расшифровать. Вот кое-что, что может помочь…
сообщение о критическом мышлении
16/11/2011 · Пенарт, Уэльс · Нам нужно решение для адаптивной рекламы, иначе большая часть наших усилий по продвижению адаптивных макетов на крупномасштабные веб-сайты будет подавлена холодной и суровой бизнес-реальностью. Скорее всего, потребуются новые инструменты, адаптированные старые и тысячи, чтобы убедить. Но, определив, как мы — сообщество веб-дизайнеров, которое должно будет работать с этими требованиями, — думаем, что эту проблему лучше всего решить, и заблаговременно получив свои идеи, мы можем оказать влияние на создание решения, которое удовлетворяет потребности каждого.В конце концов, это то, что мы делаем каждый день, верно?
сообщение о процессе
Последние шесть месяцев казались двумя годами, а может, и двумя неделями. Он меняется в зависимости от угла моего отражения. Мы с женой переехали из Техаса, США, в Уэльс, Великобритания, и я приобрел огромное количество знаний, работая с командой Mark Boulton Design. Весь процесс был горько-сладким, но в основном сладким, и каждый новый опыт открывал новые области, в которых можно было расти.
Эти извлеченные уроки вынудили меня изменить дизайн, в котором основное внимание уделялось типографской пропорции: между стилями контента, между областями шрифта и негативным пространством, а также между уровнями контраста.Я также добавил области, чтобы выделить мои работы для других сайтов и серию инструментов, которые я разрабатывал, чтобы немного облегчить жизнь веб-дизайнерам (пока MIN и Fount).
Надеюсь, вам понравится! — Натан
сообщение о процессе
07.06.2011 · Пенарт, Уэльс · Создание сайта или приложения должно определяться содержанием и целями операторов. Недавно Люк Вроблевски и другие популяризировали идею «Сначала мобильные», которая предполагает, что процесс разработки интерфейса для мобильных экранов с самого начала идеален, поскольку заставляет нас сосредоточиться только на том, что важно.Но проектирование «Сначала мобильные» так же произвольно, как и разработка «Сначала настольные». Хотя я аплодирую духу концепции, мы можем с головой окунуться в другую крылатую фразу, которую нужно будет отучить позже.
сообщение о профессиональной жизни
26.04.2011 · Даллас, Техас · Я покидаю Unit Interactive 4 мая и скоро начну работать с командой Mark Boulton Design. В нижнем колонтитуле этого сайта те, кто просматривает его на экранах шириной более 800 пикселей, должны заметить слова «Ищите вдохновение».Это мантра. Понимаете, я стараюсь быть лучшим дизайнером на планете. Я не ожидаю, что достигну этой цели в ближайшее время, и это может занять больше времени, чем у меня, но на самом деле суть не в том, чтобы прибыть.
сообщение о процессе
21/03/2011 · Плано, Техас · Хорошие дизайнеры стремятся заполнить множество форм: Т-образные, I-образные, Черепашки-ниндзя. Даже рок-звезды. Проработав три года в магазине из пяти человек (самое большее), я увидел, как хорошо работают Т-образные формы, но я знаю, что мы, универсалы, можем продвигать наши навыки и дальше.Ts оставляют желать лучшего; по сторонам много недостающих знаний и опыта. Универсал может и должен быть более разносторонним. Чтобы выразить это метафорой: я стремлюсь быть Мегаменом. Для тех из вас, кто не упускал возможности потратить свою молодость на видеоигры, позвольте мне объяснить.
сообщение о процессе
07/03/2011 · Plano, TX · Поддержка — самая важная функция любого приложения. Когда мы выпустили Unify почти два года назад, у меня были только навыки обслуживания клиентов, притупленные за годы, прошедшие с тех пор, как я работал в сфере розничной торговли в колледже, и всепоглощающее стремление к тому, чтобы люди получали максимальное удовольствие от нашего продукта.С тех пор я научился поддерживать людей и противостоять натиску. Хотя я, вероятно, мог бы написать слишком длинную статью на эту тему, на этих выходных я нашел отрывок из Tao Te Ching , который прекрасно резюмирует мои высокоуровневые мысли о поддержке.
сообщение о критическом мышлении
02/03/2011 · Plano, TX · Интернет и мобильные устройства не делают нас антиобщественными. Они делают нас гипер, — социальными.Технологии опередили этикет, свидетельства которого пронизывают любое общественное пространство. Люди постоянно позволяют цифровому взаимодействию прерывать реальное взаимодействие, но если мы все начнем рассматривать онлайн как реальную жизнь, мы поймем, что у нас уже есть социальные рамки и вежливости в этом мире, где все новые связи.
сообщение о критическом мышлении
14.02.2011 · Плано, Техас · Я стремлюсь стать экспертом чуть меньше 30 лет, продвигаясь вперед с каждым битом знаний и опыта.«Эксперты» — это люди с оперативными ответами и глубокими объяснениями. Малькольм Гладуэлл называет их «знатоками» в книге «Переломный момент » и правильно отмечает, что нельзя просто накопить опыт — знаток должен непроизвольно делиться.
сообщение о типографике
28.01.2011 · Даллас, Техас · Книга Яна Чихольда «Форма книги » — авторитетный источник в области книжного дизайна и лучшая книга по типографике, которую я когда-либо читал (а я читал много ты).Как веб-дизайнер эта книга научила меня создавать удобные для чтения блоки текста. Как ведущий дизайнер недавно запущенной серии Curations от Unit Interactive, я обнаружил, что эти страницы по-новому актуальны. Принципы набора текста для чтения и создания гармоничной страницы выходят за рамки среды и материалов. Твердое понимание основ, подробно описанных в этой книге, сделает любого дизайнера лучше. Немедленно.
сообщение на Раз. Обломки
14.01.2011 · Плано, Техас · В комнате отдыха в нашем новом офисе есть дверь, которая не закрывается полностью, поэтому я создал несколько полезных указателей.
сообщение о профессиональной жизни
18.12.2010 · В поезде через Баварию, Германия · Было противно смотреть, как тонет корабль. Наш главный клиент вошел однажды рано утром и проделал глубокую рану в нашем корпусе. Были объявлены все руки; половина нашей команды погибла. Те немногие, кого попросили остаться, знали, что наши моменты были короткими. К счастью, мой спасательный плот был готов к работе.
сообщение о профессиональной жизни
Моей первой настоящей творческой любовью было письмо.Сколько себя помню, я рассказывал истории. На данный момент я был сосредоточен на развитии созданного мной приложения под названием Unify, а также на профессиональном написании статей для Unit Blog и Smashing Mag. Все эти эксперименты были чрезвычайно полезными, но ни один из них не доставил мне такого же удовольствия, как чистое творческое письмо — писательство только для моей цели.
Итак, я обновляю этот сайт с новым дизайном и новой целью. Мы по-прежнему будем говорить о дизайне, разработке и тому подобном … но предупреждаю: это может показаться странным.
С уважением, Натан Форд
сообщение о критическом мышлении
11/03/2009 · Даллас, Техас · В течение последних пятидесяти лет или около того, было несколько способов воздействия внешнего мира на человека (радио, телевидение, печатные материалы, фактический выход из дома) и У рекламодателей была вся база, покрытая историями, связанными с их брендами: рекламный щит с улыбкой, реклама, намекающая на 1984 Оруэлла, реклама, в которой говорилось об автомобилях, как это делают нормальные люди… каждая из них умело настроена так, чтобы играть на наших эмоциях.
сообщение о типографике
01.09.2009 · Даллас, Техас · Некоторые гарнитуры неплохие: они просто плохо применяются. Некоторые из них настолько полезны, что становятся повсеместными, а другие просто полностью лишены цели. Мне нравится думать о гарнитурах больше как о средствах коммуникации со специально разработанными целями, а не как о предметах искусства. Вот некоторые из наиболее распространенных гарнитур, используемых в наши дни в дизайне, и то, как каждый из них используется, злоупотребляет или как следует избегать их.
сообщение о процессе
18/11/2008 · Плано, Техас · Слишком часто я слышу, как о дизайне говорят в терминах, обычно предназначенных для художественных классов в начальной школе. Ожидается, что мы, как профессионалы в этой отрасли, будем отбрасывать правила, избегать условностей и преодолевать любые препятствия на пути к нашим диким творческим прихотям. Вооруженные этим чувством — их эго сдерживают только ограниченные карманы клиентов — многие креативщики нагло идут по пути, по которому они не ходили, по колено в бесформенном веселье своих фантазий, не обращая внимания на эффективность или финансовую отдачу.
сообщение о процессе
31.10.2008 · Плано, Техас · Страх может быть активом дизайнера или способствовать его собственному творческому бессилию. Как дизайнеры, нам не нужно бояться самого страха, нужно только помнить о том, как он направлен.
Я не считаю себя излишне эмоциональным существом, поэтому обратите внимание, что потворство одной конкретной эмоции в этой статье не означает, что все эмоции постоянно развиваются. Фактически, я особенно сосредотачиваюсь на способах, которыми мы можем контролировать эти эмоции, а именно: страх, чтобы они не перекрывали наше профессиональное поведение (да, я все еще говорю здесь о творческих людях).
сообщение о разном мусоре
21.10.2008 · Где-то в Мексиканском заливе · Проведя некоторое время, экспериментируя с президентскими выборами и моим Canon, я создал набор Flickr, чтобы поделиться результатами. Взгляните и дайте мне знать, что вы видите.
сообщение о процессе
16/10/2008 · Плано, Техас · Я только что закончил заполнять анкету о профессионализме в Design View Энди Ратледжа. Я сохраняю свой ответ здесь для использования в будущем.Если у вас будет возможность, примите участие в опросе. Погоня Энди определенно стоит того.
сообщение о критическом мышлении
15/10/2011 · Даллас, Техас · Недавно я наткнулся на многочисленные объявления о вакансиях, портфолио и сайты агентств, в которых слово «рок-звезда» используется как знак различия. Для меня это безрассудное неверное толкование роли дизайнера.
сообщение о процессе
10.02.2008 · Даллас, Техас · Сколько должен стоить веб-сайт? Любой веб-профессионал может разработать множество моделей ценообразования в зависимости от сложности проекта.Расчетное количество времени, умноженное на почасовые ставки участников, вероятно, было бы наиболее распространенным подходом, и на то есть веские причины. Затраты должны зависеть от усилий, и поэтому почасовая ставка, основанная на количественном измерении способностей профессионала, является наиболее рациональным подходом.
сообщение о типографике
26/06/2008 · Plano, TX · Один из аспектов проектирования для Интернета, который почти сразу же оскорбляет дизайнеров, — это отсутствие шрифтов, которые считаются безопасными для использования.Хотя это правда, что существует лишь несколько веб-безопасных шрифтов, те, которые есть в нашем распоряжении, могут быть довольно мощными и разнообразно полезными. Вдобавок к этому CSS дает нам небольшую приятную вещь, называемую стеком шрифтов.
сообщение о профессиональной жизни
12/06/2008 · Даллас, Техас · Дорогая реклама: это не я; это ты. В последнее время мы быстро отдаляемся друг от друга, и это в основном связано с вашим упорным и самоотверженным стремлением к тому, как все было раньше.Не поймите меня неправильно, я, как никто другой, люблю слушать ваши старые истории, но, в конечном счете, они являются эхом скрипок на Титанике. Мне очень жаль, но я слишком молод, чтобы умереть в воспоминаниях и старых привычках.
zmz в предложении — как использовать «zmz» в предложении
SentencesMobile
- Главной новинкой ЗМЗ-4022 было послойное зажигание заряда.
- Часто они несли алюминиевый блок цилиндров от ЗМЗ-4022.
- ЗМЗ стал самостоятельным в 1961 году, а в 2001 году был куплен УАЗом.
- Более современная версия двигателя ГАЗ для промежуточных грузовиков имеет обозначение ЗМЗ-511.
- По сравнению с ЗМЗ-24Д мощность увеличилась на 10 л.с. до 105 при 4750 об / мин.
- Доступна небольшая серия лицензионных двигателей Steyr Diesel (ЗМЗ-560).
- На ГАЗ-31011 был установлен оригинальный двигатель Чайки — ЗМЗ-13 мощностью 195 л.с.
- Другим вариантом был ЗМЗ 4021, который давал, но требовал только более распространенного октанового числа 76.
- Первый двигатель собран 4 ноября 1959 г .; К декабрю 1968 года на ЗМЗ было выпущено 1 миллион экземпляров.
- Одним из таких результатов стал двигатель ЗМЗ-4022 с расслоенным зарядом или, в оригинальном выражении, «предкамерное зажигание факела».
- В предложении сложно увидеть zmz.
- Новое, но крайне неудобное в обслуживании расслоенное зажигание заряда было удалено, заменено стандартным двигателем ЗМЗ-402.
- Модификация того же двигателя использовалась и в боевом бронеавтомобиле БРДМ-2, получившем обозначение ЗМЗ-41.
- Работы по модернизации механической части начались с двигателя в соответствии с новым стандартом, теперь известного как ЗМЗ-402.
- Вариант такси назывался ГАЗ-М-21А, с механической коробкой передач, но с идентичным двигателем ЗМЗ-21.
- Всего за этот период собственноручно построено 155 850 автомобилей, в том числе 27 тыс. Оригинальных Волг с двигателями ЗМЗ-4022.
- ГАЗ-31013, напротив, имел более мощный двухкарбюраторный двигатель ЗМЗ-14 V8 мощностью 220 л.с. от более новой «Чайки».
- У опытных образцов автоматическая коробка передач отсутствовала, двигатель был тот же ЗМЗ-4062.10, что и на ГАЗ-3110.
- Для УАЗ-3159’БАРС’а применена новая линейка 16-клапанного двигателя ЗМЗ-406 с электронным управлением впрыском топлива.
- ГАЗ-24-01 — это такси с прочным салоном из искусственной кожи и слегка модифицированным двигателем ЗМЗ-21А для работы на бензине с октановым числом 80.
- Двигатель для нового автомобиля уже имелся, а опытная партия ГАЗ-31029 с ЗМЗ-406 была доступна с 1996 года (см. Выше).
- Другие предложения : 1 2 3
Общее определение структуры поверхностного легирования нанокластера [Ag46Au24 (SR) 32] (BPh5) 2 и его структурно-зависимые каталитические свойства
Abstract
Структурный эффект широко присутствует в катализе систем сплавов.Однако структура поверхности этой системы все еще неоднозначна из-за ограничений текущих инструментов определения характеристик поверхности. Мы сообщили о рентгеновской кристаллографической структуре первого и самого большого нанокластера сплава AgAu с легирующей оболочкой, сформулированной как [Ag 46 Au 24 (SR) 32 ] (BPh 4 ) 2 . Этот нанокластер состоит из ахирального биметаллического ядра Ag 2 @Au 18 @Ag 20 , защищенного хиральной оболочкой Ag 24 Au 6 (SR) 32 .Эксперименты по катализу также показали, что структура поверхности значительно влияет на селективность продуктов. Это первый случай обнаружения структурного эффекта в нанокластерах сплавов атомарной точности. Наша работа будет способствовать базовому пониманию распределения биметаллов, а также связанных со структурой каталитических свойств нанокластеров сплава на атомном уровне.
Ключевые слова- Кристаллографическая структура
- Наночастица сплава
- Легирование поверхности
- Атомарно точная
- Тиол
- Биметаллический
- Связанные со структурой
- Катализ
9 наночастиц катализа появились новые наночастицы сплава
ВВЕДЕНИЕ за последние годы ( 1 ).Эти наночастицы широко применялись в самых разных областях, от катализа до зондирования и биологической маркировки ( 2 — 12 ). Недавние исследования показали, что физические и химические свойства, такие как каталитическая активность и селективность ( 13 — 17 ), а также электрические ( 18 ) и оптические свойства ( 19 ) сильно зависят от структуры. Таким образом, раскрытие структуры наночастиц имеет чрезвычайно важное значение и привлекает интенсивные исследовательские усилия.Защищенные тиолатом наночастицы атомарной точности Au или Ag (также называемые нанокластерами) представляют собой важный класс наночастиц благородных металлов из-за точного определения их структуры. За последние несколько лет с помощью рентгеновской кристаллографии ( 20 ) было сделано большое улучшение в понимании структуры поверхности и способов упаковки металла этих нанокластеров. На основе этих усилий структурная конструкция и связанные с ней каталитические, магнетизм, люминесценция и другие свойства нанокластеров гомозолота или гомосеребря были хорошо изучены ( 20 — 33 ).По сравнению с гомометаллическими нанокластерами структуры биметаллических нанокластеров исследовались редко. Недавно с помощью рентгеновской кристаллографии были успешно определены три нанокластера Au-Ag, защищенных тиолатом ( 34 — 36 ). Интересно обнаружить, что эти нанокластеры сплавов сохраняют те же каркасы, что и их гомометаллические аналоги с гомометаллическими оболочками ( 37 — 40 ). Это явление поднимает такие вопросы, как существуют ли нанокластеры сплава с легированной поверхностью и как атомы упаковываются внутри этих наночастиц сплава.Уникальная структура поверхности может предоставить возможности для лучшего понимания способов упаковки наночастиц сплава и связанных со структурой свойств.Здесь мы выполнили поверхностное легирование нанокластеров Ag-Au и получили хиральный [Ag 46 Au 24 (SR) 32 ] (BPh 4 ) 2 (R = t Bu) нанокластер, который на сегодняшний день составляет самую большую биметаллическую структуру нанокластера. Атомная структура [Ag 46 Au 24 (SR) 32 ] (BPh 4 ) 2 нанокластера может быть описана как трехслойный ахиральный Ag 2 @Au 18 @Ag 20 ядро, окруженное хиральной биметаллической оболочкой, состоящей из шести сердцевидных звеньев.Свободных валентных электронов было вычислено 36 (70-32-2). Общая структура этого защищенного тиолатом биметаллического нанокластера раскрывает беспрецедентный биметаллический элемент Ag 2 Au 1 SR, а также элемент Ag 4 SR в качестве уникальных мотивов, защищающих поверхность. Это недавно обнаруженное поверхностное легирование [Ag 46 Au 24 (SR) 32 ] (BPh 4 ) 2 биметаллический нанокластер дает возможность изучить способ упаковки и связанные со структурой каталитические свойства в биметаллической системе. на атомном уровне.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ. рентгеновская кристаллография (рис. 1). 70 атомов металла в этом нанокластере распределены в трех оболочках. Два центральных атома серебра окружены трубчатой структурой, состоящей из 18 атомов золота (рис.2, A и B), которые покрыты 20 атомами серебра (рис.2, В и Г). 18 основных атомов золота распределены по трем шестиугольникам, а общая форма напоминает бочку. В пределах этой оболочки из 18 атомов золота среднее расстояние Au-Au составляет 2,7764 Å. Вторая оболочка состоит из 20 атомов серебра, причем два верхних и нижних атома серебра покрывают 18 основных атомов золота. Среди оставшихся 18 атомов серебра во второй оболочке каждые шесть атомов серебра образуют концентрические шестиугольники с шестью атомами золота в первой оболочке. Среднее расстояние M-M в ядре Ag
20 Au 18 равно 2.8821 Å. Ядро Ag 20 Au 18 также можно рассматривать как два типа (типы A и B) слоев (рис. 2D): тип A — один атом серебра; тип B — шестиугольный Au 6 с еще шестью вершинными крышками (Ag 6 ). Эти два типа слоев образуют слои 1: 12: 1: 12: 1: 12: 1 и могут быть описаны как почти гексагональные плотноупакованные слои A: B: A. Обратите внимание, что аналогичная структура слоев 9: 1: 9 также описана в [Au 39 (PPh 3 ) 14 Cl 6 ] Cl 2 Тео и др. .( 41 ). Рис. 1 Полная структура биметаллического хирального нанокластера [Ag 46 Au 24 (SR) 32 ] (BPh 4 ) 2 нанокластера (один из энантиомеров) по данным рентгеновской кристаллографии.Серый, карбон; красный, сера; зеленый, серебристый; желтое золото; розовый, бор. Атомы водорода не показаны для ясности.
Рис. 2 Трехслойная структура [Ag 46 Au 24 (SR) 32 ] 2+ .( A и B ) Сверху и сбоку [Ag 46 Au 24 (SR) 32 ] (BPh 4 ) 2 изображения сердечника Ag 2 Au 18 (который не связан ни с какими тиолатными лигандами). ( C и D ) Сердечник Ag 2 @Au 18 @Ag 20 , виды сверху и сбоку. ( E и F ) Вид сверху и сбоку Ag 2 @Au 18 @Ag 20 сердечник , защищенный Ag 24 Au 6 (SR) 32 биметаллическая оболочка.( G ) Четыре режима склеивания в структуре мотива. Светло-зеленый / синий / серый, серебристый; желтое золото; красный, сера.
Сердечник Ag 22 Au 18 защищен биметаллической оболочкой Au-Ag. Состав легированной оболочки в нашем случае можно увидеть в виде шести мотивов из восьми атомов металла Ag 7 Au 1 (SR) 8 , напоминающих форму «сердца», и каждый мотив имеет общий Ag 3 (SR) 3 блок с двумя соседними сердечками (рис. 2, E и F).В этом нанокластере обнаружены четыре типа режимов связывания (рис. 2G): (i) Один RS соединяется с тремя атомами Ag с образованием Ag 3 SR, и этот режим связывания распространен в других нанокластерах серебра, защищенных тиолатом, таких как Ag 44 и Ag 62 ( 40 , 42 , 43 ). (ii) Один RS соединяется с четырьмя атомами Ag, образуя единицу Ag 4 SR. Расстояние Ag-S в этом аппарате очень необычно. Например, расстояние связи S-Ag core было намного короче (2.330 Å), чем в нанокластерах Ag 44 (~ 2,6 Å), что указывает на сильное взаимодействие между Ag и группами RS. Две более длинные оболочки из S-Ag (2,911 и 2,950 Å) указывают на довольно слабую связь в ней, о которой ранее никогда не сообщалось в гомосеребряных и биметаллических нанокластерах. (iii) Один RS связан с двумя атомами Ag и одним атомом Au с образованием SR Ag 2 Au 1 SR, и эта мода является уникальной для нанокластера сплава. В этом контексте этот режим представляет собой первый пример определения способности тиолатной группы к образованию биметаллической поверхности.(iv) Штаплеобразный Au 1 (SR) 2 , один атом Au и два атома S находятся почти на одной линии, аналогично моде связывания в Au 18 (SR) 14 , Au 23 (SR) 16 , Au 30 (SR) 18 , Au 102 (SR) 44 и Au 133 (SR) 52 нанокластеры ( 44 — 50 ).
Ранее описанные структуры нанокластеров сплава Ag-Au основаны на той же структуре гомометаллических нанокластеров того же размера [например, Ag 32 Au 12 (SR) 32 по сравнению с Ag 44 (SR ) 30 ( 34 , 40 ), Ag x Au 38– x (SR) 24 по сравнению с Au 38 (SR) 24 ( 36 , 39 ) и Ag x Au 25– x (SR) 18 по сравнению с Au 25 (SR) 18 ) ( 35 , 37 , 38 )].Такая же ситуация была предсказана в случае нанокластеров Ag x Au 144– x (SR) 60 ( 51 ). В этих нанокластерах второй металл может быть легирован только в ядро, тогда как поверхностные мотивы гомометаллические. Напротив, нанокластер [Ag 46 Au 24 (SR) 32 ] 2+ представляет собой первый пример, который показывает, что серебро и золото сосуществуют в поверхностных мотивах.
Как показано на рис.2 (C и D), металлическое ядро этого нанокластера является ахиральным. Чтобы дополнительно определить происхождение хиральности в этом нанокластере, мы удалили металлическое ядро, блок AuRS в оболочке, а также верхнюю и нижнюю группы RS. Как показано на фиг. 3A, точечная группа оболочки Ag-RS — это D 3d после удаления этих групп, что позволяет предположить, что эта оболочка является ахиральной. Наклоненные блоки AuSR снижают симметрию, удаляя три σ d , при этом остается симметричный центр (рис. 3B). Верхняя и нижняя группы RS обусловливают хиральность (рис.3, C и D) в нанокластере [Ag 46 Au 24 (SR) 32 ] (BPh 4 ) 2 (рис. 3, E и F). Открытия хиральности в этом нанокластере замечательны. В общем, два основных эффекта могут быть ответственны за хиральность гомометаллических нанокластеров: (i) хиральные лиганды могут индуцировать хиральность ахиральных нанокластеров ( 52 ) и (ii) асимметричное расположение группы RS-Au-RS на ахиральные нанокластеры золота ( 39 , 48 , 49 , 50 , 53 ).В нашем случае асимметричное расположение двух групп RS изменило хиральность нанокластеров.
Рис. 3 Хиральная структура [Ag 46 Au 24 (SR) 32 ] (BPh 4 ) 2 нанокластера.( A и B ) Вид сверху конструкции оболочки без блока AuSR и верхней / нижней группы RS (A) и с добавлением трех групп AuSR (B). ( C и D ) Вид сверху на двухэнантиомерную оболочку.( E и F ) Вид сверху двухэнантиомерных нанокластеров без атомов H и C. Серый / зеленый, серебристый; желтое золото; красный / синий, сера.
Формула нанокластера и зарядовое состояние были дополнительно подтверждены анализом ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (рис. S1). В спектре ЯМР 1 H [Ag 46 Au 24 (SR) 32 ] (BPh 4 ) 2 пики при 6,5-7,5 м.д. (40 H) отнесены к — C 6 H 5 из Ph 4 B —, а пики на 0.От 5 до 4,5 частей на миллион (288,7 H) относятся к –CH 3 в лигандах –SBu t . Этот результат согласуется с соотношением протонов (C 6 H 5 : CH 3 = 40: 288) и, таким образом, указывает на соотношение Ag 46 Au 24 (SR) 32 1: 2. по Ph 4 B — , в соответствии с результатами рентгеновской кристаллографии.
С успешно определенной структурой нанокластера Ag 46 Au 24 (SR) 32 теперь доступно сравнение с ранее описанными биметаллическими нанокластерами Ag-Au со структурой ядро-оболочка.Это может обеспечить простую модель для понимания структурного эффекта окисления стирола, катализируемого биметаллическим нанокластером серебро-золото.
Мы синтезировали серию структурно-определяемых гомометаллических нанокластеров и нанокластеров сплава, таких как Au 25 (SR) 18 , Ag 44 (SR) 30 , Ag 32 Au 12 (SR) 30 и Ag 46 Au 24 (SR) 32 нанокластеры (подробности см. В дополнительных материалах).Многослойные углеродные нанотрубки (УНТ) использовались в качестве общего носителя из-за того, что все эти нанокластеры могут эффективно адсорбироваться на поверхности УНТ. Кроме того, УНТ имеют преимущество в предотвращении диффузии голых нанокластеров ( 54 ). Просвечивающая электронная микроскопия (ПЭМ) (рис. S2 и S3) показала, что кластеры были равномерно распределены по УНТ и что все нанокластеры имели средний размер около 2 нм до и после реакции. Это указывает на незначительную агрегацию кластеров из-за достаточного взаимодействия нанокластера с УНТ ( 9 ).
В таблице 1 приведены результаты. Эпоксид и бензальдегид были основными продуктами окисления стирола. Все катализаторы показали высокую активность по сравнению с обычными УНТ. Homogold Au 25 / CNT показал самую высокую конверсию стирола, то есть 72,8%, тогда как селективность по бензальдегиду составила 66,4%. Гомосеребро Ag 44 / CNT показало гораздо более низкую конверсию (то есть 43,6%), чем нанокластер гомозолота, но продемонстрировал лучшую селективность по бензальдегиду (то есть 92.6%). По сравнению с гомометаллическими нанокластерами, поверхностное легирование биметаллических катализаторов Au 24 Ag 46 / CNT (таблица 1, запись 3) может повысить селективность по эпоксиду (то есть> 95%) и дать гораздо лучшую конверсию (то есть, ~ 70%), чем гомосеребряный нанокластер. Таким образом, преимущества как серебра (высокая селективность по бензальдегиду), так и золота (высокая конверсия) хорошо отражены на легирующем поверхность катализаторе Ag 46 Au 24 / CNT. Напротив, биметаллический нанокластер Ag 32 Au 12 со структурой ядро-оболочка демонстрирует гораздо более низкую селективность по бензальдегиду (то есть 37.6%), чем катализатор поверхностного легирования. Это открытие является замечательным в пионерских исследованиях структурного эффекта в нанокластерах сплава атомарной точности и демонстрирует явный синергетический эффект катализаторов из сплава AgAu (схема 1).
Схема 1 Два различных типа нанокластерных катализаторов окисления стирола.Нанокластер с поверхностным легированием (NC) показывает высокую селективность по бензальдегиду, тогда как нанокластер со структурой ядро-оболочка показывает высокую селективность по эпоксиду.
Таблица 1 Каталитические характеристики металлических нанокластеров на основе УНТ.Условия реакции: 20 мг катализа, 2 мас.% Нагрузки нанокластера, 57 мкл (0,5 ммоль) стирола, 144 мкл (1,5 ммоль) трет-бутилгидропероксида (TBHP), 1,5 мл этанола, 65 ° C, 24 часа.
В заключение, мы получили рентгеновскую кристаллическую структуру нового биметаллического (Au-Ag) нанокластера с магическим числом, сформулированного как [Ag 46 Au 24 (SR) 32 ] (BPh 4 ) 2 и дополнительно исследовали его каталитические свойства.Этот нанокластер заполняет вакансию между нанокластерами Ag 44 и Au 102 . Недавно обнаруженная биметаллическая оболочка имеет потенциал для расширения библиотеки нанокластеров магического размера, а также для понимания структурных свойств нанокластеров из сплава, защищенного тиолатом, на атомном уровне путем изучения катализа окисления стирола.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Подробная информация о синтезе [Ag 46 Au 24 (SR) 32 ] (BPh 4 ) 2 нанокластера приведена в дополнительных материалах.Таким образом, AgNO 3 и HAuCl 4 ⋅3H 2 O растворяли в метаноле с получением желтой мутной жидкости. В раствор добавляли третичный бутил для получения смеси комплекса Au I -SR и Ag I -SR. Затем использовали NaOH (1 М) для корректировки значения pH. После этого NaBH 4 использовали для восстановления этого комплекса смеси. Нанокластеры Ag 46 Au 24 (SR) 32 2+ осаждали из раствора, промывали гексаном, экстрагировали толуолом и повторно растворяли в растворе CH 2 Cl 2 .Добавление NaBPh 4 (растворенного в метаноле) образовало [Ag 46 Au 24 (SR) 32 ] (BPh 4 ) 2 нанокластер. Многослойные УНТ диспергировали в толуоле, и расчетное количество (0,1 мас.%) Кластера добавляли к суспензии УНТ при интенсивном магнитном перемешивании. После обработки в течение ночи продукт отделяли от раствора центрифугированием и сушили под вакуумом в течение 12 часов. Прокаливание композитов Au 25 : SR / CNT, Ag 44 : SR / CNT и Ag 46 Au 24 / CNT проводили в кварцевой печи в условиях вакуума при 200 ° C в течение 2 дней. часов для удаления лигандов.Подробный метод и характеристики доступны в дополнительных материалах.
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ
Дополнительные материалы к этой статье доступны по адресу http://advances.sciencemag.org/cgi/content/full/1/7/e1500441/DC1
Материалы
Рис. S1. 1 H ЯМР спектр [Ag 46 Au 24 (S t Bu) 32 ] (BPh 4 ) 2 нанокластеров (монокристалл, растворенный в CD 2 Cl 2 ).
Рис. S2. Типичные ПЭМ-изображения и распределение размеров кластеров (а) Au 25 / CNT, (b) Ag 44 / CNT, (c) Ag 32 Au 12 / CNT, (d) Ag 46 Au 24 / CNT до реакции.
Рис. S3. Типичные ПЭМ-изображения и распределение размеров кластеров (а) Au 25 / CNT, (b) Ag 44 / CNT, (c) Ag 32 Au 12 / CNT, (d) Ag 46 Au 24 / CNT после реакции.
Рис. S4. Цифровая фотография кристаллов [Ag 46 Au 24 (S t Bu) 32 ] (BPh 4 ) 2 .
Рис. S5. Спектры UV-Vis (а) Au 25 (SC 2 H 4 Ph) 18 — (б) Ag 44 (SPhF 2 ) 30 4-; (в) Ag 32 Au 12 (SPhF 2 ) 4-; (d) [Ag 46 Au 24 (S t Bu) 32 ] (BPh 4 ) 2 нанокластеров, растворенных в растворе дихлорметана.
Таблица S1. Кристаллические данные и уточнение структуры [Ag 46 Au 24 (S t Bu) 32 ] (BPh 4 ) 2 нанокластеров.
Таблица S2. Координаты атомов (× 10 4 ) и эквивалентные параметры изотропного смещения (Å 2 × 10 3 ) для [Ag 46 Au 24 (S t Bu) 32 ] (BPh 4 ) 2 .
Таблица S3. Длины связей (Å) и углы (°) для [Ag 46 Au 24 (S t Bu) 32 ] (BPh 4 ) 2 нанокластеров.
Таблица S4.Параметры анизотропного смещения (Å 2 × 10 3 ) для [Ag 46 Au 24 (S т Bu) 32 ] (BPh 4 ) 2 .
Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями некоммерческой лицензии Creative Commons Attribution, которая разрешает использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, что конечным результатом будет использование , а не для коммерческих целей и при условии, что оригинальная работа правильно цитируется.
Финансирование: Мы признательны за финансовую поддержку Национальному фонду естественных наук Китая (21072001, 21201005 и 21372006), Министерству образования и Министерству людских ресурсов и социального обеспечения, Департаменту образования провинции Аньхой, Международная провинция Аньхой. Проект научно-технического сотрудничества и проект 211 Университета Аньхой. Вклад авторов: S.W. и С.Дж. задумал и осуществил синтез и кристаллизацию кластеров.С.В. и С.Ю. задумал и провел каталитическую реакцию. S.C. и Y.S. помогал в синтезе. J.Z. проанализировали кристаллические данные кластеров. М.З. разработал исследование, руководил проектом, проанализировал данные и написал статью. Конкурирующие интересы: Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.
- Авторские права © 2015, Авторы
Пейзаж вирусного генома полиаденилирования РНК от латентной KSHV до литической инфекции
Abstract
Полиаденилирование РНК (pA) является одним из основных этапов регуляции экспрессии генов на посттранскрипционном уровне.В этом отчете с использованием модифицированной стратегии PA-seq был построен геномный ландшафт сайтов pA вирусных транскриптов в B-лимфоцитах с инфекцией, вызванной саркомой Капоши, вирусом герпеса (KSHV). Мы идентифицировали 67 уникальных сайтов pA, из которых 55 можно отнести к экспрессии аннотированных ∼90 генов KSHV. Среди назначенных сайтов pA двадцать предназначены для экспрессии отдельных отдельных генов, а остальные — для нескольких генов (в среднем 2,7 гена на сайт pA) в локусах кластерных генов генома. Несколько новых вирусных сайтов pA, которые нельзя отнести к каким-либо известным генам KSHV, часто расположены в антисмысловой цепи к ORF8, ORF21, ORF34, K8 и ORF50, и связанные с ними антисмысловые мРНК к ORF21, ORF34 и K8 могут быть проверены с помощью 3 ‘РАСА.Использование каждого картированного сайта pA коррелирует с размером его пика, большим (широким и широким) размером пика, более широким использованием и, следовательно, более высокой экспрессией гена (ов), ассоциированного с сайтом pA. Подобно транскриптам млекопитающих, полиаденилирование KSHV РНК задействует два основных сигнала поли (А), AAUAAA и AUUAAA, и регулируется консервацией цис- -элементов, фланкирующих картированные сайты pA. Более того, мы обнаружили два или более альтернативных сайта pA ниже ORF54, K2 (vIL6), K9 (vIRF1), K10.5 (vIRF3), K11 (vIRF2), K12 (Kaposin A), T1.5 и PAN и экспериментально подтвердили альтернативное полиаденилирование для экспрессии транскриптов KSHV ORF54, K11 и T1.5. Вместе наши данные предоставляют не только исчерпывающий ландшафт сайтов pA для понимания структуры генома KSHV и экспрессии генов, но также первые доказательства альтернативного полиаденилирования как еще одного уровня посттранскрипционной регуляции экспрессии вирусных генов.
Сведения об авторе
Не сообщалось о полногеномном ландшафте полиаденилирования при экспрессии вирусов герпеса человека.В этом исследовании мы представляем первый ландшафт генома сайтов полиаденилирования вирусной РНК в В-клетках от латентной KSHV до литической инфекции с использованием модифицированного протокола PA-seq и выборочной проверки с помощью 3 ‘RACE. Мы обнаружили, что геном KSHV содержит 67 активных сайтов pA для экспрессии его ~ 90 генов и нескольких антисмысловых транскриптов. Среди картированных сайтов pA большая часть из них предназначена для экспрессии кластерных генов и продукции бицистронных или полицистронных транскриптов из генома KSHV, и только одна треть используется для экспрессии отдельных генов.Мы обнаружили, что размер отдельных пиков PA положительно коррелирует с использованием соответствующего сайта pA, что определяется количеством считываний в пределах пика PA от латентной до литической инфекции KSHV и силой цис- -элементов, окружающих KSHV. Сайт pA определяет уровень экспрессии вирусных генов. Наконец, мы идентифицировали и экспериментально подтвердили альтернативное полиаденилирование KSHV ORF54, T1.5 и K11 во время вирусной литической инфекции. Насколько нам известно, это первый отчет об альтернативных событиях полиаденилирования при инфекции KSHV.
Образец цитирования: Majerciak V, Ni T, Yang W, Meng B, Zhu J, Zheng Z-M (2013) Пейзаж вирусного генома полиаденилирования РНК от латентной KSHV до литической инфекции. PLoS Pathog 9 (11): e1003749. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003749
Редактор: Бритт А. Глаунсингер, Калифорнийский университет в Беркли, Соединенные Штаты Америки
Поступила: 26 апреля 2013 г .; Принята к печати: 20 сентября 2013 г .; Опубликовано: 14 ноября 2013 г.
Это статья в открытом доступе, свободная от всех авторских прав, и ее можно свободно воспроизводить, распространять, передавать, модифицировать, надстраивать или иным образом использовать в любых законных целях.Работа сделана доступной по лицензии Creative Commons CC0 как общественное достояние.
Финансирование: Эта работа была поддержана внутренними программами Национальных институтов здравоохранения, Национального института рака, Центра исследований рака и Национального института сердца, легких и крови. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.
Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.
Введение
Вирус герпеса, связанный с саркомой Капоши (KSHV), также называемый вирусом герпеса человека 8 (HHV-8), является членом подсемейства гаммагерпервирусов [1]. Инфекция KSHV у здоровых людей хорошо контролируется иммунной системой хозяина и другими факторами хозяина и, следовательно, обычно протекает бессимптомно. Однако длительная иммуносупрессия может привести к возникновению злокачественных новообразований, вызванных KSHV. KSHV был связан с тремя злокачественными новообразованиями, включая все формы саркомы Капоши, сложную солидную опухоль эндотелиального происхождения и две редкие B-клеточные лимфомы, первичную выпотную лимфому (PEL или крупноклеточную лимфому на основе полости тела) и многоцентровую болезнь Кастлемана [2 ] — [4].KSHV, как и другие герпесвирусы, проявляет два различных состояния инфекции: латентную и литическую инфекцию. В латентный период экспрессируется только небольшая часть вирусных генов, что способствует поддержанию вирусного генома, стимулирует пролиферацию клеток и опосредует иммунную инвазию. Различные внешние и внутренние стимулы вызывают нарушение латентного периода KSHV и индукцию литической инфекции KSHV с экспрессией всех вирусных литических генов и репликацией вирусного потомства [5] — [7]. KSHV имеет большой ДНК-геном (~ 168 т.п.н.), кодирующий более 90 генов для продукции вирусных структурных и неструктурных белков, небольших пептидов, длинных некодирующих РНК (lncRNAs) и малых регуляторных miRNA [1], [8] — [10].Как и многие ДНК-вирусы, KSHV имеет сложную генную организацию и зависит от аппарата клетки-хозяина для его экспрессии. Однако полный перечень аннотаций вирусного генома все еще неизвестен, и истинная природа экспрессии вирусных генов и ее регуляция еще предстоит полностью понять.
РНК-полиаденилирование (pA) растущих транскриптов является критическим посттранскрипционным этапом созревания эукариотических транскриптов [11]. Основная роль полиаденилирования РНК заключается в высвобождении вновь синтезированной РНК из матрицы ДНК посредством расщепления эндонуклеазой и защите ее от деградации путем добавления поли (А) хвоста к 3′-концу РНК.Присутствие поли (A) хвоста также способствует ядерно-цитоплазматическому экспорту и эффективной белковой трансляции мРНК [12], [13]. Полиаденилирование РНК осуществляется большим белковым комплексом, состоящим по крайней мере из 85 белковых факторов, и связывается со специфическими последовательностями в формирующихся транскриптах, окружающих сайт расщепления [14]. Богатый A / U элемент вверх по течению, распознаваемый фактором специфичности расщепления и полиаденилирования (CPSF), и богатый U / GU элемент ниже по течению, распознаваемый фактором стимуляции расщепления (CstF) [15], [16], сайта расщепления. являются двумя основными детерминантами полиаденилирования РНК, хотя другие вспомогательные цис- -элементы также могут участвовать в определении сайта pA [17], [18].После сборки комплекса полиаденилирования пре-мРНК обычно расщепляется по динуклеотиду «СА» с последующим добавлением поли (А) хвоста [19]. Хотя сам процесс полиаденилирования хорошо охарактеризован, выбор сайта pA остается загадкой. Недавние полногеномные исследования полиаденилирования транскриптов хозяина у различных организмов выявили очень беспорядочное полиаденилирование большой популяции РНК из множества сайтов pA [20] — [22]. В результате гены, затронутые альтернативным полиаденилированием, продуцируют субнабор транскриптов с разными потенциалами кодирования или 3′-нетранслируемыми областями (3′-UTRs) [23].
Пейзаж полиаденилирования герпесвирусов человека не описан на уровне всего генома. В этом исследовании мы выполнили полногеномный анализ полиаденилирования РНК транскриптов KSHV из В-клеток с латентной или литической вирусной инфекцией с использованием модифицированной технологии полиаденилирования-секвенирования (PA-seq) [24]. Мы определили, что KSHV использует 67 активных сайтов pA для экспрессии его латентных и литических генов и нескольких новых или неаннотированных генов. Мы также обнаружили альтернативное полиаденилирование РНК нескольких известных генов KSHV и выявили цис- -элементы сайта pA в регуляции экспрессии гена KSHV.
Результаты
Идентификация сайтов pA KSHV с помощью PA-seq
Чтобы выяснить роль полиаденилирования РНК в регуляции гена KHSV, мы выполнили полногеномный анализ вирусных сайтов pA, чтобы контролировать их использование во время инфекции KSHV. В этом исследовании были выбраны три KSHV-положительные линии B-клеток (JSC-1, BCBL-1 и TREx BCBL-1), которые поддерживают как латентную, так и литическую вирусную инфекцию. Для каждой клеточной линии события полиаденилирования сравнивали между латентной и литической инфекцией (рисунок S1A).Клетки с литической инфекцией собирали через 48 часов после реактивации вируса путем химической индукции, чтобы обеспечить полный цикл репликации вируса и достаточную экспрессию поздних вирусных транскриптов. Мы наблюдали резкое снижение жизнеспособности клеток, связанное с реактивацией вируса (31% против 88% для JSC-1, 50% против 89% для BCBL-1 и 20% против 82% для клеток TREx BCBL-1 [далее TREx]) анализом исключения трипанового синего. Фракцию РНК Poly (A) + из каждого образца использовали для получения библиотек кДНК с 3′-концом с помощью модифицированного метода PA-seq с последующим секвенированием парных концов Illumina [24], [25].В общей сложности мы получили более 119 миллионов парных считываний из всех образцов (рисунок S1B). KSHV- и специфичные для человека считывания были извлечены путем сопоставления полученных считываний последовательностей с эталонными геномами KSHV (GenBank с номером U75698.1) и человека (версия UCSC hg19). Более 100 миллионов (~ 84%) всех считываний были однозначно картированы, около 35 миллионов (~ 29%) — на KSHV и примерно 65 миллионов (~ 55%) — на геном человека. Остальные 19 миллионов (16%) — чтения без отображения. Как и ожидалось, была замечена замечательная корреляция между KSHV-специфическими считываниями и статистикой KSHV-инфекции во всех трех клеточных линиях с меньшим количеством считываний KSHV (0.10–0,47%) в клетках с латентной вирусной инфекцией и намного больше KSHV читается (20–77%) в клетках с литической инфекцией KSHV (рис. S1B и S1C).
Для анализа сайта pA KSHV мы сосредоточились только на считываниях последовательностей, однозначно картированных в геном KSHV и дополнительно сгруппированных для идентификации пиков PA. Мы объединили показания последовательности KSHV из всех образцов и выполнили анализ вызовов пиков с использованием алгоритма F-seq со значительным обогащением по сравнению с фоновой моделью [26] и порогом> 50 отсчетов считываний на пик (рисунок S2).Как и ожидалось, только небольшое количество пиков PA было обнаружено в клетках с латентной инфекцией KSHV, но значительно больше пиков было обнаружено в клетках с литической инфекцией KSHV (фигура S3A). Для дальнейшего анализа распределения пиков PA в контексте выбранных вирусных генов и для обеспечения пиков PA, полученных из нашего PA-seq, репрезентативного для аутентичных участков сайта pA, мы изучили пик PA, распределенный в хорошо охарактеризованной ORF50 ( RTA) /K8/K8.1, который кодирует три коллинеарных гена KSHV. Хотя каждый ген в локусе имеет свой собственный промотор, все их транскрипты полиаденилированы в одном сайте pA, расположенном ниже K8.1 (см. Диаграмму на рисунке S3B). Мы обнаружили заметный пик PA во всех литических образцах, но в меньшей степени в латентных образцах, перекрывающийся с картированным сайтом pA (Рисунок S3B), о котором сообщалось в предыдущих исследованиях [27], [28]. Никаких других пиков PA не наблюдалось ни выше, ни ниже этого сайта pA. Эти данные показывают, что библиотеки PA-seq были высокого качества и подходили для всестороннего анализа вирусных сайтов pA.
Впоследствии мы определили положение нуклеотида (nt) с наибольшим количеством считываний в пределах отдельных пиков в анализе вызова пика как режим PA (рисунок S2) и обозначили такой режим PA как уникальный сайт pA (таблица S1).Мы также определили пик PA от начала пика до конца пика, и общее количество считываний в пределах пика PA было использовано для приближения использования сайта pA (рисунок S2). С помощью этого подхода мы идентифицировали 67 сайтов pA на обеих цепях вирусной ДНК генома KSHV (рис. 1A). Сайты pA, картированные с помощью PA-seq в этом исследовании, были очень близки к нескольким известным сайтам pA, ранее картированным традиционными методами, как с точки зрения картированного положения нуклеотидов, так и с точки зрения специфичности цепи (Таблица S2).
Рисунок 1.Полногеномный ландшафт pA-сайтов KSHV.
(A) Диаграмма генома KSHV с картированными вирусными сайтами pA (красные треугольники для положительной цепи и синие треугольники для отрицательной цепи). Каждое число представляет собой нуклеотидное положение идентифицированного сайта pA. (B) Частота встречаемости сайтов pA, сопоставленных с отдельными вирусными генами или в кластерах генов (два или более гена на сайт pA). (C) График разброса, изображающий распределение длины вирусного 3’UTR по размеру от терминирующего кодона гена, смежного с картированным сайтом pA, непосредственно ниже по ходу цепи.Медиана длины 3’UTR рассчитывалась по 50 сайтам pA непосредственно ниже ORF, кодирующих белок.
https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003749.g001
Более высокая распространенность сайтов pA показывает смещение цепи: 43 сайта pA в отрицательной цепи и 24 в положительной цепи генома KSHV. Большинство картированных сайтов pA расположены в межгенных областях генома KSHV, вне аннотированных ORF, за исключением сайтов pA в кодирующих областях ORF7 в нуклеотиде 7032 и ORF61 в нуклеотиде 98274 и K12 в нуклеотиде 118012, 118032. и 118087.
Отнесение картированных сайтов pA к генам KSHV
Наш анализ сайтов pA по всему геному позволил нам сопоставить каждый картированный сайт pA с аннотированными генами KSHV и идентифицировать новый ген (ы) KSHV. Мы отнесли каждый сайт pA к известному вирусному гену или области кластера генов на основании следующих критериев: (1) оба гена (ов) и соответствующий сайт pA должны находиться на одной и той же цепи вирусного генома, (2) pA сайт должен располагаться вне кодирующей области вирусного гена (ов), и (3) ген (ы), назначенный картированному сайту pA, должен располагаться выше сайта pA.Эти критерии предполагают, что вирусные транскрипты, происходящие от промотора (ов) выше гена, будут полиаденилированы с первого доступного сайта pA ниже по течению. Соответственно, мы отнесли 55 сайтов pA ко всем известным генам KSHV (рисунок 1B, таблица S3). Оставшиеся 12 сайтов pA, которые невозможно определить, будут указывать на присутствие транскриптов неизвестных генов KSHV для дальнейшей проверки. Интересно, что большинство неназначенных сайтов pA расположены антисмыслово по отношению к известным генам KSHV, что позволяет предположить существование предполагаемых антисмысловых транскриптов к этим вирусным генам [29].Среди 55 сайтов pA, присвоенных известным транскриптам гена KSHV, 20 расположены непосредственно ниже одного гена KSHV для полиаденилирования моноцистронной мРНК, а остальные 35 имеют несколько вышестоящих генов KSHV в диапазоне от 2 до 5 для полиаденилирования бицистронных или полицистронных транскриптов ( Рисунок 1B). Интересно, что мы обнаружили два или более сайта pA, картированных в области ниже одного и того же гена. К ним относятся два альтернативных сайта pA ниже ORF54, K2 (vIL6), K9 (vIRF1), K10.5 (vIRF3), K11 (vIRF2) и K12 (Kaposin A), три ниже T1.5 РНК и РНК PAN (nut-1) или во внутренней области K12, и пять ниже внутренних повторов vnct (рис. 1A). Из генов, кодирующих белок, ORF54 показал наибольшее использование альтернативных сайтов pA (~ 24%), за ним следовали K10,5 (~ 17%) и K11 (~ 11%), но K2, K9 и K12 использовали гораздо реже. (Таблица S4). Таким образом, наш анализ обеспечивает не только первый всеобъемлющий ландшафт функциональных сайтов pA в контексте генома KSHV, но и впервые альтернативное полиаденилирование транскриптов KSHV во время вирусной инфекции.
Длина 3’UTR транскриптов KSHV
Далее мы стремились определить длину и состав 3 ‘UTR для каждого гена, кодирующего белок KSHV. Неназначенные сайты pA и сайт pA для генов вирусной некодирующей РНК были исключены из этого анализа. Всего 50 сайтов pA использовали для расчета длины 3’UTR от сайта pA до соседнего терминирующего кодона ближайшей расположенной выше ORF. Мы обнаружили, что рассчитанная длина 3 ‘UTR генов KSHV сильно варьирует по размеру от 2 нт (ORF38) до 1925 нт (ORF62) (Таблица S3).Распределение 3’UTR KSHV показано на рисунке 1С со средним размером 3’UTR в ~ 80 нт, что значительно короче, чем 3’-UTR человека со средним размером ~ 300 нт [20].
Использование сайтов KSHV pA в течение жизненного цикла KSHV
На основании количества считываний последовательности, полученных на каждом сайте pA, можно сделать вывод об относительном устойчивом уровне (использование сайта pA) транскриптов, связанных с сайтом pA. Ограничением этого подхода являются кластерные гены, использующие один сайт pA, в котором количество считываний последовательности отражает совокупный уровень всех транскриптов гена.Использование сайта pA сравнивали от латентной до литической инфекции. Сначала мы определили использование каждого сайта pA в отдельных образцах, чтобы получить использование сайта pA для конкретного образца, а затем нормализовали количество считываний последовательности в пределах каждого вирусного пика pA к общему количеству считываний последовательностей, сопоставленных с KSHV и геномом хозяина в каждом образце (рисунок S4 , Таблица S5). Комбинация нормализованных считываний последовательностей из всех латентных образцов сравнивалась с таковой из всех литических образцов (рис. 2A, 2B, таблица S6). Сайт pA 122069 (+) латентной полицистронной РНК ORF73 (LANA), ORF72 (vCyclin) и K13 (vFLICE) служил эталоном (красная полоса на рис. 2A – C).Удивительно, но в образцах с латентной инфекцией первые 5 сайтов на основе количества последовательностей сайтов pA были PAN (nut-1), кластер ORF2 / K2, кластер K12, кластер ORF50 / K8 / K8.1 и T1.5 (рис. 2A ), которые предположительно являются литическими генами KSHV, но спонтанно реактивируются в небольшой фракции клеток со скрытой инфекцией (Рисунок S3, Таблица S6). Использование сайта pA для экспрессии ORF73 / ORF72 / K13 занимает 6-е место во время задержки. В образцах с литической инфекцией 5 верхних используемых сайтов pA были сайтами pA для обильной экспрессии PAN, K12, кластера ORF62-58, T1.5 и кластер K4.2 / 4.1 / 4, а использование эталонного латентного сайта pA для экспрессии ORF73 / ORF72 / K13 упало до 41-го места. Однако, когда были рассчитаны изменения в использовании каждого идентифицированного сайта pA от литической к латентной инфекции, использование картированных сайтов pA для экспрессии вирусного литического гена стало значительным, с более чем 500-кратным увеличением от латентной до литической инфекции для ORF62, ORF24. / 23, ORF44, PAN и K12 (рисунок 2C, таблица S6). Наименьшим изменением использования (<10 раз) во время литического инфицирования вирусом были сайты pA для экспрессии ORF2 / K2, K10.6 / 10.5 и ORF73 / ORF72 / K13, а также транскрипты, антисмысловые по отношению к ORF50 (RTA) и K15 / ORF75 (рис. 2C, вставка). Наименьшим изменением в использовании сайта pA был эталонный сайт pA ORF73 / ORF72 / K13, с увеличением только в 2,1 раза. Таким образом, эти сайты pA действительно используются для экспрессии латентных генов вируса. Примечательно, что размеры пиков сайтов pA значительно варьируются в пределах от 3 (сайт pA на nt 17227) до 98 nts (pA site на 29740) (таблица S7) и представляют гетерогенность сайтов расщепления в каждом картированном сайте pA [30].Эта гетерогенность данного сайта pA, такого как сайт pA в нуклеотиде 29740, нуклеотиде 76738 или нуклеотиде 122069, оставалась неизменной либо от клеток JSC-1 к BCBL-1, либо от латентной до литической инфекции (данные не показаны). Основываясь на их бимодальном распределении (рис. 3A), мы сгруппировали 38 сайтов pA с узким пиком (≤30 нт, средний размер 17 нт), 24 сайта pA с широким пиком (> 30, ≤45 нт, с средний размер 36,5 нт) и 5 сайтов pA с широким пиком (> 45 нт, со средним размером 61 нт) (рис. 3А). Интересно, что мы обнаружили сильную положительную корреляцию использования сайта pA с помощью считывания последовательностей в порядке от узкого (4013 считываний), широкого (62 764 считывания) до широких (425 475 считываний) пиков с коэффициентом корреляции Спирмена r s = 0 .86 (Рисунок 3B, Таблица S8). Поскольку каждый транскрипт может производить только одно чтение в PA-seq, тогда как RNA-seq полагается на охват чтения на всей области транскрипта, счетчик чтения в данном пике PA сайта pA просто отражает количество соответствующего транскрипта. .
Рисунок 2. Использование идентифицированных сайтов pA KSHV от латентной до литической инфекции.
(A и B) Гистограммы, представляющие частоту использования каждого идентифицированного сайта pA из всех 3 образцов с латентной (A) или литической (B) инфекцией после нормализации на миллион всех отображенных считываний.(C) Гистограмма, показывающая кратное изменение использования каждого сайта pA от литической (A) до латентной (B) инфекции. На вставке показаны пять нижних участков pA с наименьшими изменениями во время литической инфекции. Красные столбцы в (от A до C) представляют ранее описанный сайт pA латентного транскрипта KSHV, ORF73 / ORF72 / K13. N / A, не применимо.
https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003749.g002
Рисунок 3. Максимальный размер и использование сайтов KSHV pA.
(A) График, показывающий распределение идентифицированных вирусных сайтов pA на основе размера пика PA, определенного с помощью анализа F-seq.Все сайты pA делятся на три категории в зависимости от их размера пика: узкие (≤30 нт), широкие (> 30, ≤45 нтс) и широкие (> 45 нтс). (B) График разброса, изображающий корреляцию между размерами пиков PA (ось x) и их использованием (ось y). Каждый цветной кружок представляет отображенный сайт pA. Коэффициент корреляции Спирмена ( r s ) был рассчитан для всех вирусных сайтов pA.
https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003749.g003
РНК
цис -элементы в регуляции вирусного полиаденилированияЧтобы исследовать регуляторные элементы, ответственные за полиаденилирование вирусных транскриптов KSHV, мы проанализировали фланкирующие последовательности (± 50 нт) всех 67 идентифицированных сайтов pA.Распространенность каждого нуклеотида в индивидуальном положении была рассчитана, после чего был проведен анализ мотивов с использованием программного обеспечения WebLogo (рис. 4A). Была идентифицирована высокая распространенность остатков «А» между 10 и 30 нуклеотидами перед сайтом расщепления, что представляет собой сигнал полиаденилирования, обогащенный A / U, расположенный выше по течению. Сам сайт расщепления также был обогащен остатками A, за которым следовал элемент длиной ~ 30 н., В основном богатый U. Такое распределение цис- -элементов РНК вокруг вирусных сайтов pA согласуется с тем, что было обнаружено в человеческих транскриптах [16].Чтобы лучше понять роль цис- -элементов в регуляции полиаденилирования KSHV, мы выполнили аналогичный анализ отдельно для трех групп сайтов pA с узким, широким или широким пиком (рис. 4A). Профили сайтов pA с узким и широким пиком показали наибольшее сходство с каноническим сайтом pA с определенным расположенным выше A-богатым и нижележащим U-богатым элементом. Сайты pA с широким пиком также демонстрируют богатую ураном область выше по течению. Однако после сайта pA с широким пиком нет значительного богатого ураном элемента, а также нельзя увидеть другие мотивы последовательности.Эти различия в контексте последовательности, окружающей сайты pA с разными пиками, могут быть связаны с их заметным обилием связанных транскриптов, и были дополнительно подтверждены анализом 10 верхних сайтов pA с наибольшим числом считываний последовательности и нижних 10 сайтов pA с наименьшим числом. считываний последовательности среди всех 67 сайтов pA. Как показано на фиг. 4B, верхние 10 сайтов pA показывают высококонсервативные сигналы полиаденилирования выше по течению и богатую U области ниже по течению. Напротив, нижние 10 сайтов pA только демонстрируют менее консервативные сигналы полиаденилирования и не имеют богатой U области ниже по ходу цепи.
Рис. 4. Последовательный ландшафт вокруг участков KSHV pA.
(A) Частота (%) каждого A, U, C, G (верхняя часть каждой панели) в области ± 50 нтс картированных сайтов pA (стрелки) была рассчитана либо для всех картированных сайтов pA, либо для подгруппы отображаемых узких, широких или широких участков pA. В нижней части каждой панели представлены мотивы, идентифицированные Weblogo. (B) Консервация нуклеотидов в одной и той же области наиболее часто используемых верхних 10 и менее используемых нижних 10 сайтов pA.
https: // doi.org / 10.1371 / journal.ppat.1003749.g004
Анализ силы вышестоящего поли (A) сигнала (PAS) сайтов KSHV pA еще раз подтвердил этот вывод. Канонический (AAUAAA) и неканонический (NNAUNA) PAS были идентифицированы в пределах 50 нт. Выше картированных 59 сайтов pA (рис. 5A, таблица S9). Два наиболее распространенных PAS в KSHV, как видно из полиаденилирования человека, — это канонический AAUAAA (69%), за которым следует AUUAAA (9%). Использование других неканонических PAS для полиаденилирования вирусной РНК колеблется от 1% до 3% (рис. 5A, таблица S10).Подобно человеческим транскриптам [20], около 12% сайтов pA, картированных в этом исследовании, не имеют PAS. Неожиданно мы обнаружили, что большинство неканонических PAS были связаны с узким пиком и низким уровнем экспрессии. Напротив, широкие и широкие пики используют преимущественно канонические AAUAAA и AUUAAA PAS. Это стало еще более очевидным, когда PAS вверху и внизу использовал сайты 10 pA. Мы обнаружили, что все 10 верхних сайтов pA, но только 60% нижних 10 сайтов pA содержат канонический AAUAAA (рис. 5B, таблица S10).
Рисунок 5. Сигнал поли (A) (PAS) и полиаденилирование вирусной РНК.
Регион 50 (AAUAAA) или неканонический PAS. Круговые диаграммы, показывающие процентное соотношение каждого PAS, идентифицированного во всех картированных сайтах pA или в подгруппе сайтов pA (узких, широких или широких) (A) и в 10 наиболее часто используемых и 10 менее используемых сайтах pA (B). ND, не обнаруживается. На диаграммах ниже представлена консервация нуклеотидов в идентифицированных PAS, созданных Weblogo.
https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003749.g005
Экспериментальная проверка выбранных сайтов pA KSHV
Учитывая, что сайты pA, полученные с помощью PA-seq, в целом показали высокую корреляцию с ранее картированными сайтами pA KSHV, мы провели серию экспериментов, чтобы подтвердить несколько новых сайтов pA, обнаруженных в этом исследовании с помощью 3 ‘RACE. К ним относятся сайт pA ниже ORF27, сайт pA, картированный в кодирующей области ORF61, альтернативные сайты pA ниже ORF54 и T1.5 и кластер из 5 неназначенных сайтов pA ниже внутренних повторов vnct в в дополнение к известным сайтам pA и неизвестным альтернативным сайтам pA K11, K2 / vIL6 и K12.Большинство выбранных сайтов pA, определенных с помощью PA-seq, были проверены путем секвенирования ожидаемых продуктов 3′-RACE в предсказанных размерах (фиг. 6, таблица S11). Альтернативный сайт pA в нуклеотиде 25192 в днРНК T1.5 не был экспериментально подтвержден из-за его использования <1% среди транскриптов T1.5 и отсутствия доступного для поиска PAS в восходящем направлении, ни альтернативных сайтов pA в нуклеотиде 17227 для K2 / vIL6 и в nt 117868 для K12 из-за их более низкого уровня использования. Мы также не смогли обнаружить какой-либо продукт 3'RACE в предсказанных размерах из пяти сайтов pA ниже внутренних повторов vnct , несмотря на их умеренное использование, основанное на количестве связанных счетчиков чтения.Эти сайты pA, идентифицированные с помощью PA-seq, находятся рядом с областью коротких внутренних повторов из 13 пар оснований « vnct » между нуклеотидами 29775 и 29942 генома KSHV. Стоит отметить, что четыре из пяти сайтов pA не имеют обнаруживаемого PAS в восходящем направлении, а сайт pA на nt 29615 имеет неканонический PAS AAUAUA. Сообщенный сайт pA на нуклеотиде 18200 для антисмысловой РНК к K2 (vIL6) [29], [31], который не был обнаружен с помощью PA-seq, также не был обнаружен с помощью 3′-RACE в этом исследовании (фиг. 6).
Рисунок 6.Подтверждение выбранных вирусных сайтов pA с помощью 3 ‘RACE.
Диаграммы над каждым гелем отображают направление транскрипции гена с картированным сайтом (ами) pA в положительной (красный) или отрицательной (синий) цепи. Под каждой диаграммой представлены продукты 3’RACE от амплификации каждым ген-специфическим олиго (дополнительная таблица S11) общей РНК, экстрагированной из клеток TREx-RTA, индуцированных доксицилином в течение 48 часов. Сравнение последовательностей картированных сайтов pA, определенных с помощью PA-seq и 3’RACE, показано под каждым агарозным гелем, с числами, указывающими положения нуклеотидов картированных сайтов pA (черные стрелки) в геноме KSHV.
https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003749.g006
Мы дополнительно проверили PA-seq-идентифицированные сайты pA из антисмысловых мРНК к ORF21, ORF34 и ORF K8 по 3′-RACE и подтвердили получение антисмысловых РНК в В-клетках во время литической вирусной инфекции (фиг. 7А). Обилие считывания этих новых сайтов pA, связанных с каждой антисмысловой РНК, коррелировали, как и предполагалось, с количеством (измеренным по интенсивности полосы) продуктов 3 ‘RACE, полученных из соответствующего транскрипта РНК (фигура 7B).
Фиг. 7. Проверка антисмысловых РНК, идентифицированных PA-seq, к ORF21, ORF34 и ORF K8 с помощью 3′-RACE.
(A) Стратегия 3 ‘RACE, продукт RACE и результат секвенирования антисмысловой РНК к ORF21, ORF34 или ORF K8. См. Рисунок 6 для получения более подробной информации. (B) Обнаружение продуктов 3’-RACE коррелирует с количеством считываний PA-seq, полученных из специфических антисмысловых РНК, в отдельных линиях В-клеток с латентной и литической инфекцией KSHV.
https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003749.g007
Альтернативное полиаденилирование РНК KSHV T1.5
KSHV T1.5 РНК представляет собой длинную некодирующую РНК, которая транскрибируется с нуклеотида 24243 в геноме KSHV, рядом с левым литическим центром репликации ( ori L ) (рис. 8A). Экспрессия РНК T1.5 сильно индуцируется вирусным трансактиватором RTA [32]. Хотя экспрессия T1.5 необходима для репликации вирусной ДНК, его функциональные характеристики остаются неизвестными [33]. Наше исследование показало, что T1.5 РНК является одним из наиболее распространенных транскриптов, экспрессируемых во время инфекции KSHV. 3′-конец РНК T1.5 был картирован на нуклеотид 25440 [34], и мы сопоставили его с нуклеотидом 25441 с помощью PA-seq и 3’RACE (Рисунок 6). Кроме того, мы обнаружили, что около 10% транскриптов T1.5 также были полиаденилированы с двух дополнительных сайтов pA перед сайтом pA nt 22541 (фигура 8A), что привело к продукции на ~ 300 нуклеотидов более коротких транскриптов, что подтверждено анализом Нозерн-блоттинга общей РНК BCBL-1 (фиг. 8B). Поскольку антисмысловой зонд, используемый в анализе, был получен из области, расположенной выше по течению от картированных сайтов pA, этот зонд мог обнаруживать все транскрипты, проходящие по этой области: сильная полоса, соответствующая заявленному размеру индуцибельного Т1.5, полоса меньшего размера (~ 1,2 т.п.н.) с меньшей интенсивностью, представляющая альтернативно полиаденилированные транскрипты Т1.5, и гораздо больший транскрипт Т6.1. РНК T6.1 не использует сайты pA T1.5 [34], а скорее сайт PAN pA для своей экспрессии (рис. 1A).
Рисунок 8. Субклеточная локализация днРНК KSHV T1.5 в клетках PEL.
(A) Диаграмма, отображающая генную структуру локуса T1.5 с кластером сайтов pA, идентифицированных с помощью PA-seq (красные треугольники). Синие линии представляют зонды, используемые для нозерн-блоттинга (NB) и РНК FISH.P-промотор, ori L -литический ориджин репликации. (B) Нозерн-блоттинг общей (T) или фракционированной (C-цитоплазматической, N-ядерной) РНК, выделенной из клеток BCBL-1 через 24 часа после индукции 1 мМ вальпроатом натрия (VA). В качестве зонда использовали 32 Р-меченный антисмысловой олиго, специфичный к T1.5, PAN, GAPDH или U6. (C и D) Анализ РНК FISH проводили в клетках TREx BCBL1-RTA, индуцированных 0,1 мкг / мл доксициклина в течение 24 часов. После индукции клетки фиксировали и гибридизовали с меченными Alexaflour антисмысловыми РНК-зондами, полученными с помощью транскрипции in vitro из плазмид, содержащих фрагменты ДНК KSHV, соответствующие T1.5 (красный) или PAN (зеленый) РНК. Ядра клеток контрастировали красителем Hoechst DNA. Субклеточное распределение РНК T1.5 и PAN в клетках TREx BCBL1-RTA исследовали с помощью конфокальной микроскопии (C). Количество B-клеток с коэкспрессией и субклеточных (C, цитоплазматических; N, ядерных) T1.5 и / или PAN РНК суммировано на диаграммах Венна (D).
https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003749.g008
РНК T1.5 содержит несколько коротких ORF и может кодировать небольшие пептиды [34].Таким образом, мы предположили, что T1.5 может быть экспортирован в цитоплазму. Как и ожидалось, мы продемонстрировали с помощью Нозерн-блоттинга его частичное присутствие в цитоплазме (рис. 8B). Анализы РНК FISH также показали распределение РНК T1.5 как в цитоплазме, так и в ядре клеток PEL, инфицированных KSHV, с использованием антисмыслового зонда РНК на 3′-конце T1.5 (фигура 8A, фигура S5). В этих двух анализах ядерная РНК PAN служила в качестве контроля (рис. 8B – C, рис. S5) и, как и ожидалось, отображалась преимущественно в ядре, перекрывающемся с окрашиванием ДНК Hoechst [8], [35].Интересно, что ядерная коэкспрессия T1.5 и PAN РНК оказывается взаимоисключающей. Мы обнаружили, что клетки, экспрессирующие высокий уровень ядерной РНК T1.5, отображают гораздо меньше ядерной РНК PAN или наоборот (рис. 8C). По сравнению с профилем субклеточного распределения РНК PAN, мы видели больше В-клеток с цитоплазматическим и ядерным распределением РНК T1.5 во время литической инфекции вируса (рис. 8D).
Применение PA-seq для исследования экспрессии IL6 хозяина и РНК GAPDH в В-клетках с литической инфекцией KSHV
Пригодность PA-seq была дополнительно расширена для изучения экспрессии нескольких генов хозяина с целью его возможного применения для выявления ландшафта сайта pA генома хозяина до и после литического инфицирования KSHV.Первоначально были выбраны человеческий IL6 (hIL6) и GAPDH, потому что B-клетки с литической инфекцией KSHV демонстрируют повышенную экспрессию человеческого IL6 [36], [37], но сниженную экспрессию GAPDH (фиг. 8B). Как показано на фиг. 9, результаты PA-seq для GAPDH и hIL6 были сопоставимы с результатами RT-qPCR. Снижение экспрессии РНК GAPDH может быть обнаружено обоими методами во всех трех протестированных линиях В-клеток с литической инфекцией KHSV и значительное увеличение экспрессии hIL6 в клетках TREx BCBL-1 с литической инфекцией KSHV.Однако ни в одном из этих методов мы не наблюдали увеличения экспрессии hIL6 в клетках JSC-1 с литическими коинфекциями KSHV и EBV, индуцированными бутиратом (очень мощным индуктором), но наблюдали повышенную экспрессию hIL6 в клетках BCBL-1 с вальпроатом (слабый индуктор) -индуцированной литической KSHV-инфекции с помощью RT-qPCR. Человеческий IL6 представляет собой цитокин, высокочувствительный к деградации РНК (уязвимый для), и PA-seq обнаруживает транскрипты, несущие интактный 3′-конец поли (A) хвоста, тогда как RT-qPCR обнаруживает только небольшую область РНК IL6.Таким образом, множественные факторы могут способствовать вариациям в обнаружении экспрессии гена hIL6 от одной клеточной линии к другой.
Фигура 9. Применение PA-seq для изучения экспрессии хозяина IL-6 и GAPDH во время литической инфекции KSHV.
Гистограммы и таблицы под каждой гистограммой показывают количественные уровни РНК GAPDH и человеческого IL6 (hIL6).
https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003749.g009
Обсуждение
В этом отчете мы представляем первый ландшафт вирусного генома сайтов полиаденилирования из трех клеточных линий PEL с латентной или литической инфекцией KSHV.Исчерпывающий ландшафт сайтов pA для всего генома KSHV был выявлен с помощью модифицированной стратегии PA-seq, которая передает разрешение отдельных нуклеотидов и специфичность цепи [24], [25]. Картированные сайты pA были аннотированы для всех известных генов KSHV и четырех предполагаемых новых генов в геноме KSHV. Уровень стабильной экспрессии каждого гена в геноме KSHV от вирусной латентной до литической инфекции количественно оценивали с помощью считывания PA-seq, связанного с каждым картированным сайтом pA, и использовали для различения вирусных латентных генов от литических генов.Путем анализа фланкирующих последовательностей каждого картированного сайта pA мы определили регуляторные элементы, управляющие полиаденилированием вирусной РНК и экспрессией генов. Что еще более важно, мы идентифицировали несколько вирусных генов, использующих альтернативное полиаденилирование как механизм их экспрессии во время инфекции KSHV. В целом, картированные сайты вирусного pA в этом исследовании имеют высокую точность как с точки зрения положения нуклеотидов, так и ориентации цепи по сравнению с известными вирусными сайтами pA, идентифицированными стандартными методами (таблица S3) [8], [34], [ 38] — [42].Однако нам не удалось проверить несколько сайтов pA, о которых ранее сообщалось в других исследованиях, в том числе сайт pA на nt 124061 для C-концевого усеченного LANA [43] и pA-сайт на nt 18200 (+) для экспрессии 0,7 транскрипт kb антисмысловой к K2 (vIL-6) [29], [31]. Транскрипт размером 0,7 т.п.н. был обнаружен с использованием специально изготовленных тайлинговых массивов, покрывающих весь геном KSHV [29], [31] и праймера T7-Oligo (dT) для синтеза кДНК образца. Вероятность внутреннего праймирования олигопраймера, используемого в исследовании, может создать аберрантный синтез зондов кДНК, гибридизующихся с мозаичными массивами.В нашем исследовании обнаружения любых сайтов псевдо-pA, возникающих в результате внутреннего прайминга, в значительной степени удалось избежать за счет исключения считывания последовательности выше A-участка в геноме KSHV. Стоит отметить, что экспрессия антисмыслового транскрипта 0,7 т.п.н. к K2 была первоначально обнаружена только в литически инфицированных вирусами эндотелиальных клетках iSLK.219, происходящих из саркомы Капоши, но не обнаружена в B-клетках, полученных из PEL [29]. В дополнение к отнесению известных сайтов pA и многих новых вирусных сайтов pA из этого исследования к ранее аннотированным генам KSHV, мы также идентифицировали несколько новых вирусных сайтов pA (таблица S3), которые не могли быть отнесены к каким-либо известным генам KSHV.Эти неназначенные сайты pA часто находятся в цепи, противоположной известным генам KSHV, включая ORF8, ORF21, ORF34, K8 и ORF50. Некоторые из этих антисмысловых транскриптов были описаны в других отчетах [29], и существование этих РНК, антисмысловых по отношению к транскриптам ORF21, ORF34 и ORF K8, могло быть подтверждено 3′-RACE в этом исследовании (фиг. 7). Их потенциальная роль в биологии KSHV сейчас активно исследуется.
KSHV был разработан для использования одного сайта pA для экспрессии нескольких генов во многих областях генома.Подтверждая это мнение, наш анализ PA-seq выявил многочисленные области генома KSHV с несколькими вирусными генами (до 5 генов), имеющими общий сайт pA (рис. 1B). Как следствие, многие гены KSHV экспрессируются в виде бицистронных или полицистронных транскриптов с длинной 3′-UTR, покрывающей кодирующую область (и) нижележащего (ых) гена (ов). Эти структуры РНК уязвимы для вирусных и клеточных miRNA [44] — [46], и все транскрипты из областей кластера генов могут регулироваться даже с помощью одной miRNA.Другие могут избежать этой регуляции с помощью сплайсинга РНК нижележащих ORF, как показано в ORF50 / K8 / K8.1 и транскрипте K1 [28], [47], [48]. Таким образом, понимание организации гена и положения сайта pA имеет решающее значение для исследований с выключением или выключением различных вирусных генов из генома KSHV, чтобы сделать соответствующую интерпретацию функции отдельных вирусных генов в кластерной области.
Использование каждого картированного сайта pA в этом исследовании определяли путем подсчета считываний последовательностей, связанных с каждым сайтом pA, для приближения к установившемуся уровню экспрессии соответствующего гена (ов).Когда считывание последовательности данного сайта pA при вирусной литической инфекции сравнивали с таковым при латентной вирусной инфекции, мы могли отличить использование сайта pA от вирусных литических генов до вирусных латентных генов. Сайт pA для экспрессии литического гена может использоваться в 100 раз больше при литической инфекции, чем при латентной инфекции, тогда как использование сайта pA для экспрессии латентного гена показывает лишь небольшое увеличение (менее чем в 10 раз) при литической инфекции. Два сайта pA ниже K12, классического латентного гена вируса, могут быть исключением, потому что оба показали повышенное использование при вирусной литической инфекции.Увеличение использования двух сайтов рА K12 согласуется с открытием, что литически индуцибельный промотор может быть активирован для экспрессии K12 [49]. Анализ использования сайта pA при литической вирусной инфекции также подтвердил, что РНК PAN является чрезвычайно распространенным видом РНК, при этом количество считываний последовательностей в картированном сайте pA в нуклеотиде 29740 (+) только от вирусной литической инфекции составляет более 80% от общей последовательности. -читывает для всех pA сайтов.
Более того, в этом исследовании было обнаружено, что эффективная экспрессия вирусных РНК-транскриптов связана с размером пика сайта pA.Следует отметить, что каждая запись могла вызвать только одно чтение в PA-seq. Таким образом, количество считываний в пике PA просто отражает количество соответствующего транскрипта. Фактически не ожидается, что большее количество считываний последовательностей приведет к увеличению размера пика PA, особенно когда события расщепления pA являются точными. Таким образом, наблюдаемая нами положительная корреляция между размерами пиков PA и уровнями экспрессии соответствующих транскриптов может указывать на некоторую степень «проскальзывания» в полиаденилировании вирусных транскриптов для обеспечения высокого уровня экспрессии на литической стадии.По сравнению с сайтами pA, попадающими в широкий или широкий пик, транскрипт РНК, несущий сайт pA с узким пиком, был менее экспрессирован, с меньшим количеством считываний последовательности PA-seq. Хотя это различие в сайтах pA с узким пиком может частично объясняться частым использованием неканонических PAS, должны быть другие неизвестные механизмы, управляющие использованием сайта pA с узким пиком, отличные от канонических и неканонических. PAS как таковой . Предыдущие сообщения показали, что сила PAS напрямую влияет на общий уровень зрелых транскриптов [50], [51] и определяется консервативностью цис-элементов РНК UGUAN выше по течению и движением U / G ниже по течению от PAS AAUAAA.Например, присутствие более слабого раннего PAS SV40 приводит к более низкой экспрессии репортерного гена, чем конструкция, содержащая более сильный поздний PAS SV40, когда оба управляются одним и тем же промотором [52]. Следовательно, сила PAS, регулирующая полиаденилирование отдельных вирусных транскриптов, может обеспечивать дополнительный уровень регуляции для точной настройки их правильной экспрессии во время вирусной инфекции. Кроме того, длина 3′-UTR может быть другим фактором, влияющим на уровень экспрессии РНК. Более короткие 3′-UTR в транскриптах KSHV д. Обеспечивать преимущество экспрессии вирусных генов при уходе от опосредованной miRNA деградации РНК [53], [54].
Недавние исследования выявили широко распространенное альтернативное полиаденилирование РНК в различных организмах и его важную роль в регуляции экспрессии генов [23]. Мы идентифицировали несколько генов KSHV, включая как некодирующие, так и белок-кодирующие гены, демонстрирующие альтернативное полиаденилирование РНК (Таблица S4). Эти альтернативные сайты pA ранее игнорировались из-за их относительно низкой распространенности и концептуальной предвзятости в отношении самых длинных обнаруживаемых транскриптов. Все альтернативные сайты pA, идентифицированные в нашем исследовании, были расположены в 3′-UTR соответствующих транскриптов, и, таким образом, их использование не влияет на кодирующий потенциал этих вариантных транскриптов.Примечательно, что альтернативное полиаденилирование было идентифицировано в двух наиболее распространенных вирусных днРНК PAN и T1.5, каждая из которых содержит три альтернативных сайта pA. Мы экспериментально проверили два альтернативных сайта pA для экспрессии соответствующих транскриптов T1.5 в B-клетках с вирусной литической инфекцией (рисунки 6, 8). Кроме того, в нашем более раннем исследовании сообщалось об альтернативном полиаденилировании экспрессии РНК PAN [35]. Следовательно, роль альтернативного полиаденилирования в экспрессии PAN и T1.5 станет привлекательной темой для лучшего понимания функции PAN и T1.5 днРНК.
Два необычных кластера сайтов pA, расположенных ниже участков внутренних повторов, были идентифицированы с помощью PA-seq, но не могли быть подтверждены с помощью 3 ‘RACE в этом исследовании. Первый кластер расположен в минус-цепи генома KSHV, ниже 13-п.н. повторов « vnct » и состоит из 5 отдельных сайтов pA в области ∼250 п.н. от нуклеотидов 29376 (-) до 29615 (-) . Второй кластер из трех сайтов pA от 118012 (-) до 118087 (-) также расположен в минусовой цепи ниже повторяющейся области « zppa », содержащей два повтора длиной 23 п.н. (Рисунок 1A).Эти сайты pA расположены в кодирующей области K12, но в предыдущих исследованиях не было обнаружено транскриптов, связанных с этими картированными сайтами pA [40]. Ни у одного из них нет канонического апстрима PAS. Считывания последовательности, обнаруживаемые с помощью PA-seq, более вероятно связаны с криптической транскрипцией из внутренних областей [55]. Однако эти транскрипты нестабильны, и их деградация клеточной экзосомой инициируется добавлением короткого хвоста pA, который опосредуется неканонической полимеразой pA и, следовательно, не зависит от PAS [56].Эти транскрипты с быстрым оборотом не могут быть обнаружены 3’RACE, но могут быть обнаружены нашим высокочувствительным PA-seq.
Материалы и методы
Ячейки
Клеточные линии первичной эффузионной лимфомы (JSC-1 [KSHV +, EBV +], BCBL-1 [только KSHV +] и вектор TREx BCBL-1 и –RTA [производное от BCBL-1]) [57], [58] были использованы в это исследование Вирусная литическая репликация индуцировалась в течение 48 часов 3 мМ бутирата натрия (Bu) для клеток JSC-1, 0,6 мМ вальпроата натрия (VA) для клеток BCBL-1 или 1 мкг / мл доксициклина (DOX) для обоих TREx. BCBL-1-вектор и –RTA клетки.Тотальную РНК выделяли с помощью TRIzol (Invitrogen), и загрязнение геномной ДНК удаляли с помощью набора RNeasy Mini (Qiagen), используя стадию расщепления ДНКазой I на колонке.
PA-seq
Третья библиотека для каждого образца была сконструирована с использованием модифицированной стратегии PA-seq [25], [24]. Вкратце, 10 мкг свободной от ДНК тотальной РНК из каждого образца, описанного выше, разрезали на фрагменты по 200–300 нуклеотидов путем нагревания (94 ° C в течение 3 минут) с магнием. После осаждения была проведена обратная транскрипция с использованием модифицированного олиго (dT) праймера (5′-bio-T 16 dUTTTVN-3 ‘,’ bio ‘обозначает двойную группу биотина,’ dU ‘обозначает дезоксиуридин,’ V ‘обозначает любой нуклеотид, кроме Т и «N» означает любой нуклеотид).После синтеза второй цепи полученная дцДНК была удалена с помощью Dynabeads MyOne C1 (Invitrogen) и дефосфорилирована с помощью термолабильной щелочной фосфатазы APex (Epicenter), что обеспечило специфичность цепи ПЦР для селективного лигирования адаптера. Дефосфорилированная дцДНК высвобождалась из гранул ферментным расщеплением USER (NEB) и ремонтировалась по концам с последующим добавлением основания «А» на концах. Примечательно, что только кДНК первой очереди содержит 5’-фосфат и, таким образом, может быть лигирована со штрих-кодом Illumina -линкер Y с парным концом без разрыва.Использование dUTP в праймере олиго (dT) и на этапе дефосфорилирования усиливают специфичность цепи и позволяют точно картировать сайт расщепления pA при разрешении по одному основанию. Продукты лигирования между 250 и 450 п.н. очищали на геле, и библиотеки PA-seq генерировали с помощью 16-цикловой ПЦР с высокоточной ДНК-полимеразой Phusion Hot Start (Finnzymes). Полученные библиотеки были подвергнуты секвенированию в двух повторностях с помощью секвенатора Illumina HiSeq2000.
Анализ последовательности
Полученные необработанные считывания сначала сравнивали с геномом KSHV (GenBank, акк U75698.1), геном штамма EBV B95-8 (GenBank в соответствии с номером V01555.2) и геном человека (версия UCSC hg19) с помощью инструмента выравнивания Берроуза-Уиллера (BWA) [59], допускающего два несоответствия, и обрабатываемого SAMtools [60]. Все уникально картированные пары последовательностей, специфичные для KSHV, использовали для последующего анализа. Сначала с помощью браузера генома IGV (www.broadinstitute.org/igv/) было визуализировано распределение полученных прочтений по геному KSHV, чтобы убедиться в их пригодности для анализа сайтов pA. Затем были определены отдельные сайты pA KSHV путем определения пиков с использованием программы F-Seq [26] в объединенных библиотеках.Пики PA-seq выше порога в 50 считываний считались истинными пиками. Пики были дополнительно уточнены путем удаления сайтов псевдо-pA, возникающих в результате «внутреннего праймирования» из-за постоянного «A-растяжения» в шаблоне. После вызова пика считывания последовательности были снова присвоены отдельным образцам для получения подсчетов считываний как для латентной, так и для литической инфекции. Для получения относительного уровня экспрессии общее количество считываний было нормализовано на миллион к общему количеству считываний, сопоставленных как с KSHV, так и с человеком [61].
Анализ мотивов последовательностей
Последовательность, окружающая картированные сайты pA, была покрыта от 50 нуклеотидов выше и 50 нуклеотидов ниже каждого идентифицированного сайта pA для анализа мотива. Процент встречаемости для каждого нуклеотида был рассчитан, нанесен на график и сглажен с помощью функции лесса в программном обеспечении R (R версия 2.12.1). Сигналы полиаденилирования (PAS), возникающие в пределах 50 н.ст. перед сайтом pA, были назначены вручную. Графическое представление сохранения последовательности было создано Weblogo v3 (http: // weblogo.berkeley.edu/) [62], [63].
ГОНКА 3 ′
3′-конец транскриптаидентифицировали с помощью набора для амплификации кДНК SMARTer RACE (Clontech). Последовательности праймеров, используемые в 3’RACE, перечислены в таблице S11. Полученные продукты 3’RACE секвенировали непосредственно или после клонирования в векторе pCR2.1-TOPO (Invitrogen).
Нозерн-блот
Тотальную РНК выделяли с использованием реагента TRIzol. Цитоплазматическую и ядерную фракции РНК выделяли, как описано [64]. Полученную РНК (5 мкг) разделяли на агарозном геле и анализировали Нозерн-блоттингом с 32 P-меченными олигозондами: oVM 208 (5′-CGTGGCTGTGCTTCTCATCAT-3 ‘) для T1.5 днРНК, oJM7 (5’-GTTACACAACGCTTTCACCTACA-3 ‘) для днРНК PAN, oZMZ270 (5′-TGAGTCCTTCCACGATACCAAA-3′) для GAPDH и oST197 (5’-AAAATACGGAACGNATC для UHPDH).
РНК FISH
Зонды одноцепочечной смысловой и антисмысловой РНК были получены с помощью набора FISH Tag RNA Multicolour Kit (Invitrogen) путем транскрипции in vitro с использованием фрагмента ДНК генома KSHV (нуклеотиды 24906–25375 для T1.5 и нуклеотиды 29018–29481 для днРНК PAN) как шаблоны. Гибридизацию проводили, как описано ранее [65].После иммобилизации клетки фиксировали 2% параформальдегидом, пермеабилизировали 0,5% Triton X-100 и блокировали гибридизационным буфером (50% формамид, 5 × SSC, 0,1% Tween-20, 50 мкг / мл гепарина, 100 мкг / мл лосося. ДНК). Гибридизацию проводили в течение ночи при 55 ° C. Ядра контрастировали красителем Hoechst. Снимки были получены с помощью лазерного сканирующего микроскопа Zeiss LSM510 META (Zeiss).
ОТ-КПЦР
Общую клеточную РНК, выделенную с помощью TRIzol (Invitrogen), обрабатывали ДНКазой, не содержащей Турбо ДНК, для удаления ДНК.Пять микрограммов общей клеточной РНК использовали для синтеза кДНК с использованием SuperScript First-Stand Synthesis System (Invitrogen). Уровни транскриптов GAPDH и человеческого IL6 (hIL6) определяли с помощью RT-qPCR с использованием метода ΔC t [44], [66], [67].
Дополнительная информация
Рисунок S1.
Анализ PA-seq транскриптов KSHV. (A) Три линии B-клеток, полученные из PEL (первичная эффузионная лимфома), инфицированных KSHV, использовали в анализе PA-seq во время латентной инфекции вируса (левый столбец) или литической инфекции (правый столбец).(B) Общее количество считываний последовательностей из каждого образца, сопоставленного с геномом KSHV (Genbank в соответствии с U75698.1) или геномом человека (версия UCSC hg19). Другие неназначенные чтения, включая те, которые картированы в геном EBV (Genbank согласно № V01555.2) (3233 чтения или 0,02% в латентном и 1998744 чтения или 13,11% в литическом заражении клеток JSC-1) показаны как другие. (C) Гистограмма, изображающая% распределение считываний последовательности из каждого образца, назначенного для KSHV или генома человека, или других неназначенных считываний.
https: // doi.org / 10.1371 / journal.ppat.1003749.s001
(TIF)
Рисунок S2.
Определение сайтов pA KSHV с помощью анализа F-seq. Диаграмма показывает пик PA (красная линия), идентифицированный анализом F-seq считываний вирусных последовательностей (синие столбцы), выровненных с геномом KSHV. Режим PA, положение нуклеотида с наибольшим числом считываний в пределах пика, был обозначен как сайт pA. Размер пика — это расстояние от положения нуклеотида в начале до конца пика, в пределах которого назначен сайт pA.Общее количество всех чтений в пределах пика представляет использование сайта pA.
https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003749.s002
(TIF)
Рисунок S3.
Визуальное распределение KSHV-специфических считываний последовательностей, полученных с помощью PA-seq, по вирусному геному. (A) Положения и частота (максимально 500) считываний последовательностей, полученных от В-клеток со скрытой (синие полосы) или литической (красные полосы) инфекцией, были визуализированы на геноме KSHV с помощью программного обеспечения IGV (http: // www.broadinstitute.org/igv/). Зеленые линии посередине представляют положения зарегистрированных генов KSHV. (B) Увеличенное изображение локуса, содержащего кластер генов ORF50 (RTA) -K8-K8.1, где считывания последовательности распределены в положительной (+) цепи генома KSHV. Ниже представлена диаграмма ранее описанной структуры гена и первичных транскриптов, связанных с этим локусом гена. Прямоугольники представляют собой ORF с положениями картированных промоторов (стрелки) и сайтом расщепления pA (CS). Считывания при латентной инфекции представляют собой спонтанную реактивацию этого локуса в очень небольшой фракции клеток BCBL-1 и TREx-клеток, происходящих из BCBL-1.
https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003749.s003
(TIF)
Рисунок S5.
Локализация днРНК KSHV T1.5 и PAN в клетках PEL. Специфичность каждого зонда, описанного на фиг. 8, тестировали на клетках TREx, обработанных доксициклином, с помощью эксперимента РНК FISH, как описано в экспериментальных процедурах. Специфический сигнал наблюдался только в клетках TREx-RTA, но не в клетках TREx-вектора.
https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003749.s005
(TIF)
Таблица S6.
Использование отдельных сайтов pA KSHV во время латентной и литической инфекции из объединенных наборов данных трех клеточных линий PEL (таблица S5). Кратное увеличение для каждого сайта pA рассчитывали путем деления считываний последовательности из литических образцов на количество считываний из латентного периода. N / A-не применимо.
https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003749.s011
(PDF)
Таблица S7.
Классификация сайтов KSHV pA на основе размера пика PA. Размер каждого пика рассчитывали как расстояние между началом и концом пика и коррелировали с использованием сайта pA (таблица S1). В зависимости от размера пиков все сайты pA были разделены на три категории: узкие (NP, ≤30 нтс), широкие (BP,> 30, ≤45 нтс) или широкие (WP,> 45 нтс) пики.
https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003749.s012
(PDF)
Благодарности
Благодарим Майкла Крулака за техническую помощь в получении конфокальных изображений.Мы благодарим Джеффри Стрэтерна и Михаила Кашлева за критическое прочтение нашей рукописи.
Вклад авторов
Задумал и спроектировал эксперименты: VM TN JZ ZMZ. Проведены эксперименты: В.М. ТН. Проанализированы данные: VM TN WY BM JZ ZMZ. Написал статью: ВМ ТН ЮЗ ЗМЗ.
Ссылки
- 1. Руссо Дж. Дж., Богензки Р. А., Чиен М. С., Чен Дж., Ян М. и др. (1996) Нуклеотидная последовательность вируса герпеса, связанного с саркомой Капоши (HHV8). Proc Natl Acad Sci U S A 93: 14862–14867.
- 2. Чанг Й., Сезарман Э., Пессин М.С., Ли Ф., Калпеппер Дж. И др. (1994) Идентификация последовательностей ДНК, подобных герпесвирусу, в саркоме Капоши, связанной со СПИДом. Наука 266: 1865–1869.
- 3. Cesarman E, Chang Y, Moore PS, Said JW, Knowles DM (1995) Связанные с саркомой герпеса последовательности ДНК Капоши в лимфомах на основе полостей тела, связанных со СПИДом. N Engl J Med 332: 1186–1191.
- 4. Dupin N, Diss TL, Kellam P, Tulliez M, Du MQ и др.(2000) HHV-8 связан с плазмобластным вариантом болезни Кастлемана, который связан с HHV-8-положительной плазмобластной лимфомой. Кровь 95: 1406–1412.
- 5. Sun R, Lin SF, Gradoville L, Yuan Y, Zhu F и др. (1998) Вирусный ген, который активирует экспрессию литического цикла герпесвируса Капоши, связанного с саркомой. Proc Natl Acad Sci U S A 95: 10866–10871.
- 6. Сан Р., Лин С.Ф., Стаскус К., Градовилль Л., Гроган Э. и др. (1999) Кинетика экспрессии гена герпесвируса, связанного с саркомой Капоши.J Virol 73: 2232–2242.
- 7. Lukac DM, Kirshner JR, Ganem D (1999) Активация транскрипции продуктом 50 открытой рамки считывания герпесвируса Капоши, связанного с саркомой, необходима для литической реактивации вируса в B-клетках. J Virol 73: 9348–9361.
- 8. Sun R, Lin SF, Gradoville L, Miller G (1996) Полиаденилилированная ядерная РНК, кодируемая вирусом герпеса, связанным с саркомой Капоши. Proc Natl Acad Sci U S A 93: 11883–11888.
- 9. Cai X, Lu S, Zhang Z, Gonzalez CM, Damania B и др.(2005) Связанный с саркомой герпесвирус Капоши экспрессирует массив вирусных микроРНК в латентно инфицированных клетках. Proc Natl Acad Sci U S A 102: 5570–5575.
- 10. Xu Y, Ganem D (2010) Осмысление антисмысла: казалось бы, некодирующие РНК, антисмысловые по отношению к главному регулятору литической репликации герпесвируса, ассоциированного с саркомой Капоши, не регулируют этот транскрипт, но служат мРНК, кодирующими небольшие пептиды. J Virol 84: 5465–5475.
- 11. Colgan DF, Manley JL (1997) Механизм и регуляция полиаденилирования мРНК.Genes Dev 11: 2755–2766.
- 12. Lewis JD, Gunderson SI, Mattaj IW (1995) Влияние 5′- и 3′-концевых структур на метаболизм пре-мРНК. J Cell Sci Suppl 19: 13–19.
- 13. Викенс М., Андерсон П., Джексон Р.Дж. (1997) Жизнь и смерть в цитоплазме: сообщения с 3′-конца. Curr Opin Genet Dev 7: 220–232.
- 14. Ши Й., Ди Дж., Тейлор Д., Саркешик А., Райс В. Дж. И др. (2009) Молекулярная архитектура 3 ‘процессингового комплекса пре-мРНК человека.Mol Cell 33: 365–376.
- 15. Salisbury J, Hutchison KW, Graber JH (2006) Многовидовое сравнение последующих элементов 3′-процессинга многоклеточных животных и мотива распознавания РНК CstF-64. BMC Genomics 7: 55
- 16. Hu J, Lutz CS, Wilusz J, Tian B (2005) Биоинформатическая идентификация кандидатов цис-регуляторных элементов, участвующих в полиаденилировании мРНК человека. РНК 11: 1485–1493.
- 17. Bagga PS, Ford LP, Chen F, Wilusz J (1995) G-богатый вспомогательный нижестоящий элемент имеет различные требования к последовательности и положению и обеспечивает эффективный процессинг пре-мРНК 3′-конца посредством транс-действующего фактора.Nucleic Acids Res 23: 1625–1631.
- 18. Chen F, Wilusz J (1998). Вспомогательные нижестоящие элементы необходимы для эффективного полиаденилирования пре-мРНК млекопитающих. Nucleic Acids Res 26: 2891–2898.
- 19. Миллевой С., Вагнер С. (2010) Молекулярные механизмы регуляции 3′-концевого процессинга эукариотической пре-мРНК. Nucleic Acids Res 38: 2757–2774.
- 20. Tian B, Hu J, Zhang H, Lutz CS (2005) Крупномасштабный анализ полиаденилирования мРНК генов человека и мыши.Nucleic Acids Res 33: 201–212.
- 21. Mangone M, Manoharan AP, Thierry-Mieg D, Thierry-Mieg J, Han T. и др. (2010) Пейзаж C. elegans 3′UTRs. Наука 329: 432–435.
- 22. Нагалакшми У, Ван З., Верн К., Шоу С., Раха Д. и др. (2008) Транскрипционный ландшафт генома дрожжей, определенный с помощью секвенирования РНК. Наука 320: 1344–1349.
- 23. Ди Г., Нишида К., Мэнли Дж. Л. (2011) Механизмы и последствия альтернативного полиаденилирования.Mol Cell 43: 853–866.
- 24. Ни Т., Янг Й., Хафез Д., Ян В., Кизеветтер К. и др. (2013) Отчетливые ландшафты полиаденилирования различных тканей человека, выявленные с помощью модифицированной стратегии PA-seq. BMC Genomics 14: 615.
- 25. Hafez D, Ni T, Mukherjee S, Zhu J, Ohler U (2013) Общегеномная идентификация и прогнозное моделирование тканеспецифичного альтернативного полиаденилирования. Биоинформатика 29: i108 – i116.
- 26. Boyle AP, Guinney J, Crawford GE, Furey TS (2008) F-Seq: средство оценки плотности признаков для тегов последовательностей с высокой пропускной способностью.Биоинформатика 24: 2537–2538.
- 27. Zhu FX, Cusano T, Yuan Y (1999) Идентификация немедленных ранних транскриптов вируса герпеса, связанного с саркомой Капоши. J Virol 73: 5556–5567.
- 28. Tang S, Zheng ZM (2002). Экзон 3 герпесвируса Капоши, ассоциированного с саркомой K8, содержит три сайта 5′-сплайсинга и сайт начала транскрипции K8.1. J Biol Chem 277: 14547–14556.
- 29. Chandriani S, Xu Y, Ganem D (2010) Литический транскриптом вируса герпеса, связанного с саркомой Капоши, выявляет обширную транскрипцию некодирующих областей, в том числе областей, антисмысловых по отношению к важным генам.J Virol 84: 7934–7942.
- 30. Pauws E, van Kampen AH, van de Graaf SA, de Vijlder JJ, Ris-Stalpers C (2001) Гетерогенность в сайтах расщепления полиаденилированием в последовательностях мРНК млекопитающих: значение для анализа SAGE. Nucleic Acids Res 29: 1690–1694.
- 31. Дрезанг Л. Р., Тевтон-младший, Фенг Х., Джейкобс Дж. М., Кэмп Д. Г. и др. (2011) Комбинированный анализ транскриптома и протеома вирусов лимфотропных опухолей человека: сведения об обнаружении и открытии вирусных генов.BMC Genomics 12: 625.
- 32. Ван И, Ли Х, Чан М.Ю., Чжу FX, Лукач Д.М. и др. (2004) Герпесвирус Капоши, связанный с ori-Lyt-зависимой репликацией ДНК: цис-действующие требования для репликации и транскрипции ori-Lyt-ассоциированной РНК. J Virol 78: 8615–8629.
- 33. Wang Y, Tang Q, Maul GG, Yuan Y (2006) Герпесвирус, связанный с саркомой Капоши, ori-Lyt-зависимая репликация ДНК: двойная роль репликации и активатора транскрипции. J Virol 80: 12171–12186.
- 34. Taylor JL, Bennett HN, Snyder BA, Moore PS, Chang Y (2005) Транскрипционный анализ латентных и индуцибельных транскриптов герпесвируса Капоши, связанных с саркомой, в области от K4 до K7. J Virol 79: 15099–15106.
- 35. Massimelli MJ, Majerciak V, Kruhlak M, Zheng ZM (2013) Взаимодействие между полиаденилат-связывающим белком 1 и ORF57 герпесвируса Капоши, ассоциированного с саркомой, в накоплении полиаденилированной ядерной РНК, вирусной длинной некодирующей РНК. Дж. Вирол 87: 243–256.
- 36. Aoki Y, Yarchoan R, Braun J, Iwamoto A, Tosato G (2000) Вирусные и клеточные цитокины в злокачественных лимфоматозных выпотах, связанных со СПИДом. Кровь 96: 1599–1601.
- 37. Канг Дж. Г., Припузова Н., Майерчак В., Круглак М., Ле С. Ю. и др. (2011) ORF57, связанный с саркомой герпеса Капоши, способствует уходу вирусного и человеческого интерлейкина-6 от подавления, опосредованного микроРНК. J Virol 85: 2620–2630.
- 38. Wang SS, Chang PJ, Chen LW, Chen LY, Hung CH и др.(2012) Положительная и отрицательная регуляция в промоторе гена ORF46 герпесвируса Капоши, связанного с саркомой. Virus Res 165: 157–169.
- 39. Majerciak V, Yamanegi K, Zheng ZM (2006) Структура гена и экспрессия ORF56, ORF57, ORF58 и ORF59, связанного с саркомой герпеса Капоши. J Virol 80: 11968–11981.
- 40. Li H, Komatsu T, Dezube BJ, Kaye KM (2002) Транскрипт K12, ассоциированного с саркомой герпеса Капоши, из первичной лимфомы с выпотом содержит сложные повторяющиеся элементы, сплайсирован и инициируется новым промотором.J Virol 76: 11880–11888.
- 41. Sarid R, Wiezorek JS, Moore PS, Chang Y (1999) Характеристика и регуляция клеточного цикла латентных генов главного герпесвируса Капоши, связанного с саркомой (вирус герпеса человека 8), и их промотора. J Virol 73: 1438–1446.
- 42. Chiou CJ, Poole LJ, Kim PS, Ciufo DM, Cannon JS и др. (2002) Паттерны экспрессии генов и функция трансактивации, проявляемая хемокиновым рецепторным белком vGCR (ORF74) вируса герпеса Капоши, ассоциированного с саркомой.J Virol 76: 3421–3439.
- 43. Canham M, Talbot SJ (2004) Встречающаяся в природе С-концевая усеченная изоформа латентного ядерного антигена герпесвируса Капоши, связанного с саркомой, не связана с вирусной эписомальной ДНК. J Gen Virol 85: 1363–1369.
- 44. Канг Дж. Г., Маджерчак В., Ульдрик Т. С., Ван Х, Крулак М. и др. (2011) Связанный с саркомой герпесвирус Капоши IL-6 и человеческий IL-6 открытые рамки считывания содержат сайты связывания miRNA и являются предметом клеточной регуляции miRNA.Дж. Патол 225: 378–389.
- 45. Lin HR, Ganem D (2011) Вирусная мишень микроРНК позволяет понять роль трансляции в управлении доступностью мишени микроРНК. Proc Natl Acad Sci U S A 108: 5148–5153.
- 46. Bellare P, Ganem D (2009) Регулирование экспрессии белка литического переключателя KSHV с помощью кодируемой вирусом микроРНК: эволюционная адаптация, которая точно настраивает литическую реактивацию. Клеточный микроб-хозяин 6: 570–575.
- 47. Chandriani S, Ganem D (2010) Профилирование транскриптов на основе массивов и анализ обратной транскрипции с ограниченным разведением с помощью ПЦР выявляют дополнительные латентные гены в герпесвирусе Капоши, связанном с саркомой.J Virol 84: 5565–5573.
- 48. Pearce M, Matsumura S, Wilson AC (2005) Транскрипты, кодирующие K12, v-FLIP, v-циклин и кластер микроРНК вируса герпеса, ассоциированного с саркомой Капоши, происходят от общего промотора. J Virol 79: 14457–14464.
- 49. Matsumura S, Fujita Y, Gomez E, Tanese N, Wilson AC (2005) Активация основного латентного локуса герпесвируса, связанного с саркомой Капоши, с помощью белка литического переключателя RTA (ORF50). J Virol 79: 8493–8505.
- 50.Chao LC, Jamil A, Kim SJ, Huang L, Martinson HG (1999) Сборка аппарата расщепления и полиаденилирования требует около 10 секунд in vivo и быстрее для сильных, чем для слабых поли (A) сайтов. Mol Cell Biol 19: 5588–5600.
- 51. West S, Proudfoot NJ (2009) Терминация транскрипции усиливает экспрессию белка в клетках человека. Mol Cell 33: 354–364.
- 52. Carswell S, Alwine JC (1989) Эффективность использования сайта позднего полиаденилирования обезьяньего вируса 40: эффекты вышестоящих последовательностей.Mol Cell Biol 9: 4248–4258.
- 53. Mayr C, Bartel DP (2009) Широко распространенное укорочение 3’UTR путем альтернативного расщепления и полиаденилирования активирует онкогены в раковых клетках. Cell 138: 673–684.
- 54. Hausser J, Syed AP, Bilen B, Zavolan M (2013) Анализ CDS-расположенных сайтов-мишеней miRNA предполагает, что они могут эффективно ингибировать трансляцию. Genome Res 23: 604–615.
- 55. Усдин К. (2008) Биологические эффекты простых тандемных повторов: уроки болезней распространения повторов.Genome Res 18: 1011–1019.
- 56. Wyers F, Rougemaille M, Badis G, Rousselle JC, Dufour ME и др. (2005) Транскрипты Cryptic pol II разрушаются путем контроля ядерного качества с участием новой поли (A) полимеразы. Ячейка 121: 725–737.
- 57. Cannon JS, Ciufo D, Hawkins AL, Griffin CA, Borowitz MJ и др. (2000) Новая клеточная линия, происходящая из первичной эффузионной лимфомы, дает высокоинфекционный супернатант, содержащий герпесвирус саркомы Капоши. Дж. Вирол, 74: 10187–10193.
- 58. Накамура Х., Лу М., Гвак Й., Сувлис Дж., Цайхнер С.Л. и др. (2003) Глобальные изменения в паттернах экспрессии генов ассоциированного с саркомой вируса Капоши после экспрессии индуцируемого тетрациклином трансактиватора Rta. J Virol 77: 4205–4220.
- 59. Ли Х, Дурбин Р. (2009) Быстрое и точное согласование короткого чтения с преобразованием Барроуза-Уиллера. Биоинформатика 25: 1754–1760.
- 60. Ли Х, Хандакер Б., Вайсокер А., Феннелл Т., Руан Дж. И др.(2009) Формат Sequence Alignment / Map и SAMtools. Биоинформатика 25: 2078–2079.
- 61. Mortazavi A, Williams BA, McCue K, Schaeffer L, Wold B (2008) Картирование и количественная оценка транскриптомов млекопитающих с помощью RNA-Seq. Нат Методы 5: 621–628.
- 62. Шнайдер Т.Д., Стивенс Р.М. (1990) Логотипы последовательностей: новый способ отображения согласованных последовательностей. Nucleic Acids Res 18: 6097-6100.
- 63. Crooks GE, Hon G, Chandonia JM, Brenner SE (2004) WebLogo: генератор последовательного логотипа.Genome Res 14: 1188–1190.
- 64. Majerciak V, Yamanegi K, Nie SH, Zheng ZM (2006) Структурный и функциональный анализ сигналов ядерной локализации ORF57 вируса герпеса, связанного с саркомой Капоши, в живых клетках. J Biol Chem 281: 28365–28378.
- 65. Пилкингтон Г.Р., Маджерчак В., Медведь Дж., Ураниши Х., Чжэн З.М. и др. (2012) ORF57 герпесвируса Капоши, ассоциированного с саркомой, не является истинным экспортным фактором. J Virol 86: 13089–13094.
- 66. Massimelli MJ, Kang JG, Majerciak V, Le SY, Liewehr DJ и др.(2011) Стабильность длинной некодирующей вирусной РНК зависит от 9-нуклеотидного основного элемента на 5′-конце РНК для взаимодействия с вирусной ORF57 и клеточным PABPC1. Int J Biol Sci 7: 1145–1160.
- 67. Ливак К.Дж., Шмиттген Т.Д. (2001) Анализ данных относительной экспрессии генов с использованием количественной ПЦР в реальном времени и метода 2 (-Delta Delta C (T)). Методы 25: 402–408.